一种槲皮素修饰的纳米硫及其制备方法与在抗阿尔兹海默症药物中的应用技术

本发明专利技术属于药物的制备技术领域，具体涉及一种槲皮素修饰的纳米硫及其制备方法与在抗阿尔兹海默症药物中的应用。该方法利用纳米硫的微小尺寸和高表面能效应，将槲皮素修饰在纳米硫上，既利用了槲皮素降低细胞内的内质网应激的作用，又增加了槲皮素的水溶性，由此得到兼具高度生物相容性和AD治疗效果的槲皮素修饰的纳米硫。采用一锅法将槲皮素修饰的纳米硫进一步嵌入α‑氰基丙烯酸丁酯形成的微泡外壳中，得到含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂，其在超声作用下微泡可被破坏，产生声孔效应，使血脑屏障暂时打开，进而使槲皮素修饰的纳米硫能透过血脑屏障，进入脑部发挥治疗作用，因此具有高度脑靶向性。该药物制剂制备方法简单，产品便于保存和使用。

【技术实现步骤摘要】
一种槲皮素修饰的纳米硫及其制备方法与在抗阿尔兹海默症药物中的应用
本专利技术属于药物的制备
，具体涉及一种槲皮素修饰的纳米硫及其制备方法与在抗阿尔兹海默症药物中的应用。
技术介绍
阿尔兹海默病(AD)是一种常见的神经退行性疾病。由于其发病机制十分复杂，因此其治疗药物非常有限，治疗仍是难点。目前，公认的阿尔兹海默病的发病机制主要有两点。其一，淀粉样蛋白(Aβ)的异常聚集被认为与AD的发病密切相关。其二，内质网是一种重要的细胞器，负责对蛋白质的加工及折叠，如二硫键的形成以及蛋白质的糖基化。然而当细胞内外环境发生紊乱时，未折叠蛋白反应(UPR)或者错误折叠的蛋白会在内质网腔内蓄积，持续的UPR会进一步诱发内质网应激(ERstrees)，促使神经元凋亡。大量的研究表明，持续激活的UPR或ERstrees与AD的神经退变发生有关。目前，未见针对抑制UPR或ERstrees的抗AD药物。现有抗AD药物，如氯碘喹(CQ)及其一些衍生物，主要以抑制Aβ多肽聚集为靶点。该类药物可以有效地捕获Cu2+离子，从而抑制金属诱导的Aβ多肽聚集，在一定程度上提高了AD患者的认知能力。然而，该类药物大多不具有脑靶向性，不能特异性与脑实质细胞有效结合。这主要是因为血脑屏障(BBB)是神经性疾病中药物治疗的一大障碍。几乎所有的高分子量药物和超过98％的低分子量药物都不能穿过BBB。一般的AD治疗药物对血脑屏障(BBB)的渗透能力低，因此限制了其在患者脑部发挥作用，降低了药效。
技术实现思路
为克服现有技术的缺点和不足，本专利技术的首要目的在于提供一种槲皮素修饰的纳米硫的制备方法。本专利技术的另一目的是提供由上述制备方法得到的槲皮素修饰的纳米硫。本专利技术的再一目的是提供上述槲皮素修饰的纳米硫在抗阿尔兹海默症药物中的应用。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种槲皮素修饰的纳米硫的制备方法，包括以下步骤：将槲皮素水溶液与蛋氨酸水溶液混合，加入维生素C(Vc)水溶液，再加入硫代硫酸钠溶液，得到混合溶液，反应，离心得到沉淀，洗涤，得到所述的槲皮素修饰的纳米硫(Qc@SNPs)。优选的，所述的槲皮素水溶液的浓度为3.2～5mM，更优选为4mM。优选的，所述的蛋氨酸水溶液的浓度为50～180mM，更优选为100mM。优选的，所述的维生素C水溶液的浓度为0.05～0.3M，更优选为0.1M。优选的，所述的硫代硫酸钠溶液的浓度为6～15mM，更优选为10mM。优选的，所述的混合溶液中，槲皮素与硫代硫酸钠的摩尔比为1:3.75～1:6，更优选为1:5。优选的，所述的混合溶液中，维生素C与硫代硫酸钠的摩尔比为3:1～8:1，更优选为4:1。优选的，所述的混合溶液中，蛋氨酸与硫代硫酸钠的摩尔比为4:1～6:1，更优选为5:1。