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一种水产品微生物致腐能力的评价方法技术

技术编号:19448324 阅读:27 留言:0更新日期:2018-11-14 17:14
本发明专利技术公开了一种水产品微生物致腐能力的评价方法。本方法对接种特定微生物的水产品进行贮藏,使用化学方法对其贮藏过程中的挥发性盐基氮(TVB‑N)值和菌落总数(TVC)进行定期检测,将所得数值代入本方法建立的水产品微生物致腐能力计算公式,计算得到水产品微生物致腐能力。本方法在整个贮藏过程的时间跨度范围内进行致腐能力的评价,并可以将同一腐败菌不同贮藏条件下的致腐能力进行比较,是一种有效、综合、便捷、准确的微生物致腐能力评价方法,可广泛应用于水产品微生物致腐能力的评价。

【技术实现步骤摘要】
一种水产品微生物致腐能力的评价方法
本专利技术涉及微生物评价领域,特别是一种水产品微生物致腐能力的评价方法。
技术介绍
水产品口感鲜美,含有丰富的蛋白质和多不饱和脂肪酸,具有很高的食用价值和营养价值。但水产品在贮藏期间容易腐败变质,影响其感官、风味和营养价值。微生物的入侵和繁殖是造成水产品腐败的重要因素。微生物分解水产品中的蛋白质等成分,产生胺类等碱性含氮物。这些物质被称为挥发性盐基氮,其含量与水产品中氨基酸破坏程度呈正相关,造成水产品的腐败,是反映水产品新鲜程度的重要指标。在水产品的贮藏中,不同种类微生物对于水产品腐败的影响程度与其致腐能力密切相关。因此对不同种类微生物的致腐能力进行测定和研究,有利于对水产品中造成腐败的主要微生物进行筛选和靶向抑制,为延长水产品的货架期提供理论基础。致腐能力的强弱可以根据感官评价来定性评估,但由于其受主观因素影响较大,因此使用化学腐败指标(如TVB-N值)进行致腐能力的定量评估更为准确。目前大部分报道使用TVB-N产量因子(YTVB-N)进行致腐能力的评价。TVB-N产量因子(YTVB-N)将TVB-N值和TVC值结合起来,为使用最多的致腐能力评价方法,但这种方法选取贮藏起点和货架终点的TVB-N值和TVC值,总共四个点,而没有将腐败期间的过程纳入考量范围,因此具有较大的误差。
技术实现思路
针对上述不足,本专利技术提供一种简便、准确,又能全面的表达微生物在水产品腐败过程中致腐能力的评价方法,该方法能够简便、准确,又能全面的表达微生物在水产品腐败过程中致腐能力的评价。本专利技术的目的是按如下的方式来实现的:一种水产品微生物致腐能力的评价方法,包括以下步骤:(1)微生物菌悬液的制备:将冷冻保藏的单菌液在37℃水浴中活化10~20min,并在营养琼脂中划线培养复壮后,挑取典型的单菌落于营养肉汤中,37℃下培养12~24h,离心后弃上清液,并用无菌生理盐水调整到菌悬液浓度6~6.5lg(CFU/g)范围内备用;(2)无菌水产品制备:将新鲜水产品去内脏后用蒸馏水洗净,在无菌超净台中将处理好的水产品放在灭菌的砧板上,在体积浓度75%的酒精中浸泡10~30s后捞起自然晾干后,再用无菌水洗净;(3)微生物接种及包装:将上述制备的无菌水产品及单菌稀释菌悬液置于超净台中,将水产品浸泡于菌悬液中,10~30s后取出,放置于相应的包装中,以未接种腐败菌的水产品作对照,并贮藏;(4)贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测:在t1,t2,…,ti,…,tn时刻均将水产品从贮藏环境中取出,进行挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的多次检测,每个时刻检测结果取平均值;(5)当挥发性盐基氮(TVB-N)值>50mg/100g时,贮藏期结束,利用采集的数据,使用致腐能力计算公式对微生物致腐能力进行计算,得到水产品微生物的致腐能力。进一步的,所述步骤(3)中,贮藏温度为4~25℃。进一步的,所述步骤(4)中,t1,t2,…,ti,…,tn的间隔时间为0.5~2天。进一步的,所述步骤(4)中分别采用国标GB/5009.228—2016和GB/4789.2—2015进行挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测。进一步的,所述步骤(5)中致腐能力计算公式为:式中,代表微生物的致腐能力,C(ti)表示菌落总数(TVC)随时间的函数,为挥发性盐基氮值(TVB-N)在两次测量之间的变化量。本专利技术的积极效果如下:使用新型致腐能力计算公式,将水产品贮藏全过程中某种微生物的致腐能力进行计算,最终得到某种微生物对水产品的致腐能力。该方法简便、准确,又能全面的表达微生物在水产品腐败过程中致腐能力,可以为水产品贮藏过程中微生物的靶向抑制提供参考,从而延缓水产品的腐败,延长其货架期,提高其经济价值和营养价值。具体实施方式下面结合具体实施例对本方法作进一步详述。实施例1:S.glacialipiscicola,P.heimbachae,P.hauseri在小黄鱼冷藏过程中的致腐能力评价(1)微生物菌悬液的制备:将冷冻保藏的S.glacialipiscicola,P.heimbachae,P.hauseri单菌液分别在37℃水浴中活化10min,并在营养琼脂中划线培养复壮后,挑取典型的单菌落于营养肉汤中,37℃下培养一定0.5,离心后弃上清液,并用无菌生理盐水调整到菌悬液浓度6lg(CFU/g)备用;(2)无菌水产品制备:将新鲜小黄鱼去内脏后用蒸馏水洗净,在无菌超净台中将处理好的水产品放在灭菌的砧板上,在体积浓度为75%的酒精中浸泡10s后捞起自然晾干后,再用无菌水洗净;(3)微生物接种及包装:将上述制备的无菌小黄鱼及S.glacialipiscicola,P.heimbachae,P.hauseri单菌稀释菌悬液置于超净台中。将小黄鱼分别浸泡于菌悬液中,10s后取出,放置于无菌培养皿中,以未接种的小黄鱼作对照,置于4℃下冷藏保存;(4)贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测:贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测。每隔2d将小黄鱼从贮藏环境中取出,分别进行挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测,时间点分别记为t1,t2,…ti,…,tn,每个时间点进行多次检测,检测结果取平均值;(5)当挥发性盐基氮(TVB-N)值≥50mg/100g时,贮藏期结束。利用采集的数据,使用致腐能力计算公式对微生物致腐能力进行计算,得到水产品微生物的致腐能力。实施例2:A.salmonicida,C.maltaromaticum,S.glacialipiscicola在带鱼真空常温保藏过程中的致腐能力评价(1)微生物菌悬液的制备:将冷冻保藏的A.salmonicida,C.maltaromaticum和S.glacialipiscicola单菌液分别在37℃水浴中活化20min,并在营养琼脂中划线培养复壮后,挑取典型的单菌落于营养肉汤中,37℃下培养一定24h,离心后弃上清液,并用无菌生理盐水调整到菌悬液浓度6.5lg(CFU/g)备用;(2)无菌水产品制备:将新鲜带鱼去内脏后用蒸馏水洗净,在无菌超净台中将处理好的水产品放在灭菌的砧板上,在体积浓度为75%的酒精中浸泡30s后捞起自然晾干后,再用无菌水洗净;(3)微生物接种及包装:将上述制备的无菌带鱼及A.salmonicida,C.maltaromaticum,S.glacialipiscicola单菌稀释菌悬液置于超净台中。将带鱼分别浸泡于菌悬液中,30s后取出,放置于真空袋中抽真空,以未接种的带鱼作对照,置于25℃下保存;(4)贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测:贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测。每隔0.5将三份带鱼从贮藏环境中取出,分别进行挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测,时间点分别记为t1,t2,…ti,…,tn,每个时间点进行多次检测,检测结果取平均值;(5)当挥发性盐基氮(TVB-N)值≥50mg/100g时,贮藏期结束。利用采集的数据,使用致腐能力计算公式对微生物致腐能力进本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水产品微生物致腐能力的评价方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)微生物菌悬液的制备:将冷冻保藏的单菌液在37℃水浴中活化10~20min,并在营养琼脂中划线培养复壮后,挑取典型的单菌落于营养肉汤中,37℃下培养12~24h,离心后弃上清液,并用无菌生理盐水调整到菌悬液浓度6~6.5lg(CFU/g)范围内备用;(2)无菌水产品制备:将新鲜水产品去内脏后用蒸馏水洗净,在无菌超净台中将处理好的水产品放在灭菌的砧板上,在体积浓度75%的酒精中浸泡10~30s后捞起自然晾干后,再用无菌水洗净;(3)微生物接种及包装:将上述制备的无菌水产品及单菌稀释菌悬液置于超净台中,将水产品浸泡于菌悬液中,10~30s后取出,放置于相应的包装中,以未接种腐败菌的水产品作对照,并贮藏;(4)贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB‑N)值和菌落总数(TVC)的检测:在t1,t2,…,ti,…,tn时刻均将水产品从贮藏环境中取出,进行挥发性盐基氮(TVB‑N)值和菌落总数(TVC)的多次检测,每个时刻检测结果取平均值。(5)当挥发性盐基氮(TVB‑N)值>50mg/100g时,贮藏期结束,利用采集的数据,使用致腐能力计算公式对微生物致腐能力进行计算,得到水产品微生物的致腐能力。...

