本发明专利技术公开了一种微生物菌剂，包括枯草芽孢杆菌、弯曲芽孢杆菌、屎肠球菌、酿酒酵母。同时公开了该微生物菌剂的制备方法和使用方法：将枯草芽孢杆菌、弯曲芽孢杆菌、屎肠球菌、酿酒酵母分别接入到液体种子活化培养基进行活化，然后分别接入到扩增培养基进行一级培养，再分别将一级培养所得菌液接入到另外的扩增培养基进行二级培养，二级培养所得各菌液按比例混合混匀，然后接入含5%糖蜜的无机盐培养基中，微好氧发酵7天，得到微生物菌剂。本发明专利技术的微生物菌剂不含致病菌，不含重金属和有毒害化学物质，适合水产养殖领域中养殖水的生物处理。实际应用不会对环境造成二次污染，不会额外造成负担，属于环境友好亲和型微生物菌剂产品。
【技术实现步骤摘要】
一种微生物菌剂及该微生物菌剂的制备、使用方法
一种微生物菌剂及该微生物菌剂的制备、使用方法，属于水产养殖中养殖水的生物处理
技术介绍
我国是一个水产养殖大国，水体中氨氮、亚硝酸盐对水生动物具有危害，应将水体中氨氮保持在2mg/L以下，亚硝酸盐保持在1mg/L以下。微生物菌群作为环保型高效的水处理制剂，其技术关键是：筛选、培养、驯化出能快速高效去除污染物的菌群。微生物菌剂中的高效菌种是通过从微生物菌种保藏中心得到。再经过特定的培养基活化，按照不同比例将各菌种复合配制成养殖水处理的菌剂。通过添加有益菌，在达到污染物去除的同时，增加水生动物的抵抗力，减少疾病的爆发。本专利技术根据不同养殖水的特点，制备出能有效控制水体污染物的的微生物菌剂，使水体保持清爽。
技术实现思路
为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案是：一种微生物菌剂，以单个纯菌株培养到对数末期的活菌数量比计，包括25∽35%的枯草芽孢杆菌、27∽32%的弯曲芽孢杆菌、30∽32%的屎肠球菌、6∽12%的酿酒酵母。所述微生物菌剂，以单个纯菌株培养到对数末期的活菌数量比计，包括32%的枯草芽孢杆菌、32%的弯曲芽孢杆菌、28%的屎肠球菌、8%的酿酒酵母。一种微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌、弯曲芽孢杆菌、屎肠球菌、酿酒酵母分别接入到液体种子活化培养基进行活化，然后分别再以1∽3%的接种量接入到扩增培养基进行一级培养，再分别将一级培养所得菌液以1∽3%的接种量接入到另外的扩增培养基进行二级培养，二级培养所得各菌液按比例混合混匀制成初始微生物混合菌剂，将初始微生物混合菌剂接入含5%糖蜜的无机盐培养基中，微好氧发酵7天，得到微生物菌剂。枯草芽孢杆菌的活化条件包括有温度35∽38℃、时间10∽14小时；弯曲芽孢杆菌的活化条件包括有温度35∽38℃、时间10∽14小时；屎肠球菌的活化条件包括有温度35∽38℃、时间10∽14小时；酿酒酵母的活化条件包括有温度28∽32℃、时间22∽24小时。用于活化所述枯草芽孢杆菌的培养基成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的蛋白胨、0.8∽1.2%的氯化钠、0.4∽0.6%的酵母膏、0.5∽1.5%的氢氧化钠，培养基的pH值调到6.5∽7.5，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再用来活化枯草芽孢杆菌；用于活化所述弯曲芽孢杆菌的培养基成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的蛋白胨、0.8∽1.2%的氯化钠、0.4∽0.6%的酵母膏、0.5∽1.5%的氢氧化钠，培养基的pH值调到6.5∽7.5，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再用来活化弯曲芽孢杆菌；活化所述屎肠球菌的培养基为MRS液体培养基，MRS液体培养基在120℃条件下灭菌15分钟后再进行屎肠球菌活化；活化所述酿酒酵母的培养基的成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的酵母膏、1.5∽2.5%的蛋白胨、1∽3%的蔗糖，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟再用来活化酿酒酵母。枯草芽孢杆菌的一级培养包括温度为35∽38℃、转速为50rpm、时间为10∽14小时，枯草芽孢杆菌的二级培养包括温度为35∽38℃、转速为200rpm、时间为9∽11小时；所述弯曲芽孢杆菌的一级培养包括温度为35∽38℃、转速为50rpm、时间为10∽14小时，弯曲芽孢杆菌的二级培养包括温度为35∽38℃、转速为200rpm、时间为9∽11小时；所述屎肠球菌的一级培养包括温度为35∽38℃、转速为50rpm、时间为10∽14小时，屎肠球菌的二级培养包括温度为28∽35℃、转速为100rpm、时间为9∽11小时；所述酿酒酵母的一级培养包括温度为28∽32℃、转速为50rpm、时间为16∽20小时，酿酒酵母的二级培养包括温度为28∽32℃、转速为200rpm、时间为14∽16小时；用于枯草芽孢杆菌一级培养和二级培养使用的扩增培养基成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的蜜糖、0.4∽0.6%的酵母膏、0.8∽1.2%的氯化钠，扩增培养基的pH值调到6.5∽7.5，将扩增培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再分别用来枯草芽孢杆菌的一级培养和二级培养；用于弯曲芽孢杆菌一级培养和二级培养使用的扩增培养基的成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的蜜糖、0.4∽0.6%的酵母膏、0.8∽1.2%的氯化钠，扩增培养基的pH值调到6.5∽7.5，将扩增培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再分别用来弯曲芽孢杆菌的一级培养和二级培养；用于屎肠球菌一级培养和二级培养使用的扩增培养基为MRS液体培养基，MRS液体培养基在120℃条件下灭菌15后再分别用来屎肠球菌的一级培养和二级培养；用于酿酒酵母一级培养和二级培养使用的扩增培养基的成分以质量百分比计，包括0.8∽2.2%的蜜糖、0.8∽1.2%的酵母膏，将扩增培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再分别用来酿酒酵母的一级培养和二级培养。