一种瘦肉精的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种瘦肉精的检测方法，属于食品安全检测领域，解决了检测卡误差大的问题。其包括以下步骤：步骤一，将肉类样品剪碎，装入离心管中，拧紧管盖；步骤二，将离心管放入升温至100℃的水浴锅中加热10‑15min，使样品熟透并产生浸出液；步骤三，将浸出液加入反应瓶中，向反应瓶中加入有机溶剂萃取，除去有机相，得到浸提液；步骤四，打开快速检测卡包装袋，取出吸管吸取PBST缓冲液加入干净的试管中，然后甩尽吸管内的残留液，用此吸管吸取浸提液，加入装有PBST缓冲液的试管中，充分混合，得到混合液；步骤五，将检测卡平放于台面上，用吸管吸取混合液，垂直滴加于加样孔中反应3‑5min后读取测试结果。本发明专利技术检测准确度高、误差小。

A method for detection of Clenbuterol

The invention discloses a detection method of clenbuterol, which belongs to the field of food safety detection and solves the problem of large error of the detection card. It includes the following steps: first, cut the meat sample, put it into the centrifugal tube and tighten the cap; second, heat the centrifugal tube in a water bath pot heated to 100 C for 10 to 15 minutes to make the sample ripe and produce leachate; third, add the leachate to the reaction bottle and add organic solvent extraction to the reaction bottle; Remove the organic phase and get the extract; Step 4, open the packaging bag of the fast detection card, take out the pipette to absorb the PBST buffer and add it to the clean test tube, then throw the residual liquid in the suction tube, use the pipette to absorb the extract, add it to the test tube containing the PBST buffer, mix it sufficiently, and get the mixed liquid; Step 5, the test will be carried out. The card is placed flat on the table, the mixed liquid is absorbed by a suction tube, and the test results are read after 3_5 minutes of reaction with vertical droplets in the sampling hole. The invention has high detection accuracy and small error.

【技术实现步骤摘要】
一种瘦肉精的检测方法
本专利技术涉及食品安全检测
，更具体地说，它涉及一种瘦肉精的检测方法。
技术介绍
瘦肉精的正式名称是盐酸克仑特罗，简称克仑特罗，又名克喘素、氨哮素、氨必妥、氨双氯喘通。为白色结晶状粉末，味略苦。瘦肉精是一类药物的统称，主要是肾上腺类、β激动剂、β-兴奋剂(β-agonist)，用于治疗支气管哮喘、慢性支气管炎和肺气肿等疾病。大剂量用在饲料中可以促进猪的增长，减少脂肪含量，提高瘦肉率，但食用含有瘦肉精的猪肉对人体有害。现有的检测方法有高效液相色谱法(HPLC)、液相色谱-质谱联用法(LC-MS)、气象色谱-质谱联用法(GC-MS)、免疫分析法(ELISA)、胶体金免疫检测试纸条(DIGFA)和毛细管电泳(EC)等。目前，食品行业主要检测瘦肉精中的克伦特罗、沙丁胺醇、莱克多巴胺三种物质。