核桃肽及其酶解提取方法技术

本发明专利技术是核桃肽及其酶解提取方法。核桃肽的酶解提取方法包括以下几个步骤：(1)将核桃仁粉碎得到核桃渣，将核桃渣加入水中，打浆，用有机碱调节pH值，搅拌，离心，除去油层，取上清液，用无机酸调节pH值，离心，用乙醇洗涤，得到核桃蛋白；(2)加热或用紫外光照射使核桃蛋白变性；(3)单酶酶解/双酶酶解；(4)将酶解液加热灭活，自然冷却后调节pH值，离心，取上清液，冷冻干燥，即得核桃肽。通过上述办法得到的核桃肽具有优异的抗氧化活性和降血压活性。

【技术实现步骤摘要】
核桃肽及其酶解提取方法
本专利技术涉及食品加工领域，尤其是一种核桃肽及其酶解提取方法。
技术介绍
核桃(JuglansregiaL)又名胡桃、羌桃，属胡桃科胡桃属植物，与扁桃、腰果、榛子并列为世界四大干果。核桃的药用价值和营养价值都很高。《神农本草经》将核桃列为久服轻身益气、延年益寿的上品。明代李时珍著《本草纲目》记述，核桃仁有补气养血，润燥化痰，处三焦，温肺润肠，治虚寒喘咳，腰脚重疼，心腹疝痛等功效。核桃蛋白是一种良好的植物蛋白，核桃蛋白在持油性、溶解度、乳化性方面有着较好的功能性质。总体超过了其它一些植物蛋白的品质。在我国蛋白质资源缺乏的情况下，对核桃粕蛋白的开发利用能带来巨大的经济和社会效益并对食品工业有巨大的推动作用。核桃一直被作为一种益智类食品深受消费者的青睐，开发核桃蛋白肽也容易被人们接受。另外，我国是核桃生产最大的国家，核桃制油后废弃了大量的核桃渣，采用核桃渣为原料开发核桃蛋白肽，原料非常丰富，价格低廉，可满足大规模工业化生产，同时减少了资源的浪费，提高了核桃制品的附加值，有效地弥补了核桃深加工的欠缺。所以，研究开发核桃生物活性肽具有广阔的前景。传统获得肽的方法有很多。传统法主要有：酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法等。但在工艺技术方面，这些合成工艺方法的局限性，是导致其这些合成方法没有产品的原因。而酶法在传统法的基础上有所突破和创新，适应了低碳经济和绿色环保的要求。酶法就是用生物酶催化蛋白质获得多肽，就是蛋白质降解，人工合成的多肽。酶法较酸法、碱法、电法温和、环保。生产工艺简易，投资少、见效快，适宜工业化生产。目前，大豆肽和乳蛋白肽是在研究中应用最多的食源性活性肽。然而至今关于酶解法制备核桃肽的报道中均没有使用相同的蛋白酶，故酶法生产核桃肽具有一定的盲目性。酶法获得多肽，分子量易控制、产品自身富有绿色属性、生产出来的肽无苦味、肽分子量小、这些小分子肽不需消化直接吸收，具有动力、载体、运输、递质和营养功能，特别是它具有极强的活性和多样性。
技术实现思路
本专利技术是核桃肽及其酶解提取方法，主要改进核桃肽的生产工艺，包括使用了有机胍来调节pH值，改进了核桃变性办法等技术方案，改进了现有技术，通过本专利技术提供的技术方案有效提升了得到的核桃肽的性能。本专利技术目的是通过如下技术方案实现的：一种核桃肽酶解提取方法，其特征在于，步骤如下：(1)将核桃仁粉碎过5-20目筛得到核桃渣，将核桃渣加入水中，打浆，用有机碱将pH值调至8.0-9.0，在50-65℃下搅拌0.8-3小时，离心5-20分钟，除去油层，取上清液，用(1.0-2.0)mol/L无机酸水溶液调节pH值至4.2-5.1，离心15-30分钟，用乙醇洗涤1-3次，得到核桃蛋白；所述的核桃渣与水的质量比为(3-8):100；所述的无机酸为盐酸、磷酸、硫酸中的任意一种；(2)将核桃蛋白配制成蛋白水溶液，使核桃蛋白变性；(3)将蛋白水溶液调节到蛋白酶最适宜温度，用有机碱或无机酸调节pH值至蛋白酶最适宜pH值，加入蛋白酶，酶解1-10小时，得到酶解液，酶解过程中用有机碱不断调节pH值，使反应液保持在蛋白酶最适合的pH值；所述蛋白酶的质量为蛋白水溶液质量的0.1-2％；所述的蛋白酶为碱性蛋白酶，中性蛋白酶，木瓜蛋白酶，胰蛋白酶，胃蛋白酶中的任意一种；(4)将酶解液加热至100℃并保持5-20分钟，自然冷却用无机酸水溶液后调节pH值至4.0-5.5，离心5-10分钟，取上清液，冷冻干燥，即得核桃肽；所述的无机酸为盐酸、磷酸、硫酸中的任意一种。