一种实脾散冻干粉多药味多信息、快速薄层鉴别方法技术

本发明专利技术涉及一种实脾散冻干粉多药味多信息、快速薄层鉴别方法。其特征在于：用简便、快捷的前处理方法得到供试品与对照药材溶液，采用同一供试品溶液，在六块薄层板上，鉴别了9味药材，4种不同的检视条件下，检视了10余种不同的中药成分；各斑点清晰，相互交叉，但不同层次的成分，又互不干扰。做到了多药味组成的水提取复方制剂中鉴别增订率达到81.8％。完成这些鉴别只需样品0.5g、提取溶剂与展开剂100ml、时间4小时。方法简便、快捷、高效，鉴别增订率之高，是目前已报道方法都不具备的。并探讨到4种药材的新特征斑点。为实脾散冻干粉的质量控制，提供了多药味多信息、快速薄层鉴别方法。

【技术实现步骤摘要】
一种实脾散冻干粉多药味多信息、快速薄层鉴别方法
本专利技术涉及一种实脾散冻干粉多药味多信息、快速薄层鉴别方法。
技术介绍
在中药复方制剂中，特别是传统水煎煮的复方制剂，依据相似相容的提取原则，制剂中脂溶性的成分一部分是很难提取到的，水溶性成分提取的较多，相互干扰严重，水提取之后，原药材项下以脂溶性成分的薄层鉴别，基本已无法采用，必须寻找水溶性成分的鉴别特征点，限于技术的难度，所以其水提取制剂的薄层鉴别增订率低，定量测定指标少。以2015年版中国药典一部为例，收载的水煎煮的乙肝宁颗粒，十三味中药组成，仅增订了4味药材的薄层鉴别。不但鉴别增订率低，且鉴别方法也非常繁琐、复杂，4项鉴别的完成需要样品85g或15g(含乳糖)、仅前处理溶剂386ml、时间10～12小时。4项鉴别要制备4种供试品溶液，在4块薄层板上，4次展开完成；收载的二丁颗粒，由4味药材组成，仅增订了一项薄层鉴别。其前处理需要样品15g或3g(含乳糖)、处理溶剂82ml、时间2小时；收载的儿宝颗粒，由十一味药材组成，增订了4味药材的薄层鉴别。且鉴别方法也非常繁琐、复杂，4项鉴别要制备3种供试品溶液，在4块薄层板上，4次展开完成。共需要样品80g、仅前处理溶剂295ml、时间8小时。加上展开剂和展开时间，花费的有机溶剂和时间就更多了，等等，类似例子举不胜举。综上，薄层鉴别基本都是一个品种，如有N项鉴别，就要制备N种供试品溶液，N块薄层板，展开N次，鉴别N味药材的传统鉴别模式。为排除干扰，样品的前处理程序多复杂、烦琐，需用大量的有机试剂反复纯化处理，费力、费时、费试剂、污染环境，危害健康，检测周期长。这样，一个含6～7项薄层鉴别和二项含量测定的质量标准检测完成，一般要花费一周的时间，如遇复试，时间翻倍，检测速度严重制约着中药现代化生产速度。所以寻找水提取制剂的简便、快捷检测方法、提高检测效率、降低检测成本，是中药质量控制必须突破的难关。实脾散是国家中医药管理局颁布的经典名方，由姜厚朴、白术、木瓜、木香、草果仁、槟榔、附子、茯苓、炮姜、甘草十味中药组成，加上煎煮时加上的大枣和生姜，冻干粉中共含11味药材，因炮姜和生姜是同一个品种，不同形式加工品，所以按一味药材计算。其处方和制备工艺如下：处方：厚朴(去皮，姜制，炒)、白术、木瓜(去瓤)、木香(不见火)、草果仁、大腹子、附子(炮、去皮脐)、白茯苓(去皮)、干姜(炮)各一两，甘草(炙)半两。制法：右咀，每服四钱，水一盏半，生姜五片，枣子一枚，煎至七分，去滓，渣液浓缩，冷冻干燥，得冻干粉(名词解释：右咀是指按古代从右向左，从上向下的书写格式，将右侧处方中的药材，捣碎的意思)。为确保制剂的质量，对实脾散冻干粉进行了薄层鉴别研究。
技术实现思路
本专利技术就是针对目前一个品种，如有N项鉴别，就要制备N种供试品溶液，N块薄层板，展开N次，鉴别N味药材的传统鉴别模式。通过展开剂的不同组合与其比例、显色剂、薄层载体以及检测条件等参数研究，创建了采用同一供试品溶液，在六块薄层板上，鉴别9味药材，4种不同的检视条件下，检视10余种不同的中药成分；各斑点清晰，相互交叉，但不同层次的成分，又互不干扰。做到了多药味组成的水提取复方制剂中鉴别增订率达到81.8％。为实脾散冻干粉的质量控制，提供了多药味多信息、一测多评快速薄层鉴别新模式。本专利技术解决其技术问题所采用的方案为：A.取实脾散冻干粉0.5g，加甲醇2ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取木香对照药材0.1g，加甲醇5ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；再取干姜对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为干姜对照药材溶液；吸取木香对照药材溶液2～3μl、干姜对照药材5～6μl、A项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比环5∶3∶0.5的环己烷-乙酸乙酯-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105加热至蓝色斑点呈现，供试品色谱中，在与木香对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点(图1)；在继续加热至干姜斑点呈现，日光下或置暗室中透过灯光检视，供试品色谱中，在与木香和干姜对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点(图2)；B.取白术对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为白术对照药材溶液；另取甘草对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为甘草对照药材溶液；吸取甘草对照药材溶液2～3μl、白术对照药材4～6μl、供试品溶液6～8μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比13.2∶2∶3.1∶0.5的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与甘草对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点(图3)；再喷以10％硫酸乙醇溶液，105加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与白术对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点(图4)；C.取大枣对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液2～3μl，A项下的供试品溶液3～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1∶2∶4.5∶0.5的三氯甲烷-己酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点(图5)；D.取厚朴对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为对照药材溶液；另取厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液，作为对照品溶液；吸取对照药材溶液3～5μl，对照品溶液2～3μl、A项下的供试品溶液12～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比8∶3∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点(图6)；E.取草果仁对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为对照药材溶液；另取木瓜对照药材0.3g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为木瓜对照药材溶液；吸取上述对照药材溶液5～6μl，供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比6∶2∶2.8∶0.3∶0.1的氯仿-乙酸乙酯-甲醇-甲酸-水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点(图7)；F.取茯苓对照药材0.2g，加甲醇2ml超声处理20分钟，取上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5～8μl、A项下项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比8∶3∶0.2的环己烷-乙酸乙酯-甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种实脾散冻干粉多药味多信息、快速薄层鉴别方法，其特征在于：A.取实脾散冻干粉0.5g，加甲醇2ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取木香对照药材0.1g，加甲醇5ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；再取干姜对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为干姜对照药材溶液；吸取木香对照药材溶液2～3μl、干姜对照药材5～6μl、A项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比环5∶3∶0.5的环己烷‑乙酸乙酯‑浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液‑乙醇的混合溶液，105加热至兰色斑点呈现，供试品色谱中，在与木香对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色主斑点；在继续加热至干姜斑点呈现，日光下或暗室中透过灯光检视，供试品色谱中，在与木香和干姜对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；B.取白术对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为白术对照药材溶液；再取甘草对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为甘草对照药材溶液；吸取甘草对照药材溶液2～3μl、白术对照药材4～6μl、供试品溶液6～8μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比13.2∶2∶3.1∶0.5的三氯甲烷‑乙酸乙酯‑甲醇‑浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与甘草对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；再喷以10％硫酸乙醇溶液，105加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与白术对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色荧光主斑点；C.取大枣对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液2～3μl，A项下的供试品溶液3～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1∶2∶4.5∶0.5的三氯甲烷‑己酸乙酯‑甲醇‑浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，日光下检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色主斑点；D.取厚朴对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为对照药材溶液；另取厚朴酚对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.5mg溶液，作为对照品溶液；吸取对照药材溶液3～5μl，对照品溶液2～3μl、A项下的供试品溶液12～15μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比8∶3∶0.2的环己烷‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯254nm下检视，供试品色谱中，在与对照品和对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；E.取草果仁对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为对照药材溶液；另取木瓜对照药材0.3g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为木瓜对照药材溶液；吸取上述对照药材溶液5～6μl，A项下供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比6∶2∶2.8∶0.3∶0.1的氯仿‑乙酸乙酯‑甲醇‑甲酸‑水为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰，暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；F.取茯苓对照药材0.2g，加甲醇2ml超声处理20分钟，取上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液5～8μl、A项下项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比8∶3∶0.2的环己烷‑乙酸乙酯‑甲酸为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液‑乙醇的混合溶液，105℃加热至斑点显色清晰，暗室内透过灯光检视，供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的主斑点。...

