用于水解蛋壳膜的复合酶、蛋壳膜的水解方法、蛋壳膜水解产物及其提取方法技术

本发明专利技术涉及生物工程技术领域，提供了用于水解蛋壳膜的复合酶，包括质量比为0.2～5:1的角蛋白酶和碱性蛋白酶。该复合酶能使得蛋壳膜水解更充分。蛋壳膜的水解方法：将蛋壳膜干粉与水混合，在70～80℃下保温10～240分钟后冷却至50～55℃保温得到蛋壳膜液；调节蛋壳膜液的pH为8.0～8.5，加入复合酶，继续保温得蛋壳膜水解混合液。该水解方法能使蛋壳膜水解充分。蛋壳膜水解产物的提取方法，包括上述的蛋壳膜的水解方法，和调节pH至5.0～8.0，升温至90～100℃保温10～60分钟，经过滤、浓缩及喷雾干燥。该提取方法得到的水解产物的收率高，品质好。本发明专利技术还提供了采用上述提取方法制得的蛋壳膜水解产物。

【技术实现步骤摘要】
用于水解蛋壳膜的复合酶、蛋壳膜的水解方法、蛋壳膜水解产物及其提取方法
本专利技术涉及生物工程
，具体而言，涉及一种用于水解蛋壳膜的复合酶、蛋壳膜的水解方法、蛋壳膜水解产物及其提取方法。
技术介绍
蛋壳膜的主要组成成分是蛋白质，以糖蛋白的形式存在，占膜总重的90％，具有较高的药用价值，但是直接食用难以起到较好的药用效果，将糖蛋白从蛋壳膜中提取出来成为关键。但是现有的酶解法提取蛋壳膜中糖蛋白等活性物质的收率均较低。鉴于此，特提出本申请。
技术实现思路
本专利技术提供了一种用于水解蛋壳膜的复合酶，旨在改善现有酶水解蛋壳膜不够充分的问题。本专利技术提供了一种蛋壳膜的水解方法，旨在改善现有的蛋壳膜采用酶法水解不够充分的问题。本专利技术还提供了一种蛋壳膜水解产物的提取方法，旨在改善现有酶解法提取蛋壳膜水解产物收率较低的问题。本专利技术还提供了一种蛋壳膜水解产物，其品质好。本专利技术是这样实现的：一种用于水解蛋壳膜的复合酶，包括质量比为0.2～5:1的角蛋白酶和碱性蛋白酶。一种蛋壳膜的水解方法，包括：将蛋壳膜干粉与其重量8～20倍的水混合，在70～80℃下保温10～240min后冷却至50～55℃得到蛋壳膜液；调节蛋壳膜液的pH为8.0～8.5，加入上述的复合酶，在50～55℃的环境下保温12～20h得蛋壳膜水解混合液，复合酶占蛋壳膜干粉重量的0.4％～10％，且角蛋白酶和碱性蛋白酶占蛋壳膜干粉的重量均大于或等于0.2％。一种蛋壳膜水解产物的提取方法，包括上述的蛋壳膜的水解方法，还包括：调节蛋壳膜水解混合液的pH至5.0～8.0，升温至90～100℃保温10～60min，然后依次经过滤、浓缩及喷雾干燥得到蛋壳膜水解产物。一种蛋壳膜水解产物，采用上述的蛋壳膜水解产物的提取方法制得。本专利技术的有益效果是：本专利技术通过上述设计得到的用于水解蛋壳膜的复合酶，由于其包括合理比例的角蛋白酶和碱性蛋白酶，当该复合酶用于蛋壳膜水解时，能使得蛋壳膜水解更充分，提高蛋壳膜水解产物的收率。本专利技术通过上述设计得到的蛋壳膜的水解方法，由于采用合适量的本专利技术提供的用于水解蛋壳膜的复合酶，且水解过程温度以及pH值设置合理，而使得制蛋壳膜能够水解更充分。本专利技术通过上述设计得到的蛋壳膜水解产物的提取方法，包括本专利技术提供的蛋壳膜的水解方法，由于包括上述水解方法，故其收率高，并且水解后在合适温度和pH环境下使得复合酶及部分大分子蛋白质失活沉淀去除，进而使得水解产物的品质好。本专利技术通过上述设计得到的蛋壳膜水解产物，由于采用上述蛋壳膜水解产物的提取方法制得，故该蛋壳膜水解产物的品质好。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。下面对本专利技术实施例提供用于水解蛋壳膜的复合酶、蛋壳膜的水解方法、蛋壳膜水解产物及其提取方法进行说明。一种用于水解蛋壳膜的复合酶，包括质量比为0.2～5:1的角蛋白酶和碱性蛋白酶。鸡蛋壳膜中富含大量的角蛋白，而角蛋白因其独特的网状结构，其大分子之间主要通过-S-S-键建立起稳定的结合，从而构成不溶性的蛋白质。本专利技术提供的复合酶，其中所含的角蛋白酶作用于角蛋白二硫键，将胱氨酸(-S-S-)还原为半胱氨酸(-SH)，使角蛋白高级结构解体而形成变性角蛋白。碱性蛋白酶是一种丝氨酸蛋白质酶，它能水解蛋白质分子肽链生成多肽或氨基酸，除了水解肽键外，还具有水解酯键、酰胺键的能力，具有较强的分解蛋白质的能力，经角蛋白酶水解得到的变性角蛋白则在碱性蛋白酶的作用下水解成大部分多肽、寡肽和少部分游离氨基酸。采用本专利技术提供的用于水解蛋壳膜的复合酶水解蛋壳膜时，能将蛋壳膜水解更完全。一种蛋壳膜的水解方法，包括：S1、将蛋壳膜干粉与其重量8～20倍的水混合，在70～80℃下保温10～240min后冷却至50～55℃得到蛋壳膜液。具体地，首先准备干净的蛋壳膜，由于蛋壳膜为纤维状网格结构难溶于水，故将该蛋壳膜干燥后粉碎得到蛋壳膜粉，粉碎后的蛋壳膜的紧密网状结构被破坏，有利于酶法提取蛋壳膜中水溶性物质。然后将蛋壳膜干粉与其重量8～20倍的水混合，混合过程不停搅拌以使得两者能够尽快混合均匀，混合均匀后将混合液升温至70～80℃，然后保温10～240min，保温结束后冷却至50～55℃得到蛋壳膜液。升温至70～80℃，然后保温10～240min是由于常温下蛋壳膜中蛋白分子的立体致密结构不利于蛋白酶水解，热处理使其结构变得松散，暴露蛋白内部作用位点，蛋壳膜蛋白经酶解产生了更多的亲水基团，即可提高溶解性能。温度不宜过高或过低，当温度为70～80℃溶解性能的提高效果最好。S2、调节蛋壳膜液的pH为8.0～8.5，加入本专利技术提供的复合酶，在50～55℃的环境下保温12～20h得蛋壳膜水解混合液，复合酶占蛋壳膜干粉重量的0.4％～10％，且角蛋白酶和碱性蛋白酶占蛋壳膜干粉的重量均大于或等于0.2％。具体地，保持S1步骤中得到的蛋壳膜液温度为50～55℃，然后采用1～4M的盐酸调节蛋壳膜液的pH为8.0～8.5，加入本专利技术提供的复合酶，继续在50～55℃的环境下保温12～20h得到蛋壳膜水解混合液，复合酶的加入量为蛋壳干粉重量的0.4％～10％，且角蛋白酶和碱性蛋白酶占蛋壳膜干粉的重量均大于或等于0.2％，优选地，角蛋白酶占蛋壳膜干粉重量的0.2％～5％，碱性蛋白酶占蛋壳膜干粉重量的0.2％～5％。本专利技术提供的复合酶在温度为50～55℃，pH为8.0～8.5的条件下，其所含的角蛋白酶和碱性蛋白酶相互配合作用，能将蛋壳膜所含的角蛋白充分水解为多肽、寡肽及游离的氨基酸。一种蛋壳膜水解产物的提取方法，包括上述的蛋壳膜的水解方法，还包括：S3、调节蛋壳膜水解混合液的pH至5.0～8.0，升温至90～100℃保温10～60min，然后依次经过滤、浓缩及喷雾干燥得到蛋壳膜水解产物。具体地，采用1～4M的盐酸调节蛋壳膜水解混合液的pH至5.0～8.0，然后升高蛋壳膜水解混合液的温度至90～100℃保温10～60min使角蛋白酶和碱性蛋白酶以及一些大分子中性蛋白质变性以沉淀的形式析出。保温后得到悬浊液，将此悬浊液进行过滤，保留滤液弃去或回收滤渣。得到的滤液中即含有蛋壳膜的水解产物：多肽、寡肽以及一些游离氨基酸。将得到的滤液进行浓缩，浓缩至质量浓度为10％～20％得到浓缩液，便于后续喷雾干燥。浓缩后为保证制得的水解产物储存时间更长，将该浓缩液经孔径为1～0.22μm的膜再次过滤，以达到除菌的效果。过滤后将得到的无菌浓缩液在200～250℃条件下喷雾干燥得到蛋壳膜水解产物成品。本专利技术提供的蛋壳膜水解产物的提取方法由于采用本专利技术提供的复合酶，在合适温度和pH下对角蛋白水解更充分，进而使得制得的蛋壳膜水解产物收率高。本专利技术提供方的蛋壳膜水解产物，该水解产物由本专利技术提供的蛋壳膜水解产物的提取方法制得。以下结合具体实施例对本专利技术提供的用于水解蛋壳膜的复合酶、蛋壳膜的水解方法、蛋壳膜水解产物及其提取方法进行具体说明。实施例1本实施例提供了一种水解蛋壳膜的复合酶、蛋壳膜的水解方法、蛋壳膜水解产物及其提取方法。一种水解蛋壳膜的复合酶本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于水解蛋壳膜的复合酶，其特征在于，包括质量比为0.2～5:1的角蛋白酶和碱性蛋白酶。