一种核桃肽酶解提取方法，其特征在于，步骤如下：(1)将核桃仁粉碎过5-20目筛得到核桃渣，将核桃渣加入水中，打浆，用有机碱将pH值调至8.0-9.0，在50-65℃下搅拌0.8-3小时，离心5-20分钟，除去油层，取上清液，用(1.0-2.0)mol/L无机酸水溶液调节pH值至4.2-5.1，离心15-30分钟，用乙醇洗涤1-3次，得到核桃蛋白；所述的核桃渣与水的质量比为(3-8):100；所述的无机酸为盐酸、磷酸、硫酸中的任意一种；(2)将核桃蛋白配制成蛋白水溶液，使核桃蛋白变性；(3)将蛋白水溶液调节到蛋白酶A最适宜温度，用有机碱或无机酸调节pH值至蛋白酶A最适宜pH值，加入蛋白酶A，酶解1-10小时，得到酶解液A，酶解过程中用有机碱不断调节pH值，使反应液保持在蛋白酶A最适合的pH值；所述蛋白酶A的质量为核桃渣质量的0.1-2％；所述的蛋白酶A为为碱性蛋白酶，中性蛋白酶，木瓜蛋白酶，胰蛋白酶，胃蛋白酶中的任意一种；(4)将酶解液A加热至100℃并保持5-20分钟，调节到蛋白酶B最适宜温度，用有机碱或无机酸调节pH值至蛋白酶B最适宜pH值，加入蛋白酶B，，酶解1-10小时，得到酶解液B，酶解过程中用有机碱不断调节pH值，使反应液保持在蛋白酶B最适合的pH值；所述蛋白酶B的质量为核桃渣质量的0.1-2％；所述的蛋白酶B为为碱性蛋白酶，中性蛋白酶，木瓜蛋白酶，胰蛋白酶，胃蛋白酶中的任意一种且与蛋白酶A不同；(5)将酶解液B加热至100℃并保持5-20分钟，自然冷却后调节pH值至4.0-5.5，离心5-10分钟，取上清液，用水调节pH值至7.0，冷冻干燥，即得核桃肽；优选地，步骤(2)为将核桃蛋白配置成3-10wt％的蛋白水溶液，搅拌，在85-100℃下加热10-20分钟。优选地，步骤(2)为用紫外光照射核桃蛋白30-60分钟后将核桃蛋白配置成3-10wt％的蛋白水溶液。优选地，所述的紫外光为紫外圆偏振光。优选地，所述有机碱为有机胍和丙酸钙中的任意一种或两者任意比例的混合物。优选地，所述有机碱为一种有机胍和丙酸钙质量比为3:1的混合物。优选地，所述的有机胍如通式(I)或通式(II)所示：其中R1选自Me,Et,Pr,i-Pr,t-Bu,Cy,Ph,Bn；R2和R3选自Cy,Ph,Bn，且R2和R3相同。所述的Me为甲基，Et为乙基，Pr为正丙基，i-Pr为异丙基，t-Bu为叔丁基，Cy为环己基，Ph为苯基，Bn为苄基。本专利技术还提供了按照上述核桃肽酶解提取方法提取得到的核桃肽。使用本专利技术提供的酶解提取方法提取的核桃肽具有良好的抗氧化活性和降血压活性。具体实施方式下面结合实施例，对本专利技术作进一步的详细说明，以下实施例仅仅是用来解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。具体地，本专利技术所用碱性蛋白酶，酶活力2.0×105U/g，购自北京科百奥生物技术有限公司；中性蛋白酶，酶活力6.0×104U/g，购自北京奥博兴生物技术有限公司；木瓜蛋白酶，酶活力5.0×105U/g，购自北京奥博兴生物技术有限公司；胰蛋白酶，酶活力2.5×103U/g，购自国药集团化学试剂有限公司；胃蛋白酶，酶活力1.2×103U/g，购自国药集团化学试剂有限公司。