优选的，所述的反应在超声条件下进行。优选的，所述的反应在混合溶液的颜色由透明变为浅白色后，再继续进行15～30min，更优选为20min。优选的，所述的洗涤采用蒸馏水。本专利技术进一步提供一种由上述制备方法得到的槲皮素修饰的纳米硫。近年来，在神经变性疾病治疗中，硫化物纳米片已经被报道，其中的硫起关键作用，其参与Aβ结合，进而干扰Aβ聚集体中氢键的形成。然而，硫化物纳米片，大多数是硫与其他重金属的化合物，硫化物纳米片作为AD药物，治疗过程中会引入重金属离子，重金属离子积累则可能会产生毒副作用。相对而言，纳米硫主要组成为硫单质，是无毒材料，作为AD治疗药物具有天然优势。由于其微小尺寸效应和高表面能效应，因此纳米硫具有优异的生物活性，如去除重金属，清除自由基，抗氧化活性和抗菌活性。不同形貌和结构的硫纳米粒子表现出不同的化学性质以及生物活性。但目前尚没有采用纳米硫作为AD治疗剂的报道。槲皮素(Quercetin，Qc)是分布最广的黄酮类化合物之一。许多研究表明，槲皮素具有抗氧化、抗炎、降血压、抗血小板聚集、抗癌、抗动脉粥样硬化等功能。有研究表明，槲皮素可以通过降低细胞内的内质网应激，减少活性氧的产生，保护神经细胞。然而，槲皮素作为一种天然药物，其水溶性差，因此限制了其在AD治疗中的应用。本专利技术通过将槲皮素修饰在纳米硫上，可增加其在水中的分散性，促进其作为AD药物的吸收。本专利技术进一步提供上述槲皮素修饰的纳米硫在抗阿尔兹海默症药物中的应用。一种含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂，包含以下按摩尔份数计的原料：槲皮素修饰的纳米硫2×10-3份，α-氰基丙烯酸正丁酯1份和TritonX-100100份；所述的含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂为微泡状，所述的槲皮素修饰的纳米硫嵌入在微泡的外壳中。上述含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂的制备方法，包括以下步骤：将聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)溶解在磷酸缓冲盐溶液(PBS)中，得到聚乙二醇辛基苯基醚溶液，加入槲皮素修饰的纳米硫水溶液，调节pH至2～3，加入α-氰基丙烯酸正丁酯(BCA)单体水溶液，得到混合溶液，搅拌均匀，离心，得到所述的含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂(Qc@SNPs-MB)。优选的，所述的槲皮素修饰的纳米硫水溶液的浓度为0.16～0.3mM，更优选为0.2mM。优选的，所述的聚乙二醇辛基苯基醚溶液的浓度为1％(w/v)。优选的，所述的α-氰基丙烯酸正丁酯单体水溶液的浓度为8～12M，更优选为10M。优选的，所述的混合溶液中，槲皮素修饰的纳米硫与α-氰基丙烯酸正丁酯的摩尔比为2×10-3:1～2.5×10-3:1。优选的，所述的调节pH采用浓度为1M的盐酸进行调节。优选的，所述的调节pH至2.5。优选的，所述的搅拌均匀的条件为在1000rpm下搅拌0.8～1.2h，更优选为1h。本专利技术采用一锅法，将α-氰基丙烯酸丁酯(BCA)在酸性条件下聚合形成聚--氰基丙烯酸丁酯，同时形成微泡，所述的槲皮素修饰的纳米硫嵌入在微泡的外壳中。该微泡可在超声的条件下被破坏，产生声孔效应，使BBB暂时打开。因此本专利技术制备的含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂在用药时结合超声，可显著提高药物对BBB的渗透能力，提高药效。