【技术特征摘要】
1.一种用于水解蛋壳膜的复合酶，其特征在于，包括质量比为0.2～5:1的角蛋白酶和碱性蛋白酶。2.一种蛋壳膜的水解方法，其特征在于，包括：将蛋壳膜干粉与其重量8～20倍的水混合，在70～80℃下保温10～240min后冷却至50～55℃得到蛋壳膜液；调节所述蛋壳膜液的pH为8.0～8.5，加入如权利要求1所述的复合酶，在50～55℃的环境下保温12～20h得蛋壳膜水解混合液，所述复合酶占所述蛋壳膜干粉重量的0.4％～10％，且所述角蛋白酶和所述碱性蛋白酶占所述蛋壳膜干粉的重量均大于或等于0.2％。3.根据权利要求2所述的蛋壳膜的水解方法，其特征在于，所述角蛋白酶占所述蛋壳膜干粉重量的0.2％～5％，所述碱性蛋白酶占所述蛋壳膜干粉重量的0.2％～5％。4.根据权利要求2所述的蛋壳膜的水解方法，其特征在于，向所述蛋壳膜干粉中加水之前还包括，将蛋壳膜干燥后粉碎得到所述蛋壳膜干粉。5.一种蛋壳...

【专利技术属性】
技术研发人员：张革，唐章勇，陈诚，陈云，
申请(专利权)人：四川德博尔制药有限公司，
类型：发明
国别省市：四川,51