一种用于固定水母刺丝囊的载体及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及海洋生物技术领域，具体涉及一种用于固定水母刺丝囊的载体及其制备方法和应用。载体为浓度为20‑25％(w/v)的明胶。本发明专利技术为研究水母刺丝囊释放的影响因素提供了一种载体，且该载体的制备方法简便、易操作。

【技术实现步骤摘要】
一种用于固定水母刺丝囊的载体及其制备方法和应用
本专利技术涉及海洋生物
，具体涉及一种用于固定水母刺丝囊的载体及其制备方法和应用。
技术介绍
近年来，水母数量激增，水母蜇人事件频繁发生，严重影响滨海旅游、海洋捕捞、海上运动及海军训练等涉海活动。水母蜇伤已成为最常见的海洋生物伤，据美国国立卫生院估计，全球每年约有1.5亿人次被水母蜇伤(Montgomery,L.,Seys,J.,Mees,J.ToPee,orNottoPee:AReviewonenvenomationandtreatmentinEuropeanjellyfishspecies.MarineDrugs,2016,14,127.)，其中不乏死亡病例；美国夏威夷沿海，每年约有50万人被水母蜇伤；澳大利亚每年约有1万人被僧帽水母蜇伤(Jellyfishswarmsinvadeecosystemsoutofbalance,EnvironmentNewsService,ARLINGTON,Virginia,December16,2008)。在我国沿海地区，也有大量的水母蜇伤病例，北戴河医院每年收治水母蜇伤病例上千例；2014年青岛有2人因水母蜇伤死亡。被水母蜇伤后，即感到刺痒、麻痛或灼烧感，随后发生红斑、丘疹或荨麻疹样皮疹，奇痒无比，影响日常生活，特别是睡眠。严重蜇伤者或对毒素过敏者，可引起全身症状如胸闷、气短、呼吸困难，甚至休克死亡。水母的触手上密布着大量的刺丝囊，刺丝囊内含有毒素。刺丝囊是刺胞动物特有的细胞类型，形状为椭圆形或圆形，囊内盘绕着细长中空的刺丝，刺丝内含有毒素，是其防御性和进攻性的武器。当水母与人体接触，受到刺激后，触发刺丝囊发射，刺丝在极短的时间内发射到皮肤上，并释放出毒素，引起局部皮肤损伤，甚至导致全身中毒，严重者可致死。水母蜇伤症状取决于刺入皮肤的刺丝囊毒素量及毒素的化学组成、生物活性和机体对毒素的反应等。因此，刺丝囊释放的干预技术是水母蜇伤防护的核心。目前，对刺丝囊释放的研究大多是显微镜下直接观察载玻片中的刺丝囊，在载玻片的压片过程中，很容易刺激刺丝囊的释放，如果用不压片，利用倒置显微镜观察，刺丝囊易漂移出视野范围。因此，建立刺丝囊的固定载体，研究刺丝囊释放的干预技术，对水母蜇伤的防护至关重要。
技术实现思路
：本专利技术的目的是提供一种用于固定水母刺丝囊的载体及其制备方法和应用。为实现上述目的，本专利技术实现目的的方案如下：一种用于固定水母刺丝囊的载体，载体为浓度为20-25％(w/v)的明胶。进一步的说，将明胶和蒸馏水按照20-25％(w/v)的比例混合经加热融化，而后取明胶转移至孔板中，冷却后制得厚度为0.3-0.5cm的明胶载体。所述明胶和蒸馏水混合后于70-80℃下加热融化。一种用于固定水母刺丝囊的载体的制备方法，将明胶和蒸馏水按照20-25％(w/v)的比例混合经加热融化，而后取明胶转移至孔板中，冷却后制得厚度为0.3-0.5cm的明胶载体。所述明胶和蒸馏水混合后于70-80℃下加热融化。一种用于固定水母刺丝囊的载体的应用，所述载体在固定水母，用于研究水母刺丝囊释放影响因素中的应用。本专利技术的优点：1.采用本专利技术的载体观察刺丝囊，与显微镜下直接观察载玻片中的刺丝囊相比，载体上的刺丝囊位置固定、不漂移，不重叠且形态清晰。2.本专利技术所用的制备方法快速、设备简单、可操作性强。附图说明图1为本专利技术制备的明胶载体。图2为本专利技术制备的明胶载体上的水母触手。图3为本专利技术制备的明胶载体上未释放的水母刺丝囊。图4为本专利技术制备的明胶载体上释放的水母刺丝囊。具体实施方式下面结合说明书附图对本专利技术作进一步说明，并且本专利技术的保护范围不仅局限于以下实施例。实施例1：1)称取5.0g明胶颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水20mL，在烧杯上盖一玻璃培养皿，防止加热时水蒸气跑出。2)将烧杯置于70℃的水浴锅中加热。3)待明胶颗粒融化之后，用玻璃棒轻轻搅拌，使明胶和水充分混匀且明胶中无气泡，趁热用移液枪取1mL明胶加入到12孔板中，待冷却凝固后，即为厚度为0.3cm的载体。