3R-吲哚甲基-6R-酰胺侧链氨基酸修饰的哌嗪-2,5-二酮，其合成，活性和应用制造技术

本发明专利技术公开了下式的(3R,6R)‑3‑(AA‑氨基正己酰基氨基正丁基)‑6‑(吲哚‑3‑甲基)‑哌嗪‑2,5‑二酮(AA为L‑Gln残基和L‑Asn残基)。公开了它们的制备方法、公开了它们的抗肿瘤活性，公开了它们的抗肿瘤转移活性，以及公开了它们的抗炎活性活性，因而本发明专利技术公开了它们在制备抗肿瘤药物，抗肿瘤转移药物和抗炎药物中的应用。

【技术实现步骤摘要】
3R-吲哚甲基-6R-酰胺侧链氨基酸修饰的哌嗪-2,5-二酮，其合成，活性和应用
本专利技术涉及(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮。涉及它们的制备方法、涉及它们的抗肿瘤活性，涉及它们的抗肿瘤转移活性,以及涉及它们的抗炎活性活性，因而本专利技术涉及它们在制备抗肿瘤药物，抗肿瘤转移药物和抗炎药物中的应用。本专利技术属于生物医药领域。
技术介绍
肿瘤严重威胁人类的健康。除了自身对肿瘤患者的预后恶劣之外，肿瘤并发的转移进一步恶化患者的预后。例如，超过90％以上肿瘤患者都是死于转移。由于现有抗肿瘤药物没有抗肿瘤转移作用，所以肿瘤化疗的临床疗效不理想。专利技术抗肿瘤转移的药物是临床的迫切需求。此前，专利技术人曾公开S,S-,R,R-,R,S-和S,R-四种构型的的二酮哌嗪在0.5μM浓度可抑制HCCLM3(高转移人肝癌细胞)迁移和侵袭。后来专利技术人又公开R,R-构型的二酮哌嗪在5μmol/kg剂量下可抑制C57BL/6小鼠的肿瘤向肺转移。可是最低有效剂量为5μmol/kg。为了降低最低有效剂量，专利技术人对R,R-构型的二酮哌嗪的丁氨基展开了各种修饰。经过3年探索，发现用L-Gln和L-Asn酰化的氨基己酸酰化R,R-构型的二酮哌嗪的丁氨基不仅可使抗肿瘤转移的最低有效剂量降至0.5μmol/kg，而且可使抗肿瘤和抗炎的最低有效剂量都降至0.5μmol/kg。因为药物的毒副作用都可以随剂量降低而消失，所以有效剂量降低10倍表明了这种结构修饰有突出的技术效果。根据这些发现，专利技术人提出了本专利技术。专利技术内容本专利技术的第一个内容是提供下式的(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(AA为L-Gln残基和L-Asn残基)。本专利技术的第二个内容是提供(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(AA为L-Gln残基和L-Asn残基)的合成方法，该方法包括：(1)D-Boc-Lys(Cbz)与D-Trp-OBzl缩合得Boc-Lys(Cbz)-Trp-OBzl；(2)Boc-Lys(Cbz)-Trp-OBzl在氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc得Lys(Cbz)-Trp-OBzl；(3)Lys(Cbz)-Trp-OBzl含5％碳酸氢钠水溶液的乙酸乙酯中环合生成(3R,6R)-3-(苄氧羰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(1)；(4)化合物1氢解脱苄氧羰基得到(3R,6R)-3-(氨基正丁基基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(2)；(5)氨基正己酸甲酯与Cbz-AA(AA为Gln残基和Asn残基)缩合得Cbz-AA-氨基正己酸甲酯(3a,b)；(6)化合物3a,b皂化脱除甲酯得到Cbz-AA-氨基正己酸(4a,b)；(7)化合物2与化合物4a,b缩合得(3R,6R)-3-(Cbz-AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(5a,b)；(8)化合物5a,b在二甲基甲酰胺中氢解脱Cbz保护得到(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(6a,b)。本专利技术的第三个内容是评价(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(AA为L-Gln残基和L-Asn残基)抑制C57BL/6小鼠抗肺癌转移活性。本专利技术的第四个内容是评价(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(AA为L-Gln残基和L-Asn残基)对ICR小鼠炎症的抑制作用。本专利技术的第五个内容是评价(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(AA为L-Gln残基和L-Asn残基)对S180小鼠肿瘤生长的抑制应用。