水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用制造技术

本发明专利技术提供了一种水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，涉及基因工程技术领域，本发明专利技术提供的水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，所述水稻OsPCR1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。在本发明专利技术通过实验证明转入了水稻OsPCR1基因并过表达的植物对重金属的抵抗能力有了显著的提高。本发明专利技术培育出抗重金属植物的方法简便而有效，为提高植物抗重金属能力提供了新的有效选择，具有好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】
水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用
本专利技术涉及基因工程
，尤其是涉及一种水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用。
技术介绍
土壤是人类赖以生存的主要资源之一，它是生态环境的重要组成部分，也是地球化学循环的储存库，对环境变化具有高度的敏感性，所以土壤污染是环境污染的重要环节。近年来，随着现代工业的发展和农业生产的现代化，土壤污染日益严重。其中重金属污染是当今面积最广，危害最大的环境问题之一。土壤污染方面所涉及的重金属主要是指生物毒性显著的汞、镉、铅、铬以及类金属砷，还包括具有毒性的重金属锌、铜、钴、镍、锡、钒等。当土壤中的重金属含量积累到一定程度，会对土壤植物系统产生毒害作用，导致土壤退化、农作物的产量和品质下。另外，重金属可以通过植物的吸附作用进入植物体内，另外还可以通过径流和淋洗等作用污染地表水和地下水，最终能通过接触和食物链等途径危害人们的生命健康。因此，近年来重金属污染的问题越来越受到人们的重视。对于植物抗重金属机制的研究和抗重金属基因工程方面的工作已有表明通过生物技术手段，将抗重金属机制中相关基因导入植物体内得到抗重金属转基因植株将会成为植物抗重金属改良的一种新的育种途径，对于作物的生产和抗重金属种质的筛选具有重要的意义。但是目前本领域很少有可供选用的抗重金属基因。有鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一目的在于提供一种水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，本专利技术通过实验证明转入了水稻OsPCR1基因并过表达的植物对重金属的抵抗能力有了显著的提高。本专利技术培育出抗重金属植物的方法简便而有效，为提高植物抗重金属能力提供了新的有效选择，具有好的应用前景。本专利技术提供的一种水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，所述水稻OsPCR1基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。进一步的，所述抗重金属为抗重金属镉元素和铅元素。进一步的，所述应用包括以下步骤：将所述水稻OsPCR1基因连接至植物过表达载体，并转化目的植物后进行筛选，得到抗重金属植物。进一步的，所述植物过表达载体为35S-1300-EGFP质粒。更进一步的，所述水稻OsPCR1基因连接至植物过表达载体的方法为：(a)克隆水稻OsPCR1基因：以水稻总RNA为模板，反转获得cDNA第一链，然后以cDNA第一链为模板，SEQIDNo.2和SEQIDNo.3所示核苷酸序列为引物，进行PCR扩增，获得带酶切位点的水稻OsPCR1基因；(b)植物表达载体的构建：将步骤(a)扩增获得的带酶切位点的水稻OsPCR1基因分别用KpnI和SalI双酶切，同时用KpnI和SalI双酶切35S-1300-EGFP质粒载体，然后将酶切后的水稻OsPCR1基因与35S-1300-EGFP载体骨架连接，得含有水稻OsPCR1基因的植物过表达载体。进一步的，所述转化为通过农杆菌介导进行转化。更进一步的，所述农杆菌介导的方法为将含有水稻OsPCR1基因的植物过表达载体转化至农杆菌后用所述农杆菌对目的植物进行侵染转化，得到抗重金属植物。进一步的，所述目的植物为禾本科或茄科植物中的一种。更进一步的，所述目的植物为水稻、玉米、高粱、辣椒、番茄、枸杞或烟草中的一种；更优选的，所述目的植物为水稻或烟草。进一步的，所述筛选方法为在镉和/或铅胁迫培养下对抗重金属植物进行筛选。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供的水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，所述水稻OsPCR1基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。在本专利技术通过实验证明转入了水稻OsPCR1基因并过表达的植物对重金属的抵抗能力有了显著的提高。本专利技术培育出抗重金属植物的方法简便而有效，为提高植物抗重金属能力提供了新的有效选择，具有好的应用前景。