【技术特征摘要】
1.一种水产品微生物致腐能力的评价方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)微生物菌悬液的制备:将冷冻保藏的单菌液在37℃水浴中活化10~20min,并在营养琼脂中划线培养复壮后,挑取典型的单菌落于营养肉汤中,37℃下培养12~24h,离心后弃上清液,并用无菌生理盐水调整到菌悬液浓度6~6.5lg(CFU/g)范围内备用;(2)无菌水产品制备:将新鲜水产品去内脏后用蒸馏水洗净,在无菌超净台中将处理好的水产品放在灭菌的砧板上,在体积浓度75%的酒精中浸泡10~30s后捞起自然晾干后,再用无菌水洗净;(3)微生物接种及包装:将上述制备的无菌水产品及单菌稀释菌悬液置于超净台中,将水产品浸泡于菌悬液中,10~30s后取出,放置于相应的包装中,以未接种腐败菌的水产品作对照,并贮藏;(4)贮藏过程中挥发性盐基氮(TVB-N)值和菌落总数(TVC)的检测:在t1,t2,…,ti,…,tn时刻均将水产品从贮藏环境中取出,进行挥发性盐基氮(TVB-N...

【专利技术属性】
技术研发人员:胡亚芹李苑丁甜陈士国陈健初叶兴乾刘东红
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:浙江,33

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