一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸制造技术

本发明专利技术公开了一种氨基末端脑钠肽NT‑proBNP高效检测试纸，包括设在固定板上依次相连的样品垫(1)、金标垫(2)、冻干结合垫(7)硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)；所述硝酸纤维素膜(3)上设有检测线抗体(5)和质控线抗体(6)；所述金标垫(2)为羧化纤维素膜制成的垫，金标垫(2)设有金包银纳米金壳复合物，所述的样品垫(1)为玻璃纤维棉制成的垫，所述冻干结合垫(7)设有UCP颗粒标记的NT‑proBNP单抗。本发明专利技术的氨基末端脑钠肽NT‑proBNP高效检测试纸能够精准定量，结果易观察，灵敏度高，5分钟内就能判读结果，具有良好的稳定性和重复性。操作简便，无需特殊仪器设备。

An efficient detection paper for N-terminal pro brain natriuretic peptide NT-proBNP

The invention discloses an amino-terminal brain natriuretic peptide NT proBNP efficient detection test paper, which comprises a sample pad (1), a gold pad (2), a freeze-drying bonding pad (7), a nitrocellulose membrane (3) and an absorption pad (4), which are connected sequentially on a fixed plate, and the nitrocellulose membrane (3) is provided with a detection line antibody (5) and a quality control line antibody (6), and the gold pad (2). For the pad made of carboxylated cellulose membrane, the gold pad (2) is equipped with gold-coated silver nano-gold shell compound, the sample pad (1) is made of glass fiber cotton, and the freeze-drying bonding pad (7) is equipped with NT proBNP monoclonal antibody labeled with UCP particles. The amino-terminal brain natriuretic peptide NT proBNP high-efficiency detection test paper of the invention can accurately quantify, the result is easy to observe, the sensitivity is high, the result can be interpreted in 5 minutes, and has good stability and repeatability. The operation is simple and no special equipment is needed.