上述检测方法对生鲜肉及肉制品样品的处理时间较长，食品行业常采用瘦肉精快速检测卡，其步骤如下：1、测试前将未开封的检测卡恢复至室温。2、将瘦肉或内脏样本剪碎，装入1.5ml离心管中，盖紧管盖。放入沸水浴中加热5分钟以上使有液汁浸出，取出离心管放至室温。3、从铝箔袋中取出检测卡(在一小时内使用)。将检测卡平放于台面，用塑料吸管垂直滴加1滴无气泡的样本渗出液(约20-30ul)于加样孔，30秒后再加入展开液2-3滴(约60-80ul)。4、反应10min后，展开区出现紫色条带为阴性结果，无条带者为阳性结果。采用瘦肉精快速检测卡测试时未对样品做前处理，样品中的脂肪会导致假阳性结果，从而导致检测结果不准确、误差大。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种瘦肉精的检测方法，通过前处理除去脂肪，以解决上述问题，其具有准确度高、误差小的优点。为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：一种瘦肉精的检测方法，包括以下步骤：步骤一，将肉类样品剪碎，装入离心管中，拧紧管盖；步骤二，将离心管放入升温至100℃的水浴锅中加热10-15min，使样品熟透并产生浸出液，冷却至常温，将离心管内的样品过滤除去固形物，得到浸出液；步骤三，将浸出液加入反应瓶中，向反应瓶中加入有机溶剂萃取，瘦肉精微溶或不能溶解于所述有机溶剂，脂肪能溶解于所述有机溶剂，超声处理3-5min，使反应瓶中的溶液静置分层，除去有机相，得到浸提液；步骤四，打开快速检测卡包装袋，取出吸管吸取PBST缓冲液加入干净的试管中，然后甩尽吸管内的残留液，用此吸管吸取浸提液，加入装有PBST缓冲液的试管中，充分混合，得到混合液；步骤五，从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放于台面上，用吸管吸取混合液，垂直滴加于加样孔中反应3-5min后读取测试结果。通过采用上述技术方案，采用特殊的有机溶剂对浸出液进行萃取，脂肪能溶解于有机溶剂，瘦肉精微溶或不能溶解于有机溶剂，从而将瘦肉精和脂肪分离开，避免脂肪导致假阳性结果，提高准确度，降低误差。进一步优选为，所述步骤三中的有机溶剂选自乙醚、苯、氯仿中的任意一种。通过采用上述技术方案，乙醚、苯、氯仿均能溶解脂肪，瘦肉精微溶于乙醚，不溶于苯和氯仿，从而能够较好的分离瘦肉精和脂肪，避免瘦肉精的损失。进一步优选为，所述步骤三中的浸出液与有机溶剂的体积比为1:0.2-0.5。通过采用上述技术方案，有机溶剂太少，脂肪难以溶解完全，有机溶剂太多，一方面造成浪费，另一方面，有机溶剂采用乙醚时，会溶解微量的瘦肉精，影响检测结果，因此，浸出液与有机溶剂的体积比优选为1:0.2-0.5。进一步优选为，所述步骤三具体包括：将浸出液加入反应瓶中，向反应瓶中加入有机溶剂萃取，瘦肉精微溶或不能溶解于所述有机溶剂，脂肪能溶解于所述有机溶剂，超声处理3-5min，使反应瓶中的溶液静置分层，除去有机相，得到浸提液，将浸提液加入反应瓶中，再加入等量的有机溶剂，重复上述萃取步骤2-3次，合并浸提液。通过采用上述技术方案，多次萃取能够降低浸出液中脂肪的残留量，但是萃取次数太多容易导致瘦肉精的损失，影响检测精度，因此，优选为2-3次。进一步优选为，所述步骤一中肉类样品剪碎后的粒径为0.5-1.5mm。通过采用上述技术方案，有利于瘦肉精从样品中浸出。进一步优选为，所述步骤四具体包括：打开快速检测卡包装袋，取出吸管吸取10滴PBST缓冲液加入干净的试管中，然后甩尽吸管内的残留液，用此吸管吸取10滴浸提液，加入装有PBST缓冲液的试管中，充分混合，得到混合液。进一步优选为，所述步骤五具体包括：从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放于台面上，用吸管吸取混合液，垂直滴加3滴于加样孔中反应3-5min后读取测试结果。通过采用上述技术方案，混合液加入过多会稀释反应后的颜色，混合液加入过少不足以使反应显色，因此优选为滴加3滴。综上所述，与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：(1)本专利技术通过采用有机溶剂对浸出液进行萃取，脂肪能溶解于有机溶剂，瘦肉精微溶或不能溶解于有机溶剂，从而将瘦肉精和脂肪分离开，避免脂肪导致假阳性结果，提高准确度，降低误差；(2)本专利技术通过多次萃取、控制有机溶剂的用量，降低瘦肉精的损失，提高检测精度。附图说明图1为本专利技术的工艺流程图。具体实施方式下面结合附图和实施例，对本专利技术进行详细描述。