一种培养五棱散尾鬼笔的培养基及其制备方法技术

提供一种用于五棱散尾鬼笔菌丝培养的培养基，属于微生物培养领域。研究表明，五棱散尾鬼笔具有良好的农药开发前景。现有用于培养真菌的几种培养基培养五棱散尾鬼笔，菌丝体生长缓慢，菌丝形态稀疏、扭曲，不能满足实验的要求。本发明专利技术提供一种用于五棱散尾鬼笔菌丝培养的培养基，采集两年生白桦树树枝、掉落的落叶松松针、掉落的白桦树树叶等原料，进行粉碎、超声波等处理后，配置成琼脂培养基，而后分装到培养皿中，将五棱散尾鬼笔的菌丝接种于培养基上进行培养。本发明专利技术能加快五棱散尾鬼笔菌丝的生长速度，长满9mm培养皿的时间由普通真菌培养基的14天缩短至9天。本发明专利技术培养基也适用于五棱散尾鬼笔子实体的组织分离和对五棱散尾鬼笔孢子的培养。

【技术实现步骤摘要】
一种培养五棱散尾鬼笔的培养基及其制备方法
本专利技术属于微生物培养领域，涉及一种培养基，具体地说是一种培养五棱散尾鬼笔的培养基及其制备方法。
技术介绍
五棱散尾鬼笔(Lysurusmokusin)属于笼头菌科(Clathracrae)，散尾鬼笔属(Phallus)。五棱散尾鬼笔菌头部细长，多成五棱柱形，头部有4-5个裂片，砖红色，初期裂片相互连在一起，后期从顶部彼此分离，内侧产生暗褐色孢体粘液，具腥臭味，常能吸引苍蝇等昆虫。菌柄浅粉至浅肉色，具4-5条凹槽，呈海绵状，菌托白色。又称棱柱散尾鬼笔、五棱散尾鬼笔。研究表明，五棱散尾鬼笔的乙醇提取物对舞毒蛾幼虫有较好的拒食作用；正丁醇提取物对尖孢镰刀菌和灰葡萄孢菌的生长具有明显的抑制作用，有很好的农药开发前景。对五棱散尾鬼笔的深入研究需要大量的菌丝体作为研究材料，但五棱散尾鬼笔的人工培养菌丝所需的培养基尚未见报道。培养基是供微生物、植物组织和动物组织生长和维持生长的人工配制的养料，一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。常见的真菌培养基有沙堡弱培养基(SDA)、沙氏培养基(SDB)、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)、高氏一号培养基(YMG)、淀粉培养基、麦芽浸汁琼脂培养基(MA)、米饭培养基(ricegrainmedium)、察氏培养基(CZA)等。五棱散尾鬼笔菌丝体在以上几种培养基上均生长缓慢，不能满足实验的要求。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题，是提供一种用于五棱散尾鬼笔菌丝培养的培养基，该培养基能加快五棱散尾鬼笔菌丝的生长速度，并且使其菌丝形态良好。本专利技术的技术方案是：一种培养五棱散尾鬼笔的培养基及其制备方法是采集两年生白桦树树枝、掉落的落叶松松针、掉落的白桦树树叶等原料，进行粉碎、超声波等处理后，配置成琼脂培养基，而后分装到培养皿中，将五棱散尾鬼笔的菌丝接种于培养基上进行培养。包括以下步骤：(是配制方法，而不是筛选过程)1.采集两年生新鲜白桦树树枝500g，掉落的落叶松松针100g，掉落的白桦树树叶70g，用粉碎机粉碎，加蒸馏水2000mL，超声波处理1h，处理条件为功率300w、温度50℃。得到处理后的提取液备用。2.在1000mL提取液中加入土豆50g，玉米粉30g，羧甲基纤维素5g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，KH2PO41g，K2HPO41g，MgSO40.5g，CaCl20.05g，KCl0.5g，FeSO40.01g，NaNO30.5g，维生素B10.05g，琼脂20g，调整pH值到5.5。3.按常规方法配置培养基，装瓶，121℃高压灭菌30min。