【技术特征摘要】
1.一种实脾散冻干粉多药味多信息、快速薄层鉴别方法，其特征在于：A.取实脾散冻干粉0.5g，加甲醇2ml，超声处理10分钟，离心，上清液作为供试品溶液；另取木香对照药材0.1g，加甲醇5ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；再取干姜对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为干姜对照药材溶液；吸取木香对照药材溶液2～3μl、干姜对照药材5～6μl、A项下的供试品溶液8～10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比环5∶3∶0.5的环己烷-乙酸乙酯-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，喷以体积比1∶8的5％的香草醛硫酸溶液-乙醇的混合溶液，105加热至兰色斑点呈现，供试品色谱中，在与木香对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色主斑点；在继续加热至干姜斑点呈现，日光下或暗室中透过灯光检视，供试品色谱中，在与木香和干姜对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色主斑点；B.取白术对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，上清液作为白术对照药材溶液；再取甘草对照药材0.1g，加水30ml，小火煎煮20分钟，滤过，滤液浓缩至干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为甘草对照药材溶液；吸取甘草对照药材溶液2～3μl、白术对照药材4～6μl、供试品溶液6～8μl，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以体积比13.2∶2∶3.1∶0.5的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-浓氨试液为展开剂，展开，取出，热风吹干，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与甘草对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光主斑点；再喷以10％硫酸乙醇溶液，105加热至斑点显色清晰，置紫外光灯365nm下检视，供试品色谱中，在与白术对照药材色谱相应的位置上，分别显相同颜色荧光主斑点；C.取大枣对照药材0.2g，加甲醇2ml，超声处理20分钟，离心，上清液作为对照药材溶液；吸取对照药材溶液2～3μl，A项下的供试品溶液3～5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以体积比1∶2∶4.5∶0.5的三氯甲烷-...

【专利技术属性】
技术研发人员：牛丽颖，安丽娜，麻景梅，姜晓娅，韩桂茹，王鑫国，
申请(专利权)人：河北中医学院，
类型：发明
国别省市：河北,13