The method for separating magnetic particles from fluids includes: introducing a fluid mixture comprising liquid media, biological components and magnetic particles into the inner compartment of the container through an inlet; allowing at least a portion of the mixture to move around a partition formed in the inner compartment, and then passing through the partition. The exit on the opposite side leaves the inner compartment; and a magnetic field is applied to the mixture in the inner compartment so that the magnetic particles are retained in the container or its inner compartment through the magnetic field. The partition zone is formed by fixing the upper container wall and the lower container wall together permanently or reversibly between the inlet and outlet, such as by welding or pressing, so that the media and biological components must flow around the partition zone and leave the inner compartment through the outlet through the magnetic field.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有部分分割分隔区的柔性生物处理容器
本公开涉及用于从流体中分离磁性颗粒的系统、方法和产品。
技术介绍
人类T细胞的活化和扩增可包含将饲养细胞(例如抗原呈递细胞)或T细胞活化抗体引入到T细胞培养物。然而,抗体或抗原呈递饲养细胞的后活化和扩增去除可需要费力的纯化。替代地,更精密的磁珠系统可向细胞培养物中引入一定量的与特异性抗体(例如,抗CD3、抗CD28、抗CD137等)共价联接的磁珠,其可提供针对有效的T细胞活化和扩增而优化的初级和共刺激信号。然后可使用磁性装置去除磁珠。举例来说,含磁珠的培养物可曝露于(例如,流体地通过)保留抗体结合磁珠的磁性装置,允许活化和扩增的T细胞远离珠粒而纯化。作为说明,本公开的图1描绘了具有内部隔室12、入口14和出口16(或反之亦然)的磁珠去除袋10。袋10可放置在磁性装置(如DynamagTMCTSTM磁体)上,使得在含磁珠的培养物通过入口14引入到隔室12中时,由磁性装置在隔室12内生成的磁场18保留曝露于磁场18的磁珠中的至少一些。然后通过出口14回收产物。现有系统的一个问题是,磁珠中的一些可能未被磁场18保留,并且因此污染了通过出口14回收的产物。为了去除基本上全部的磁珠,混合物可能需要曝露于磁场18多次。举例来说,混合物可能需要循环通过袋10多次(例如两次或多于两次),以便将磁珠再次曝露于磁场18。替代地或者另外,用户可确保含磁珠的培养物以低流动速率流过隔室12,以确保磁珠曝露于磁场18足够的时间量(例如,小于20-30mL/min)。其它解决方案包含围绕次级磁体缠绕从出口14延伸的出口管,使得回收的产物曝露于将磁珠 ...
【技术保护点】