实施例1：如图1所示，一种瘦肉精的检测方法，包括以下步骤：步骤一，将肉类样品剪碎，肉类样品剪碎后的粒径为0.5mm，装入离心管中，拧紧管盖；步骤二，将离心管放入升温至100℃的水浴锅中加热10min，使样品熟透并产生浸出液，冷却至常温，将离心管内的样品过滤除去固形物，得到浸出液；步骤三，将浸出液加入反应瓶中，向反应瓶中加入有机溶剂萃取，浸出液与有机溶剂的体积比为1:0.2，瘦肉精微溶或不能溶解于所述有机溶剂，脂肪能溶解于所述有机溶剂，超声处理3min，使反应瓶中的溶液静置分层，除去有机相，得到浸提液；步骤四，打开快速检测卡包装袋，取出吸管吸取10滴PBST缓冲液加入干净的试管中，然后甩尽吸管内的残留液，用此吸管吸取10滴浸提液，加入装有PBST缓冲液的试管中，充分混合，得到混合液；步骤五，从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放于台面上，用吸管吸取混合液，垂直滴加3滴于加样孔中反应3min后读取测试结果；其中，有机溶剂是乙醚；PBST缓冲液的配制方法如下：将5毫升的10倍的PBS缓冲液、490毫升的蒸馏水、5毫升的聚乙二醇辛基苯基醚(TritonX-100)混合均匀即可。实施例2：一种瘦肉精的检测方法，与实施例1的不同之处在于，有机溶剂是苯。实施例3：一种瘦肉精的检测方法，与实施例1的不同之处在于，有机溶剂是氯仿。实施例4：一种瘦肉精的检测方法，与实施例1的不同之处在于，步骤三中浸出液与有机溶剂的体积比为1:0.35。实施例5：一种瘦肉精的检测方法，与实施例1的不同之处在于，步骤三中浸出液与有机溶剂的体积比为1:0.5。实施例6：一种瘦肉精的检测方法，与实施例1的不同之处在于，步骤三具体包括：将浸出液加入反应瓶中，向反应瓶中加入有机溶剂萃取，浸出液与有机溶剂的体积比为1:0.2，瘦肉精微溶或不能溶解于所述有机溶剂，脂肪能溶解于所述有机溶剂，超声处理3-5min，使反应瓶中的溶液静置分层，除去有机相，得到浸提液，将浸提液加入反应瓶中，再加入等量的有机溶剂，重复上述萃取步骤2次，合本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种瘦肉精的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，将肉类样品剪碎，装入离心管中，拧紧管盖；步骤二，将离心管放入升温至100℃的水浴锅中加热10‑15min，使样品熟透并产生浸出液，冷却至常温，将离心管内的样品过滤除去固形物，得到浸出液；步骤三，将浸出液加入反应瓶中，向反应瓶中加入有机溶剂萃取，瘦肉精微溶或不能溶解于所述有机溶剂，脂肪能溶解于所述有机溶剂，超声处理3‑5min，使反应瓶中的溶液静置分层，除去有机相，得到浸提液；步骤四，打开快速检测卡包装袋，取出吸管吸取PBST缓冲液加入干净的试管中，然后甩尽吸管内的残留液，用此吸管吸取浸提液，加入装有PBST缓冲液的试管中，充分混合，得到混合液；步骤五，从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放于台面上，用吸管吸取混合液，垂直滴加于加样孔中反应3‑5min后读取测试结果。

【技术特征摘要】
1.一种瘦肉精的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，将肉类样品剪碎，装入离心管中，拧紧管盖；步骤二，将离心管放入升温至100℃的水浴锅中加热10-15min，使样品熟透并产生浸出液，冷却至常温，将离心管内的样品过滤除去固形物，得到浸出液；步骤三，将浸出液加入反应瓶中，向反应瓶中加入有机溶剂萃取，瘦肉精微溶或不能溶解于所述有机溶剂，脂肪能溶解于所述有机溶剂，超声处理3-5min，使反应瓶中的溶液静置分层，除去有机相，得到浸提液；步骤四，打开快速检测卡包装袋，取出吸管吸取PBST缓冲液加入干净的试管中，然后甩尽吸管内的残留液，用此吸管吸取浸提液，加入装有PBST缓冲液的试管中，充分混合，得到混合液；步骤五，从包装袋中取出检测卡，将检测卡平放于台面上，用吸管吸取混合液，垂直滴加于加样孔中反应3-5min后读取测试结果。2.根据权利要求1所述的瘦肉精的检测方法，其特征在于，所述步骤三中的有机溶剂选自乙醚、苯、氯仿中的任意一种。3.根据权利要求1所述的瘦肉精的检测方法，其特征在于，所述步骤三中的浸出液与有机溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：侯庭武，
申请(专利权)人：上海老盛昌配送有限公司，
类型：发明
国别省市：上海,31