【技术实现步骤摘要】
一种龙珠果组织培养方法
本专利技术属于植物组织培养领域,具体涉及一种龙珠果组织培养方法。
技术介绍
龙珠果(PassiflorafoetidaL.),又名香花果、天仙果、野仙桃等,为西番莲科西番莲属草质藤本植物。原产于西印度群岛,在我国主要分布于广东、海南、福建和台湾等地,生长于荒山草坡、灌丛或近海边沙滩(王东等,2014)。龙珠果植株高数米,整株尤其是损伤的叶片常散发出辛辣的味道;茎具条纹且有平展柔毛;叶膜质,表面有柔毛,宽卵形或长圆状卵形,基部心形且有3~5个浅裂,边缘不规则,叶脉羽状;叶柄具平展柔毛;托叶半抱茎,深裂;聚伞花序,花白色或淡紫色,具白斑;苞片3枚;萼片5枚;花瓣5枚;浆果卵圆球形,无毛;种子多数,椭圆形,草黄色;花期7~8月,果期翌年4~5月(中国植物志,1999)。龙珠果花朵秀丽,颜色多变,具有一定的观赏价值;果实外形美观,香甜可食,具有一定的经济价值;全株可入药,具有一定的药用价值。龙珠果中主要含有黄酮类化合物,其主要成分有牡荆素、异牡荆素、荭草素、异荭草素等(中华本草,1999)。龙珠果具有清热解毒、清肺止咳之功效,临床多用于治疗肺热咳嗽、小便混浊、痈疮肿毒、外伤性眼角膜炎、淋巴结炎等症(姬生国等,2012;中国植物志,1999)。国外研究表明,龙珠果提取物在治疗酒精、尼古丁、吗啡及大麻酚的药物成瘾性方面疗效较好(Sasikala等,2011;Sathish等,2011)。果实可用作催吐剂、用果实煎煮可用于治疗哮喘;叶片外敷可治疗创伤,干燥的叶片泡茶有助于解决睡眠问题;根可用于调经并且对治疗过度兴奋和暴躁有作用(Deshaprab ...
【技术保护点】
1.一种以叶片诱导体胚的龙珠果组织培养方法,其特征在于,包括以下步骤a.外植体的准备:取龙珠果叶片,经消毒后,将叶片切块作为外植体;b.诱导体胚:将外植体接入体胚诱导培养基培养,诱导出体胚;所述的体胚诱导培养基:每升含有2,4‑D0.5~3.0mg、TDZ0.05~0.15mg、琼脂6.0~7.0g、蔗糖20~30g和余量的MS培养基,pH5.7~5.8;c.体胚萌发:将体胚转接到体胚萌发培养基培养,得到萌发的体胚;所述的体胚萌发培养基:每升含有6‑BA1.5~2.5mg、NAA0.15~0.25mg、GA30.5~1.5mg、琼脂6.0~7.0g、蔗糖20~30g和余量的MS培养基,pH5.7~5.8;d.植株再生培养:将萌发的体胚转接到植株再生培养基培养,获得龙珠果幼苗;所述的植株再生培养基:每升含有IBA0.05~0.2mg、琼脂6.0~7.0g、蔗糖20~30g和余量的1/2MS培养基,pH5.7~5.8;e.炼苗及移栽:将龙珠果幼苗炼苗,移栽,进行培养管理,得到龙珠果植株。
【技术特征摘要】
1.一种以叶片诱导体胚的龙珠果组织培养方法,其特征在于,包括以下步骤a.外植体的准备:取龙珠果叶片,经消毒后,将叶片切块作为外植体;b.诱导体胚:将外植体接入体胚诱导培养基培养,诱导出体胚;所述的体胚诱导培养基:每升含有2,4-D0.5~3.0mg、TDZ0.05~0.15mg、琼脂6.0~7.0g、蔗糖20~30g和余量的MS培养基,pH5.7~5.8;c.体胚萌发:将体胚转接到体胚萌发培养基培养,得到萌发的体胚;所述的体胚萌发培养基:每升含有6-BA1.5~2.5mg、NAA0.15~0.25mg、GA30.5~1.5mg、琼脂6.0~7.0g、蔗糖20~30g和余量的MS培养基,pH5.7~5.8;d.植株再生培养:将萌发的体胚转接到植株再生培养基培养,获得龙珠果幼苗;所述的植株再生培养基:每升含有IBA0.05~0.2mg、琼脂6.0~7.0g、蔗糖20~30g和余量的1/2MS培养基,pH5.7~5.8;e.炼苗及移栽:将龙珠果幼苗炼苗,移栽,进行培养管理,得到龙珠果植株。2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤a的消毒是将龙珠果叶片用无菌水清洗2~3次,然后用体积分数75%乙醇水溶液将叶片正反面擦拭后,再用无菌水清洗2~3次,然后用加有终浓度为质量分数0.02%的Tween-20的质量分数0.1%的HgCl2溶液浸泡3~5min,最后用无菌水冲洗4~5次。3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤b的将外植体接入体胚诱导培养基培养,是将外植体以叶片近轴面朝上的方式接入体胚诱导培养基培养。4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤b、c、d中的培养条件为温度25±2℃、光照强度1500~2000lx、光照时间12h/d。5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的步骤e的炼苗及移栽,是当龙珠果幼苗长至8~10cm高时,将培养瓶打开瓶盖后转移到自然光下炼苗7~10d;然后取出龙珠果幼苗并将根部的培养基冲洗干净,种植于将泥炭土:蛭石:珍珠岩以体积比2:1:1混匀得到的基质中,适时浇水。6.一种以叶片诱导体胚和不定芽的龙珠果组织培...
【专利技术属性】
技术研发人员:段俊,刘艳艳,何春梅,
申请(专利权)人:中国科学院华南植物园,
类型:发明
国别省市:广东,44
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