【技术实现步骤摘要】
一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸
本专利技术属于本专利技术涉及生物技术应用领域，具体地说是一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸。
技术介绍
心衰的典型症状，如呼吸急促、踝关节肿胀、疲劳等都不具特异性，有些病情轻微的患者也没有表现出典型症状，尤其是老年患者和肥胖患者，即使有这些症状也很难解释。因此，初级医疗机构仅依赖临床标准作为诊断依据，诊断心力衰竭的假阳性率可高达50％。目前诊断心衰最常用有效的方法主要有超声心动图、放射核素显像和心核磁共振检查；但是日常实际诊断左心室功能衰竭时，上述检查手段没有一项是可以完全信赖，并具有良好的重现性的。有研究显示，心衰患者NT-proBNP的升高水平与死亡率的上升及重入院的风险性密切相关。NT-proBNP升高是患者疗效的独立标志物，比左心室射血分数(LVEF)和VO2峰更有意义。在急性冠脉综合征患者中，检测NT-proBNP能预测心肌受损病人(有或没有ST段抬高)或不稳定性心绞痛病人的死亡危险性；此外，NT-proBNP还能预示发生心衰或进行性心衰的危险以及发生心梗或再发生心梗的危险。因此，NT-proBNP能用于鉴别患者是否需要加强治疗，并跟踪检测具有高死亡或重入院风险性的患者，以此来对心衰患者进行危险分级。有大量资料表明，NT-proBNP可用于指导心衰的治疗。大剂量的药物治疗心衰后，血清或血浆的NT-proBNP水平会下降，以NT-proBNP水平来指导药物治疗，不仅减少了心血管事件的总发生数，而且与临床知道治疗方案相比，延迟了首次发生心血管事件的时间。因此，依据NT-proBNP水平指导临床治疗，是一项有效的心衰治疗措施。因此，应用我国自主研制的上转发光免疫分析技术平台开发氨基末端脑钠肽前体NT-proBNP快速检测试剂并应用于临床POCT领域具有重要临床应用价值。现有的检测试纸存在检测灵敏度降低，且检测速度偏慢的技术问题。
技术实现思路
专利技术目的：针对现有技术中存在的不足，本专利技术的目的是提供一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸，使其具有操作简便、灵敏度高、结果稳定等优点。
技术实现思路
：本专利技术提供了一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸，包括设在固定板上依次相连的样品垫、金标垫、冻干结合垫硝酸纤维素膜和吸收垫；所述硝酸纤维素膜上设有检测线抗体和质控线抗体；所述金标垫为羧化纤维素膜制成的垫，金标垫设有金包银纳米金壳复合物，所述的样品垫为玻璃纤维棉制成的垫，所述冻干结合垫设有UCP颗粒标记的NT-proBNP单抗。进一步地，所述冻干结合垫经过裁剪。进一步地，所述冻干层设在金标垫下方。上述的氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸的制备方法，包括以下步骤：(1)纳米金壳溶液的制备；(2)显色抗体的金标记；(3)冻干结合垫的制备：将10mlUCP标记物悬浊液，10000rpm，4℃，离心50min，弃上清；加入20ml的冻干液；将UCP标记物悬浊液加于玻璃纤维上；最后真空冻干；(4)硝酸纤维素膜预处理和备用；(5)检测线制备；(6)质控线制备；(7)试纸条装配。有益效果：本专利技术的氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸能够精准定量，结果易观察，灵敏度高，5分钟内就能判读结果，具有良好的稳定性和重复性。操作简便，无需特殊仪器设备。附图说明图1是试纸条的结构示意图。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术做进一步的说明。一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸，包括设在固定板上依次相连的样品垫(1)、金标垫(2)、冻干结合垫(7)硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)；所述硝酸纤维素膜(3)上设有检测线抗体(5)和质控线抗体(6)；所述金标垫(2)为羧化纤维素膜制成的垫，金标垫(2)设有金包银纳米金壳复合物，所述的样品垫(1)为玻璃纤维棉制成的垫，所述冻干结合垫(7)设有UCP颗粒标记的NT-proBNP单抗。所述冻干结合垫(7)经过裁剪。所述冻干层设在金标垫下方。上述的氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸的制备方法，包括以下步骤：(1)纳米金壳溶液的制备：以柠檬酸三钠为稳定剂和还原剂，制备单分散的银纳米颗粒作为“种子”：在60℃的水浴下将85mL去离子水加热至恒温，加入30mL1％(wt)的柠檬酸三钠溶液，搅拌均匀，加入1.4mL10mg/mL的AgNO3溶液，剧烈搅拌下加入3mL1％NaHB4溶液，然后持续加热和搅拌1h，室温冷却后定容至100mL；(2)显色抗体的金标记：调节纳米金壳溶液pH8.0～8.5，加入显色抗体与纳米金壳溶液反应，离心得沉淀，重悬沉淀，得金标抗体溶液；(3)冻干结合垫的制备：将10mlUCP标记物悬浊液，10000rpm，4℃，离心50min，弃上清；加入20ml的冻干液；将UCP标记物悬浊液加于玻璃纤维上；最后真空冻干；(4)硝酸纤维素膜预处理和备用；(5)检测线制备：取1株抗人H-FABP单克隆抗体BT01做检测线抗体，以缓冲液稀释为2mg/mL；用划膜仪将抗体划在硝酸纤维素膜上，浓度为1ul/cm形成检测线，真空干燥；(6)质控线制备：羊抗鼠IgG用缓冲液(20％海藻糖，8％甲醇)稀释为0.8mg/mL；用划膜仪将抗体划在硝酸纤维素膜上，浓度为0.7ul/cm形成质控线，真空干燥；(7)试纸条装配。以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出：对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氨基末端脑钠肽NT‑proBNP高效检测试纸，其特征在于：包括设在固定板上依次相连的样品垫(1)、金标垫(2)、冻干结合垫(7)硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)；所述硝酸纤维素膜(3)上设有检测线抗体(5)和质控线抗体(6)；所述金标垫(2)为羧化纤维素膜制成的垫，金标垫(2)设有金包银纳米金壳复合物，所述的样品垫(1)为玻璃纤维棉制成的垫，所述冻干结合垫(7)设有UCP颗粒标记的NT‑proBNP单抗。

【技术特征摘要】
1.一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸，其特征在于：包括设在固定板上依次相连的样品垫(1)、金标垫(2)、冻干结合垫(7)硝酸纤维素膜(3)和吸收垫(4)；所述硝酸纤维素膜(3)上设有检测线抗体(5)和质控线抗体(6)；所述金标垫(2)为羧化纤维素膜制成的垫，金标垫(2)设有金包银纳米金壳复合物，所述的样品垫(1)为玻璃纤维棉制成的垫，所述冻干结合垫(7)设有UCP颗粒标记的NT-proBNP单抗。2.一种氨基末端脑钠肽NT-proBNP高效检测试纸，其特征在于：所述冻干结合垫(7)经过裁剪。...

【专利技术属性】
技术研发人员：韩兴贵，
申请(专利权)人：韩兴贵，
类型：发明
国别省市：江苏,32