1.一种从流体中分离磁性颗粒的方法,所述方法包括:通过柔性容器的入口,将流体混合物引入到所述容器的内部隔室中,所述流体混合物包括液体介质、生物组分和磁性颗粒;允许所述流体混合物的至少一部分围绕形成在所述内部隔室内的分隔区行进,并且然后通过所述容器的出口离开所述内部隔室;和将磁场施加到所述内部隔室中的所述流体混合物,使得在所述介质和所述生物组分从所述入口、围绕所述分隔区向所述出口流动时,所述磁性颗粒通过所述磁场保留在所述容器内。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.29 US 62/272,5851.一种从流体中分离磁性颗粒的方法,所述方法包括:通过柔性容器的入口,将流体混合物引入到所述容器的内部隔室中,所述流体混合物包括液体介质、生物组分和磁性颗粒;允许所述流体混合物的至少一部分围绕形成在所述内部隔室内的分隔区行进,并且然后通过所述容器的出口离开所述内部隔室;和将磁场施加到所述内部隔室中的所述流体混合物,使得在所述介质和所述生物组分从所述入口、围绕所述分隔区向所述出口流动时,所述磁性颗粒通过所述磁场保留在所述容器内。2.根据权利要求1所述的方法,其中所述生物组分包括细胞。3.根据权利要求2所述的方法,其中所述细胞包括活化和/或扩增的人类T细胞,所述磁性颗粒包括惰性、超顺磁性珠粒,所述珠粒具有偶联到其的抗CD3和/或抗CD28抗体,所述珠粒任选地具有约4.5μm的大体上均匀的直径。4.根据权利要求2所述的方法,其中所述流体混合物包括在所述液体介质中生长的所述细胞的悬浮细胞培养物,所述流体混合物任选地从生物反应器流入所述容器的所述内部隔室中。5.根据权利要求1所述的方法,其中所述流体混合物以大于或等于约20mL/min至30mL/min的流动速率引入到所述内部隔室中。6.根据权利要求1所述的方法,其中所述流体混合物的通过所述出口离开所述内部隔室的部分每毫升所述液体介质包括小于5000、优选小于1000、更优选小于100、最优选小于20个所述磁性颗粒。7.根据权利要求1所述的方法,其进一步包括将所述容器安置在磁场生成装置上或磁场生成装置中,并且任选地将其盖子抵靠所述容器闭合,使得所述容器的至少一部分变平成大体上二维配置。8.根据权利要求1所述的方法,其中所述柔性容器包括在环绕周边处接合的上容器壁和下容器壁,所述分隔区包括所述上容器壁和所述下容器壁的接合部,所述分隔区从所述周边延伸到所述内部隔室中。9.根据权利要求8所述的方法,其中所述入口和所述出口各自延伸通过接合的周边。10.根据权利要求8所述的方法,其中所述分隔区包括在所述上容器壁和所述下容器壁之间的至少一个焊缝。11.根据权利要求8所述的方法,其进一步包括通过可逆地将所述上容器壁和所述下容器壁压在一起来形成所述分隔区,使得所述介质和所述生物组分围绕所述分隔区流动。12.根据权利要求1所述的方法,其中所述分隔区从安置在所述入口和所述出口之间并且靠近所述入口和所述出口的第一位置延伸到所述内部隔室内的第二位置,所述第二位置远离所述入口和所述出口,所述入口包括具有第一直径的第一开口,所述出口包括具有第二直径的第二开口,所述第一开口和所述第二开口与所述内部隔室流体连通,所述分隔区至少延伸超过所述第一开口第一距离到所述内部隔室中,所述第一距离为所述第一直径的至少一半并且小于所述第一直径的350倍。13.一种从流体中分离磁性颗粒的方法,其包括:通过安置在柔性容器的第一侧中的第一开口,将第一流体混合物引入到所述容器的内部隔室中,所述容器包括在环绕周边处接合的上容器壁和下容器壁,所述第一开口和第二开口各自包括延伸通过接合的周边的管状构件,所述容器的至少一部分安置在磁场生成装置上或磁场生成装置中,所述磁场生成装置在所述隔室的至少一部分内产生磁场,所述第一混合物包括液体介质、安置在所述液体介质中的第一量的磁性颗粒和以第一浓度安置在所述液体介质中的生物组分;和通过邻近所述第一开口安置在所述容器的所述第一侧中的第二开口,从所述隔室去除第二流体混合物,所述第二混合物包括所述液体介质和以第二浓度安置在所述液体介质中的所述生物组分,所述第二浓度大于所述第一浓度的90%,所述磁场将所述第一量的所述磁性颗粒的至少一部分保留在所述隔室中,所述隔室具有形成在其中的分隔区,所述分隔区包括所述上容器壁和所述下容器壁的接合部,所述分隔区具有在所述第一开口和所述第二开口之间从所述容器的所述第一侧延伸的密封的第一端部和安置在所述隔室内的第二位置处的与所述第一端部相对的第二端部,使得所述液体介质和所述生物组分必须从所述第一开口、围绕所述分隔区向所述第二开口穿过,以便从所述隔室中去除,所述第二流体每毫升所述液体介质包括小于5000个所...
【专利技术属性】
技术研发人员:L·诺德豪格,A·瓦雷拉罗黑那,N·D·琼斯,
申请(专利权)人:生命科技股份有限公司,生命科技联合股份有限公司,
类型:发明
国别省市:美国,US
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