有机胍中通式(I)的化合物均按照Modifiedguanidinesaschiralsuperbases:thefirstexampleofasymmetricsilylationofsecondaryalcohols(ChemicalCommunications,2001,7(3):243-244.)一文中的方法制备；有机胍中通式(II)的化合物均按照EnantioselectiveSynthesis本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核桃肽酶解提取方法，其特征在于，步骤如下：(1)将核桃仁粉碎过5‑20目筛得到核桃渣，将核桃渣加入水中，打浆，用有机碱将pH值调至8.0‑9.0，在50‑65℃下搅拌0.8‑3小时，离心5‑20分钟，除去油层，取上清液，用(1.0‑2.0)mol/L无机酸水溶液调节pH值至4.2‑5.1，离心15‑30分钟，用乙醇洗涤1‑3次，得到核桃蛋白；所述的核桃渣与水的质量比为(3‑8):100；(2)将核桃蛋白配制成蛋白水溶液，使核桃蛋白变性；(3)将蛋白水溶液调节到蛋白酶最适宜温度，用有机碱或无机酸调节pH值至蛋白酶最适宜pH值，加入蛋白酶，酶解1‑10小时，得到酶解液，酶解过程中用有机碱不断调节pH值，使反应液保持在蛋白酶最适合的pH值；所述蛋白酶的质量为蛋白水溶液质量的0.1‑2％；所述的蛋白酶为碱性蛋白酶，中性蛋白酶，木瓜蛋白酶，胰蛋白酶，胃蛋白酶中的任意一种；(4)将酶解液加热至100℃并保持5‑20分钟，自然冷却后用无机酸水溶液调节pH值至4.0‑5.5，离心5‑10分钟，取上清液，冷冻干燥，即得核桃肽；所述的无机酸为盐酸、磷酸、硫酸中的任意一种。

【技术特征摘要】
1.一种核桃肽酶解提取方法，其特征在于，步骤如下：(1)将核桃仁粉碎过5-20目筛得到核桃渣，将核桃渣加入水中，打浆，用有机碱将pH值调至8.0-9.0，在50-65℃下搅拌0.8-3小时，离心5-20分钟，除去油层，取上清液，用(1.0-2.0)mol/L无机酸水溶液调节pH值至4.2-5.1，离心15-30分钟，用乙醇洗涤1-3次，得到核桃蛋白；所述的核桃渣与水的质量比为(3-8):100；(2)将核桃蛋白配制成蛋白水溶液，使核桃蛋白变性；(3)将蛋白水溶液调节到蛋白酶最适宜温度，用有机碱或无机酸调节pH值至蛋白酶最适宜pH值，加入蛋白酶，酶解1-10小时，得到酶解液，酶解过程中用有机碱不断调节pH值，使反应液保持在蛋白酶最适合的pH值；所述蛋白酶的质量为蛋白水溶液质量的0.1-2％；所述的蛋白酶为碱性蛋白酶，中性蛋白酶，木瓜蛋白酶，胰蛋白酶，胃蛋白酶中的任意一种；(4)将酶解液加热至100℃并保持5-20分钟，自然冷却后用无机酸水溶液调节pH值至4.0-5.5，离心5-10分钟，取上清液，冷冻干燥，即得核桃肽；所述的无机酸为盐酸、磷酸、硫酸中的任意一种。2.一种核桃肽酶解提取方法，其特征在于，步骤如下：(1)将核桃仁粉碎过5-20目筛得到核桃渣，将核桃渣加入水中，打浆，用有机碱将pH值调至8.0-9.0，在50-65℃下搅拌0.8-3小时，离心5-20分钟，除去油层，取上清液，用(1.0-2.0)mol/L无机酸水溶液调节pH值至4.2-5.1，离心15-30分钟，用乙醇洗涤1-3次，得到核桃蛋白；所述的核桃渣与水的质量比为(3-8):100；(2)将核桃蛋白配制成蛋白水溶液，使核桃蛋白变性；(3)将蛋白水溶液调节到蛋白酶A最适宜温度，用有机碱或无机酸调节pH值至蛋白酶A最适宜pH值，加入蛋白酶A，酶解1-10小时，得到酶解液A，酶解过程中用有机碱不断调节pH值，使反应液保持在蛋白酶A最适合的pH值；所述蛋白...

【专利技术属性】
技术研发人员：廖代平，刘新旗，
申请(专利权)人：重庆申高生化制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：重庆,50