一种微生物菌剂的使用方法，在每亩养殖水中添加500ml所述微生物菌剂，一个月添加两到三次，微生物菌剂中活菌数量在30亿CFU/ml以上。本专利技术的有益效果是：本专利技术的微生物菌剂不含致病菌，不含重金属和有毒害化学物质，适合水产养殖领域中养殖水的生物处理。实际应用不会对环境造成二次污染，不会额外造成负担，属于环境友好亲和型微生物菌剂产品。本专利技术的微生物菌剂的制备方法易操作，产品方便储运和投放。具体实施方式一种微生物菌剂的制备方法：1、从-70℃的冰箱中取出甘油冻管保藏的枯草芽孢杆菌（BacillussubtilisCCTCCAB130006）菌种、弯曲芽孢杆菌（BacillusflexusCCTCCAB206923）菌种、屎肠球菌（EnterococcusfaeciumCICC20680）菌种、酿酒酵母（SaccharomycescerevisiaeATCC9080）菌种，在经紫外灭菌的超净工作台中融解，移液枪无菌吸取1ml接入已灭菌的10ml液体种子活化培养基中，其中，用于活化所述枯草芽孢杆菌的培养基成分以质量百分比计，包括1.0%的蛋白胨、1.0%的氯化钠、0.5%的酵母膏、1.0%的氢氧化钠，培养基的pH值调到7.0，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再用来活化枯草芽孢杆菌；用于活化所述弯曲芽孢杆菌的培养基成分以质量百分比计，包括1.0%的蛋白胨、1.0%的氯化钠、0.5%的酵母膏、1.0%的氢氧化钠，培养基的pH值调到7.0，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再用来活化弯曲芽孢杆菌；活化所述屎肠球菌的培养基为MRS液体培养基，MRS液体培养基在120℃条件下灭菌15分钟后再进行屎肠球菌活化；活化所述酿酒酵母的培养基的成分以质量百分比计，包括1.0%的酵母膏、2.0%的蛋白胨、2%的蔗糖，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟再用来活化酿酒酵母。2、枯草芽孢杆菌接入液体种子活化培养基后，在37℃的温度条件下活化12小时；弯曲芽孢杆菌接入液体种子活化培养基后，在37℃的温度条件下活化12小时；屎肠球菌接入液体种子活化培养基后，在32℃的温度条件下活化12小时；酿酒酵母接入液体种子活化培养基后，在30℃的温度条件下活化24小时。3、无菌条件下吸取活化好的各菌种1ml，接入50mL的扩增培养基中，进本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂，以单个纯菌株培养到对数末期的活菌数量比计，包括25∽35 %的枯草芽孢杆菌、27∽32%的弯曲芽孢杆菌、30∽32 %的屎肠球菌、6∽12 %的酿酒酵母。
【技术特征摘要】
1.一种微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂，以单个纯菌株培养到对数末期的活菌数量比计，包括25∽35%的枯草芽孢杆菌、27∽32%的弯曲芽孢杆菌、30∽32%的屎肠球菌、6∽12%的酿酒酵母。2.如权利要求1所述的微生物菌剂，其特征在于，微生物菌剂，以单个纯菌株培养到对数末期的活菌数量比计，包括32%的枯草芽孢杆菌、32%的弯曲芽孢杆菌、28%的屎肠球菌、8%的酿酒酵母。3.一种如权利要求1所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将枯草芽孢杆菌、弯曲芽孢杆菌、屎肠球菌、酿酒酵母分别接入到液体种子活化培养基进行活化，然后分别再以1∽3%的接种量接入到扩增培养基进行一级培养，再分别将一级培养所得菌液以1∽3%的接种量接入到另外的扩增培养基进行二级培养，二级培养所得各菌液按比例混合混匀制成初始微生物混合菌剂，将初始微生物混合菌剂接入含5%糖蜜的无机盐培养基中，微好氧发酵7天，得到微生物菌剂。4.如权利要求3所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌的活化条件包括有温度35∽38℃、时间10∽14小时；弯曲芽孢杆菌的活化条件包括有温度35∽38℃、时间10∽14小时；屎肠球菌的活化条件包括有温度35∽38℃、时间10∽14小时；酿酒酵母的活化条件包括有温度28∽32℃、时间22∽24小时。5.如权利要求3或4所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，用于活化所述枯草芽孢杆菌的培养基成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的蛋白胨、0.8∽1.2%的氯化钠、0.4∽0.6%的酵母膏、0.5∽1.5%的氢氧化钠，培养基的pH值调到6.5∽7.5，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再用来活化枯草芽孢杆菌；用于活化所述弯曲芽孢杆菌的培养基成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的蛋白胨、0.8∽1.2%的氯化钠、0.4∽0.6%的酵母膏、0.5∽1.5%的氢氧化钠，培养基的pH值调到6.5∽7.5，将培养基在115℃条件下灭菌20分钟后再用来活化弯曲芽孢杆菌；活化所述屎肠球菌的培养基为MRS液体培养基，MRS液体培养基在120℃条件下灭菌15分钟后再进行屎肠球菌活化；活化所述酿酒酵母的培养基的成分以质量百分比计，包括0.8∽1.2%的酵母膏、1.5∽2.5%的...
【专利技术属性】
技术研发人员：朱胜杰，李健，曹彪，
申请(专利权)人：浙江华庆元生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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