一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法技术

本发明专利技术公开了及一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，包括，制备植物甾醇单体酯粗品：植物甾醇单体和不饱和脂肪酸甲酯经脂肪酶催化发生转酯化反应，得到植物甾醇单体酯粗品，其中，所述的植物甾醇单体纯度为98％以上；植物甾醇单体酯的纯化：植物甾醇单体酯粗品经硅胶柱层析处理，得到所述高纯度植物甾醇单体酯。本发明专利技术合成工艺简便，反应条件温和，无任何有机溶剂的添加和消耗，降低了生产成本，对设备无特殊要求，适合大规模工业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法
本专利技术属于植物甾醇单体酯的合成及纯化
，具体涉及一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法。
技术介绍
近年来，人们生活水平不断提高，营养过剩和饮食结构不合理导致的患心血管疾病人数不断激增，《中国心血管病报告2007》指出：“估计我国心血管病患者人数至少2.3亿，每10个成年人中有2人患有心血管病。”大量研究表明血液中胆固醇浓度超标，尤其是低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)浓度超标，是多种心脑血管疾病诱发的主因。研究表明，每天进食1.5～3.0g植物甾醇可使机体血浆总胆固醇和LDL-c水平降低10～20％。然而，膳食中植物甾醇的吸收率仅为5％左右，日常膳食对植物甾醇的摄入量达不到降低人体胆固醇的需要量且生物利用率较差，而游离植物甾醇难溶于水和难溶于油脂的物理性质使其难于应用于食品工业中。植物甾醇酯是植物甾醇的衍生物之一，同样具备降低血浆胆固醇和LDL-c水平的生理活性。目前，主要通过把植物甾醇衍生化为植物甾醇酯，植物甾醇酯具备更优的脂溶性和降胆固醇功效，且吸收率是植物甾醇的5倍，在提高生物利用率的同时还能改善产品的外观及口感，能够弥补植物甾醇在食品应用中的缺陷。目前，植物甾醇酯的合成方法主要有化学法和酶法。化学法通常使用强酸、强碱、烷氧基碱金属化合物等作为催化剂，反应需高温，易产生高温，且高温致使产物色泽变深，仍需脱色等工艺处理，生产工艺繁琐，易造成环境污染。酶法反应条件温和，利用酶的催化专一性，无副产物生成。目前，酶法催化主要是将植物甾醇和脂肪酸直接酯化合成甾醇酯产品，但由于甾醇在常用反应溶剂体系中溶解度较差，往往需要添加较多的溶剂才能将植物甾醇完全溶解于反应体系内，使得反应底物在体系内过于分散，不利于提高反应效率，抑制酯化反应效率。专利CN1982326A、CN101538306将含富含油酸的食用油与短链醇在催化剂作用下进行醇解，得到富含油酸的脂肪酸短链酯，如脂肪酸甲酯或乙酯，再与植物甾醇进行酶法酯交换反应，由于植物甾醇在脂肪酸酯中的溶解度明显优于正己烷等常规反应溶剂，因此解决了底物在反应体系中溶解性的问题，但以食用油为原料，在分离纯化植物甾醇酯时，非油酸的脂肪酸种类较多，不利于得到高纯度的单一的植物甾醇油酸酯。
技术实现思路
本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。鉴于上述的技术缺陷，提出了本专利技术。因此，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其包括，制备植物甾醇单体酯粗品：植物甾醇单体和不饱和脂肪酸甲酯经脂肪酶催化发生转酯化反应，其中，所述的植物甾醇单体纯度为98％以上；植物甾醇单体酯的纯化：植物甾醇单体酯粗品经硅胶柱层析处理，得到所述高纯度植物甾醇单体酯。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述植物甾醇单体包括豆甾醇单体、β-谷甾醇单体、菜油甾醇单体中的一种。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述脂肪酶包括假丝酵母类脂肪酶CRL；所述植物甾醇单体和不饱和脂肪酸甲酯的反应摩尔比为1：1～1：10；所述脂肪酶的用量为反应底物总质量的2％～12％；作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述转酯化反应，反应温度为35～85℃，反应时间为24～96h。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述植物甾醇单体酯的纯化，其中，硅胶柱层析所用填料为100～300目硅胶，流动相为正己烷：乙酸乙酯：乙酸，其比例为80～90：10～20：0.01，流速为30～40mL/h。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：还包括，豆甾醇的纯化：将植物甾醇加入有机溶剂中，升温，平衡，降温，养晶，干燥，得到豆甾醇粗品；所述有机溶剂包括环己酮、异丁醇、正戊醇中的一种；所述植物甾醇与所述有机溶剂的质量体积比为1：3～1：5。精制：将所述豆甾醇粗品加入有机溶剂中，平衡，超声预处理，降温，养晶，干燥，得到所述豆甾醇单体；其中，所述有机溶剂包括丙酮，所述植物甾醇与所述有机溶剂的质量体积比为1：20～1：30。