本专利技术与现有技术相比，具有如下的优点和有益效果：(1)本专利技术制备的槲皮素修饰的纳米硫可有效抑制神经元的内质网应激，降低由内质网应激带来的活性氧。其具有高度生物相容性、脑靶向性和血脑屏障渗透性。(2)本专利技术制备的含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂为微泡状，其在超声作用下可产生声孔效应，使血脑屏障暂时打开，进而使槲皮素修饰的纳米硫能透过血脑屏障，进入脑部发挥治疗作用。(3)本专利技术中槲皮素修饰的纳米硫和含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂的制备过程简单，所得产品便于保存和使用。附图说明图1为本专利技术中槲皮素修饰的纳米硫及含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂的制备工艺流程图。图2为实施例1中制备的槲皮素修饰的纳米硫的透射电子显微镜图。图3为实施例1中制备的含有槲皮素修饰的纳米硫的药物制剂的扫描电子显微镜图。图4为实施例2中细胞毒性试验中的不同Qc@SNPs浓度下的细胞存活率图。图5为实施例2中细胞对Qc@SNPs的吸收实验中的细胞激光共聚焦图。图6为实施例2中Qc@SNPs减少细胞凋亡实验中的细胞存活率图。图7为实施例2中Qc@SNPs降低内质网应激实验中的细胞激光共聚焦图。图8为实施例3中的小鼠荧光成像图。图本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种槲皮素修饰的纳米硫的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将槲皮素水溶液与蛋氨酸水溶液混合，加入维生素C水溶液，再加入硫代硫酸钠溶液，得到混合溶液，反应，离心得到沉淀，洗涤，得到所述的槲皮素修饰的纳米硫。

【技术特征摘要】
1.一种槲皮素修饰的纳米硫的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将槲皮素水溶液与蛋氨酸水溶液混合，加入维生素C水溶液，再加入硫代硫酸钠溶液，得到混合溶液，反应，离心得到沉淀，洗涤，得到所述的槲皮素修饰的纳米硫。2.根据权利要求1所述的槲皮素修饰的纳米硫的制备方法，其特征在于：所述的槲皮素水溶液的浓度为3.2～5mM；所述的蛋氨酸水溶液的浓度为50～180mM；所述的维生素C水溶液的浓度为0.05～0.3M；所述的硫代硫酸钠溶液的浓度为6～15mM。3.根据权利要求2所述的槲皮素修饰的纳米硫的制备方法，其特征在于：所述的槲皮素水溶液的浓度为4mM；所述的蛋氨酸水溶液的浓度为100mM；所述的维生素C水溶液的浓度为0.1M；所述的硫代硫酸钠溶液的浓度为10mM。4.根据权利要求1～3任一项所述的槲皮素修饰的纳米硫的制备方法，其特征在于：所述的混合溶液中，槲皮素与硫代硫酸钠的摩尔比为1:3.75～1:6；所述的维生素C与硫代硫酸钠的摩尔比为3:1～8:1；所述的蛋氨酸与硫代硫酸钠的摩尔比为4:1～6:1。5.根据权利要求4所述的槲皮素修饰的纳米硫的制备方法，其特征在于：所述的混合溶液中，槲皮素与硫代硫酸钠的摩尔比为1:5；所述的维生素C与硫代硫酸钠的摩尔比为4:1；所述的蛋氨酸与硫代硫酸钠的摩尔比为5:1。6.一种槲皮素修饰的纳米硫，其特征在于：由权利要求1～5任一项所述的制备方法得到。7.一种含有槲皮素修饰的纳米硫的药...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘杰，谢文杰，
申请(专利权)人：暨南大学，
类型：发明
国别省市：广东,44