在微波炉中将培养基融化后晃动培养基，将沉淀晃动均匀，在超净工作台中一边晃动培养基，一边将培养基分装至培养皿中，冷却凝固后待用。4.在超净工作台中将五棱散尾鬼笔菌丝接种在培养基中央，22℃避光培养。本专利技术具有以下优点：1.专利技术了一种专门用于五棱散尾鬼笔菌丝培养的培养基。2.本专利技术能加快五棱散尾鬼笔菌丝的生长速度，长满9mm培养皿的时间为9天。其他用于真菌的培养基培养五棱散尾鬼笔菌丝，长满9mm培养皿需要16天。3.本专利技术培养基的所用原材料容易获得。4.本专利技术培养基的配制方法简便，稍加学习即可掌握，学习成本低。5.本专利技术培养基也适用于五棱散尾鬼笔子实体的组织分离和对五棱散尾鬼笔孢子的培养。具体实施方式：1.采集两年生新鲜白桦树树枝500g，掉落的落叶松松针100g，掉落的白桦树树叶70g，用粉碎机粉碎，加蒸馏水2000mL，超声波处理1h，处理条件为功率300w、温度50℃。处理后得到的提取液备用。2.在1000mL提取液中加入土豆50g，玉米粉30g，羧甲基纤维素5g，蛋白胨10g，葡萄糖20g，KH2PO41g，K2HPO41g，MgSO40.5g，CaCl20.05g，KCl0.5g，FeSO40.01g，NaNO30.5g，维生素B10.05g，琼脂20g，调整pH值到5.5。3.按常规方法配置培养基，装瓶，121℃高压灭菌30min。在微波炉中将培养基融化后晃动培养基，将沉淀晃动均匀，在超净工作台中一边晃动培养基，一边将培养基分装至培养皿中，冷却凝固后待用。4.在超净工作台中将五棱散尾鬼笔菌丝接种在培养基中央，22℃避光培养。取土豆200g，葡萄糖20g，蛋白胨3g，无机盐溶液100mL(KH2PO41g，K2HPO41g，MgSO40.5g，CaCl20.05g，KCl0.5g，FeSO40.01g，NaNO30.5g)，琼脂20g，蒸馏水1L，配制成五棱散尾鬼笔菌丝生长培养基，用1mol/L的HCl和NaOH溶液调整培养基的pH值为5。将培养基分装在500mL三角瓶中，封瓶膜封口，121℃高压灭菌20min。在超净工作台中，将已灭菌且未凝固的培养基倒入已灭菌的9mm培养皿中，待其凝固。在超净工作台中，用6mm打孔器在已生长好的五棱散尾鬼笔菌落上打孔若干，将菌饼分别放置在培养基中间，25℃培养9d。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种培养五棱散尾鬼笔的培养基及其制备方法，其特征在于：采集两年生白桦树树枝、掉落的落叶松松针、掉落的白桦树树叶等原料，进行粉碎、超声波等处理后，配置成琼脂培养基，而后分装到培养皿中，将五棱散尾鬼笔的菌丝接种于培养基上进行培养。

【技术特征摘要】
1.一种培养五棱散尾鬼笔的培养基及其制备方法，其特征在于：采集两年生白桦树树枝、掉落的落叶松松针、掉落的白桦树树叶等原料，进行粉碎、超声波等处理后，配置成琼脂培养基，而后分装到培养皿中，将五棱散尾鬼笔的菌丝接种于培养基上进行培养。2.根据权利要求1所述的一种培养五棱散尾鬼笔的培养基及其制备方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)采集两年生新鲜白桦树树枝500g，掉落的落叶松松针100g，掉落的白桦树树叶70g，用粉碎机粉碎，加蒸馏水2000mL，超声波处理1h，处理条件为功率300w、温度50℃。得...

【专利技术属性】
技术研发人员：张国财，林连男，张国珍，王瑞琦，杨璟，张博文，毕冰，王婷玉，于颖颖，蔡良苑，
申请(专利权)人：东北林业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江,23