附图说明图1(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(6a,b)的合成路线.3a-6a中AA为L-Gln残基；3b-6b中AA为L-Asn残基；i)二环己基碳二亚胺(DCC),1-羟基苯并三唑(HOBt),N-甲基吗啉(NMM),四氢呋喃(THF)；ii)氯化氢的乙酸乙酯溶液；iii)乙酸乙酯,5％碳酸氢钠；iv)二甲基甲酰胺(DMF),Pd/C,H2；v)二环己基碳二亚胺(DCC),1-羟基苯并三唑(HOBt),N-甲基吗啉(NMM),N,N-二甲基甲酰胺(DMF)；vi)甲醇，NaOH(2M)。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1制备Boc-Lys(Cbz)-Trp-OBzl将7.7g(20mmol)Boc-Lys(Cbz)混悬于100mL无水四氢呋喃(THF)中，在冰浴下依次往悬浮液中加2.7g(20mmol)1-羟基苯并三氮唑(HOBt)及5.0g(25mmol)二环己基碳二亚胺(DCC)，然后搅拌30min。之后，加8.0g(25mmol)Trp-OBzl。反应化合物逐滴加入N-甲基吗啉(NMM)调节pH至9。反应混合物先在冰浴下搅拌1h，再室温搅拌12h。反应化合物过滤，滤液减压浓缩，残留物用150mL乙酸乙酯溶液溶解。得到的乙酸乙酯溶液依次用5％KHSO4水溶液洗3次，饱和NaCl水溶液洗3次。乙酸乙酯层用无水Na2SO4干燥12h，过滤，滤液减压浓缩至干。得到的黄色糖浆物经硅胶柱层析纯化(CH2Cl2/CH3OH,100:1)得到12.0g(88％)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e):657[M+H]+。实施例2制备Lys(Cbz)-Trp-OBzl在冰浴与搅拌下3.8g(5mmol)Boc-Lys(Cbz)-Trp-OBzl与52mL氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)缓慢混合。得到的溶液在冰浴中搅拌5h。之后，反应混合物减压浓缩。残留物用50mL无水乙酸乙酯溶解，得到的溶液减压浓缩。该操作重复三次。残留物用无水乙醚充分洗，得到3.41g(93％)标题化合物，为黄色粉末。ESI-MS(m/e):557[M+H]+。实施例3制备(3R,6R)-3-(苄氧羰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(1)将3.45g(6.2mmol)Lys(Cbz)-Trp-OBzl用150mL乙酸乙酯溶解。得到的溶液用浓度为5％的碳酸氢钠水溶液洗三次之后，乙酸乙酯溶液室温搅拌12h使无色固体充分析出。滤出1.8g(51％)标题化合物。ESI-MS(m/e):449[M+H]+。实施例4制备(3R,6R)-3-(氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(2)往1.9g(4.2mmol)(3R,6R)-3-(苄氧羰基丁氨基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(1)与20mL无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF)的溶液中加200mgPd/C，通入H2，室温搅拌反应48h。滤去Pd/C，滤液减压浓缩得1.2g(92％)标题化合物，为无色粉末。ESI本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.下式的(3R,6R)‑3‑(AA‑氨基正己酰基氨基正丁基)‑6‑(吲哚‑3‑甲基)‑哌嗪‑2,5‑二酮，AA为L‑Gln残基和L‑Asn残基，

【技术特征摘要】
1.下式的(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮，AA为L-Gln残基和L-Asn残基，2.权利要求1的(3R,6R)-3-(AA-氨基正己酰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮的制备方法，该方法包括：(1)D-Boc-Lys(Cbz)与D-Trp-OBzl缩合得Boc-Lys(Cbz)-Trp-OBzl；(2)Boc-Lys(Cbz)-Trp-OBzl在氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc得Lys(Cbz)-Trp-OBzl；(3)Lys(Cbz)-Trp-OBzl在含5％碳酸氢钠水溶液的饱和乙酸乙酯中环合生成(3R,6R)-3-(苄氧羰基氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(1)；(4)化合物1氢解脱苄氧羰基得到(3R,6R)-3-(氨基正丁基)-6-(吲哚-3-甲基)-哌嗪-2,5-二酮(2)；(5)氨基正己酸甲酯与Cbz-AA(AA为Gln残基和Cbz-A...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵明，彭师奇，王玉记，吴建辉，张筱宜，丛林，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：北京,11