如图1所示。实施例2：1)称取5.0g明胶颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水20mL，在烧杯上盖一玻璃培养皿，防止加热时水蒸气跑出。2)将烧杯置于70℃的水浴锅中加热。3)待明胶颗粒融化之后，用玻璃棒轻轻搅拌，使明胶和水充分混匀且明胶中无气泡，趁热用移液枪取1.5mL明胶加入到12孔板中，待冷却凝固后，即为厚度为0.4cm的明胶载体。实施例3：1)称取4.0g明胶颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水20mL，在烧杯上盖一玻璃培养皿，防止加热时水蒸气跑出。2)将烧杯置于70℃的水浴锅中加热。3)待明胶颗粒融化之后，用玻璃棒轻轻搅拌，使明胶和水充分混匀且明胶中无气泡，趁热用移液枪取1mL明胶加入到12孔板中，待冷却凝固后，即为厚度为0.3cm的明胶载体。实施例4：1)称取4.6g明胶颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水20mL，在烧杯上盖一玻璃培养皿，防止加热时水蒸气跑出。2)将烧杯置于70℃的水浴锅中加热。3)待明胶颗粒融化之后，用玻璃棒轻轻搅拌，使明胶和水充分混匀且明胶中无气泡，趁热用移液枪取2mL明胶加入到12孔板中，待冷却凝固后，即为厚度为0.5cm的明胶载体。实施例5：1)称取5.0g明胶颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水20mL，在烧杯上盖一玻璃培养皿，防止加热时水蒸气跑出。将烧杯置于70℃水浴锅中加热，待明胶颗粒融化之后，用玻璃棒轻轻搅拌，使明胶和水充分混匀且明胶中无气泡产生，趁热用移液枪取1mL明胶加入到12孔板中,待冷却凝固后，即为厚度为0.3cm的明胶载体。2)用眼科手术剪刀将水母触手剪成长约1cm的小段，用移液器轻轻放置到明胶表面，如图2所示。3)3-5min后，将水母触手移走，在显微镜下观察明胶载体上水母刺丝囊的形态如图3所示。由上述可见采用明胶作为载体，刺丝囊的位置固定，不漂移，不重叠，形态清楚，易于显微观察。实施例6：1)称取5.0g明胶颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水20mL，在烧杯上盖一玻璃培养皿，防止加热时水蒸气跑出。将烧杯置于70℃水浴锅中加热，待明胶颗粒融化之后，用玻璃棒轻轻搅拌，使明胶和水充分混匀且明胶中无气泡，趁热用移液枪取1mL明胶加入到12孔板中。2)待冷却凝固后，将所要观察的水母触手，用眼科手术剪刀剪成长约1cm的小段，用移液器轻轻放置到明胶表面。用镊子对水母触手做机械刺激。3)3-5min后，将水母触手段移走，在显微镜下观察到明胶载体上水母刺丝囊释放的形态，刺丝囊的位置固定，不漂移，不重叠，形态清楚，易于显微观察，如图3所示。实施例7：称取5.0g明胶颗粒置于烧杯中，加入蒸馏水20mL，在烧杯上盖一玻璃培养皿，防止加热时水蒸气跑出。将烧杯置于70℃水浴锅中加热，待明胶颗粒融化之后，用玻璃棒轻轻搅拌，使明胶和水充分混匀且明胶中无气泡，趁热用移液枪取1mL明胶加入到12孔板中,待冷却凝固后，即为厚度为0.3cm左右的明胶载体。用眼科手术剪刀将水母触手剪成长约1cm的小段,用移液器轻轻放置到明胶表面。3-5min后，将水母触手移走。在显微镜下能看到明胶载体上完整的水母刺丝囊后，在12孔板的明胶载体上加入200uL10-3mmol/L的赖氨酸溶液没过载体表面,研究赖氨酸对刺丝囊释放的影响。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于固定水母刺丝囊的载体，其特征在于：载体为浓度为20‑25％(w/v)的明胶。

【技术特征摘要】
1.一种用于固定水母刺丝囊的载体，其特征在于：载体为浓度为20-25％(w/v)的明胶。2.按权利要求1所述的用于固定水母的载体，其特征在于：将明胶和蒸馏水按照20-25％(w/v)的比例混合经加热融化，而后取明胶转移至孔板中，冷却后制得厚度为0.3-0.5cm的明胶载体。3.按权利要求2所述的用于固定水母刺丝囊的载体，其特征在于：所述明胶和蒸馏水混合后于70-80℃下加热融化。4.一种权利要求1所述的用于固定...

【专利技术属性】
技术研发人员：于华华，李翱宇，李荣锋，陈晓琳，刘松，邢荣娥，李鹏程，
申请(专利权)人：中国科学院海洋研究所，
类型：发明
国别省市：山东,37