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述富集，其中，所述升温，其温度为60～70℃；所述平衡，为恒温平衡15～60min；所述降温，其降温速率为5～10℃/h，温度降至20～35℃；所述养晶，温度为20～35℃，时间为8～24h。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述干燥，为真空干燥4～6h，真空度为0.06MPa，干燥温度为65～70℃。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述精制，其中，所述平衡，为恒温平衡15～60min；所述降温，为自然降温至20～35℃；所述养晶，温度为20～35℃，时间为4～8h。作为本专利技术所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法的一种优选方案：所述超声预处理，超声处理时间为1～3min，超声频率为75～100Hz本专利技术的有益效果：本专利技术用脂肪酸甲酯作为反应底物，由于植物甾醇在脂肪酸甲酯中的溶解性较好，因此脂肪酸甲酯既为反应底物，又可替代反应的溶剂，植物甾醇溶解在脂肪酸甲酯中，经脂肪酶的催化，能够高效地进行转酯化反应得到植物甾醇单体酯，整个转酯化反应无任何有机溶剂的添加，产品安全性高，特别适合应用于食品、医药等安全性要求高的领域。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：图1为实施例1混合植物甾醇经富集和精制后得到的豆甾醇单体的GC-MS色谱图。图2为本专利技术富集过程中不同溶剂制得的豆甾醇粗品的纯度图。图3为本专利技术精制过程中不同溶剂制得的豆甾醇产品的纯度图。图4为超声时间对本专利技术豆甾醇得率的影响图。图5为超声预处理频率对豆甾醇得率的影响图。图6为实施例1油酸豆甾醇酯的TLC薄层色谱板中产物合成的验证图图7为实施例1油酸豆甾醇酯的HPLC-ELSD色谱图。具体实施方式为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术，但是本专利技术还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似推广，因此本专利技术不受下面公开的具体实施例的限制。其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本专利技术至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。实施例1：油酸豆甾醇酯的合成称取自制纯度98％以上的豆甾醇0.5g，油酸甲酯1.0g于夹层本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其特征在于：包括，制备植物甾醇单体酯粗品：植物甾醇单体和不饱和脂肪酸甲酯经脂肪酶催化发生转酯化反应，得到植物甾醇单体酯粗品，其中，所述的植物甾醇单体纯度为98％以上；植物甾醇单体酯的纯化：植物甾醇单体酯粗品经硅胶柱层析处理，得到所述高纯度植物甾醇单体酯。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其特征在于：包括，制备植物甾醇单体酯粗品：植物甾醇单体和不饱和脂肪酸甲酯经脂肪酶催化发生转酯化反应，得到植物甾醇单体酯粗品，其中，所述的植物甾醇单体纯度为98％以上；植物甾醇单体酯的纯化：植物甾醇单体酯粗品经硅胶柱层析处理，得到所述高纯度植物甾醇单体酯。2.如权利要求1所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其特征在于：所述植物甾醇单体包括豆甾醇单体、β-谷甾醇单体、菜油甾醇单体中的一种。3.如权利要求2所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其特征在于：所述脂肪酶包括假丝酵母类脂肪酶CRL；所述植物甾醇单体和不饱和脂肪酸甲酯的反应摩尔比为1：1～1：10；所述脂肪酶的用量为反应底物总质量的2％～12％。4.如权利要求1～3任一所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其特征在于：所述转酯化反应，反应温度为35～85℃，反应时间为24～96h。5.如权利要求1～3任一所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其特征在于：所述植物甾醇单体酯的纯化，其中，硅胶柱层析所用填料为100～300目硅胶，流动相为正己烷：乙酸乙酯：乙酸，其比例为80～90：10～20：0.01，流速为30～40mL/h。6.如权利要求2或3所述的高纯度植物甾醇单体酯的制备方法，其特征在于：还包括，豆甾醇的纯化：...

【专利技术属性】
技术研发人员：常明，冯文欢，王兴国，吴正章，金青哲，张鹏，刘睿杰，黄健花，
申请(专利权)人：江南大学，江苏科鼐生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏,32