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案，下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术中植物过表达载体35S-1300-EGFP质粒的信息图谱；图2为本专利技术实施例2中pMD19T-OsPCR1质粒的测序鉴定图；图3为本专利技术实施例2中质粒p1300-OsPCR1的双酶切鉴定图；图4为本专利技术实施例2中测序结果与OsPCR1的cDNA序列比对图；图5为本专利技术实施例4中OsPCR1过表达转基因株系的PCR潮霉素基因鉴定电溶图。具体实施方式下面将结合附图对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。根据本专利技术的一个方面，一种水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，所述水稻OsPCR1基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。本专利技术提供的水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，所述水稻OsPCR1基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。在本专利技术通过实验证明转入了水稻OsPCR1基因并过表达的植物对重金属的抵抗能力有了显著的提高。本专利技术培育出抗重金属植物的方法简便而有效，为提高植物抗重金属能力提供了新的有效选择，具有好的应用前景。在本专利技术的一种优选实施方式中，所述抗重金属为抗重金属镉元素和铅元素。作为一种优选的实施方式，上述抗重金属为抗重金属镉元素和铅元素。镉元素和铅元素均属于重金属元素，对土壤植物系统产生毒害作用，导致土壤退化、农作物的产量和品质下。另外，镉元素和铅元素可以通过植物的吸附作用进入植物体内，还可以通过径流和淋洗等作用污染地表水和地下水，最终能通过接触和食物链等途径危害人们的生命健康。因此，对植物镉元素和铅元素的抗逆性品种的筛选和育种变得尤为重要。在本专利技术的一种优选实施方式中，所述应用包括以下步骤：将所述水稻OsPCR1基因连接至植物过表达载体，并转化目的植物后进行筛选，得到抗重金属植物。作为一种优选的实施方式，本专利技术首先将水稻OsPCR1基因连接至植物过表达载体，随后将连接有水稻OsPCR1基因的植物过表达载体转化目的植物，然后将目的植物进行筛选，得到抗重金属植物。该方法简便而有效，为提高植物抗重金属能力提供了新的有效选择。如图1所示，在本专利技术的一种优选实施方式中，所述植物过表达载体为35S-1300-EGFP质粒。作为一种优选的实施方式，上述植物过表达载体为35S-1300-EGFP质粒。35S-1300-EGFP质粒具有KpnI和SalI双酶切位点，可以很好的将酶切后的水稻OsPCR1基因与35S-1300-EGFP载体骨架连接。在上述优选实施方式中，所述水稻OsPCR1基因连接至植物过表达载体的方法为：(a)克隆水稻OsPCR1基因：以水稻总RNA为模板，反转获得cDNA第一链，然后以cDNA第一链为模板，SEQIDNo.2和SEQIDNo.3所示核苷酸序列为引物，进行PCR扩增，获得带酶切位点的水稻OsPCR1基因；(b)植物表达载体的构建：将步骤(a)扩增获得的带酶切位点的水稻OsPCR1基因分别用KpnI和SalI本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，其特征在于，所述水稻OsPCR1基因的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种水稻OsPCR1基因在培育抗重金属植物中的应用，其特征在于，所述水稻OsPCR1基因的核苷酸序列如SEQIDNo.1所示。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述抗重金属为抗重金属镉元素和铅元素。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述应用包括以下步骤：将所述水稻OsPCR1基因连接至植物过表达载体，并转化目的植物后进行筛选，得到抗重金属植物。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述植物过表达载体为35S-1300-EGFP质粒。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述水稻OsPCR1基因连接至植物过表达载体的方法为：(a)克隆水稻OsPCR1基因：以水稻总RNA为模板，反转获得cDNA第一链，然后以cDNA第一链为模板，SEQIDNo.2和SEQIDNo.3所示核苷酸序列为引物，进行PCR扩增，获得带酶切位点的水稻OsPCR1基因；(b)植物表达载体的构建：将步骤(a)扩增获得的带...

【专利技术属性】
技术研发人员：王飞娟，丁艳菲，贺希格都楞，孙骏威，朱诚，陈志祥，易可可，王俊敏，
申请(专利权)人：中国计量大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33