Hyaluronic acid (HA) is a large polysaccharide composed of glucuronic acid and glucosamine, which is a disaccharide structure. HA has been widely used in clinical treatment, biomaterials and cosmetics industry. Liposomes are formulations similar to microcapsules. Drugs or other active ingredients carried by liposomes are easy to enter the cuticle and form drug storehouses in the epidermis and dermis. Drugs continue to exert their efficacy, which has become a research hotspot in dermatological drug treatment and cosmetics. Each substance has its own characteristic and fixed absorption spectrum curve. According to the absorbance of some characteristic wavelength in the absorption spectrum, the content of the substance can be distinguished or determined. Because the matrix components of HA liposomes contain phospholipids and cholesterol, the direct detection of HA content will cause interference, so the invention establishes a simple and fast method for detecting HA content in HA liposomes by ultraviolet fingerprint. The invention is characterized by simple operation, simple equipment, no organic reagent and other demulsification.
【技术实现步骤摘要】
一种透明质酸脂质体紫外指纹图谱方法测定透明质酸含量
本专利技术涉及到一种透明质酸脂质体含量的紫外指纹图谱检测方法测定透明质酸含量。
技术介绍
透明质酸(hyaluronicacid,HA)是由两个双糖单位(D-葡萄糖醛酸及N-乙酰葡糖胺)重复聚合组成的大型多糖类物质,广泛存在于动物和人体结缔组织细胞外基质中。HA具有良好的保湿性、润滑性、黏弹性、非免疫原性和生物相容性,广泛应用于临床治疗、诊断、生物材料(眼科手术辅助剂、预防腹腔粘连、治疗关节疾病等)以及化妆品(保湿、防皱)行业。脂质体是一种类似微型胶囊的剂型,以磷脂与胆固醇作为骨架物质,将药物包封于类脂双分子层形成的薄膜中间所制成的超微型球状体,是对机体无毒性作用、无免疫原性及易实现靶向性的纳米载体。以脂质体作为载体的药物或其他功效成分易进入角质层,在表皮和真皮内形成药物储库,药物可持续发挥功效,现已成为皮肤病药物治疗和化妆品的研究热点。目前脂质体定性定量分析指标主要粒径测定、磷脂含量测定、包封率测定、体内分布测定等。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质有其特有的、固定的吸收光谱曲线,根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低可判别或测定该物质的含量。由于HA脂质体中脂质体骨架成分含有磷脂和胆固醇等,对HA含量的直接检测会造成干扰,所以本专利申请的方法建立了一种简单、快速的HA脂质体紫外指纹图谱检测方法检测其中HA的含量,无论是对化妆品行业和制药行业以及生物材料行业、还是对实验室HA脂质体缓释模型的快速检测都有着重要意义。本专利技术的原 ...
【技术保护点】
1.一种涉及到紫外全波长透明质酸(hyaluronic acid,HA)指纹图谱方法检测HA脂质体中HA含量。每种物质有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的存在和含量。由于HA脂质体中脂质体骨架成分含有磷脂和胆固醇等,对HA含量的直接检测会造成干扰,所以本专利技术基于HA特有的双糖结构单位,通过紫外的强穿透能力直接对HA脂质体进行全波长扫描,建立了HA脂质体的紫外全波长HA指纹图谱检测方法(无需有机试剂等破乳),步骤如下:A.准备工作:a.HA标准溶液制备:称取适量医用级HA,加入双蒸水稀释,配制成10mg/mL。b.HA脂质体标准品制备:称取2.0g磷脂、0.4g吐温80、0.4g胆固醇、10g乙醇于烧杯中,加入转子于磁力搅拌器上搅拌均匀,直至磷脂全部溶解。将此磷脂溶液经注射器匀速、快速注入预热至50℃的上述HA标准溶液中,搅拌直至乙醇除尽。通过高压均质机对脂质体混悬液反复均质,Malvern Zetasizer Nano ZS90检测脂质体粒径。c.空白脂质体对照制备:步骤如上所述,配制磷脂溶液,将此磷脂溶液经注射器匀速、快 ...
【技术特征摘要】
1.一种涉及到紫外全波长透明质酸(hyaluronicacid,HA)指纹图谱方法检测HA脂质体中HA含量。每种物质有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的存在和含量。由于HA脂质体中脂质体骨架成分含有磷脂和胆固醇等,对HA含量的直接检测会造成干扰,所以本发明基于HA特有的双糖结构单位,通过紫外的强穿透能力直接对HA脂质体进行全波长扫描,建立了HA脂质体的紫外全波长HA指纹图谱检测方法(无需有机试剂等破乳),步骤如下:A.准备工作:a.HA标准溶液制备:称取适量医用级HA,加入双蒸水稀释,配制成10mg/mL。b.HA脂质体标准品制备:称取2.0g磷脂、0.4g吐温80、0.4g胆固醇、10g乙醇于烧杯中,加入转子于磁力搅拌器上搅拌均匀,直至磷脂全部溶解。将此磷脂溶液经注射器匀速、快速注入预热至50℃的上述HA标准溶液中,搅拌直至乙醇除尽。通过高压均质机对脂质体混悬液反复均质,MalvernZetasizerNanoZS90检测脂质体粒径。c.空白脂质体对照制备:步骤如上所述,配制磷脂溶液,将此磷脂溶液经注射器匀速、快速注入预热至50℃的...
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