一种血铝的标准物质及应用制造技术

本发明专利技术涉及血铝检测技术领域，具体涉及一种血铝的标准物质及应用，是按照如下方法制备的：将Al(mal)3溶液腹腔注射至大鼠体内，隔日定时经腹腔注射90天后从大鼠体内取血置于抗凝或不抗凝采血管中，离心取上清液，并将上清液冷冻干燥成粉末，然后对粉末进行定值得到血铝标准物质；标准物质最后定值为48.495µg/L，扩展不确定度5.072µg/L；本发明专利技术的血铝标准物质，以鼠血作为基体，成本低廉，易于获得，互通性好，定值结果可靠；复溶性良好，达到标准要求，将铝溶液注射于大鼠体内，并取大鼠血液制备血铝的标准物质，可模拟血铝的存在形式，可全程对方法学进行质控，尽可能的平衡及监控基质效应对标准物质定值的影响。

A standard substance for blood aluminum and its application

The invention relates to the technical field of blood aluminium detection, in particular to a standard substance of blood aluminium and its application. It is prepared according to the following methods: intraperitoneal injection of Al(mal)3 solution into rats, regular intraperitoneal injection 90 days after the next day, blood is taken from rats and placed in anticoagulant or non-anticoagulant blood vessels, supernatant is centrifuged and supernatant is extracted. The certified reference material for blood aluminium can be obtained by freeze-drying the clear liquid into powder, then determining the value of the powder; the final certified reference material is 48.495 g/L, and the expanded uncertainty is 5.072 g/L; the certified reference material for blood aluminium of the present invention is based on rat blood, with low cost, easy access, good interoperability and reliable value setting results; and the certified reference material for blood aluminium of the present invention has good resolvability. To meet the requirements of the standard, the aluminium solution was injected into the rat body and the blood of the rat was taken to prepare the standard substance of blood aluminium, which could simulate the existing form of blood aluminium, control the quality of the method throughout, balance as far as possible and monitor the effect of matrix effect on the standard substance.

【技术实现步骤摘要】
一种血铝的标准物质及应用
本专利技术涉及血铝检测
，具体涉及一种血铝的标准物质及应用。
技术介绍
铝普遍存在于自然界，是地壳中最为丰富的元素之一，约占地壳的8.8％，因此人们与铝的接触非常广泛。在上个世纪70年代以前，普遍认为铝不能被人体吸收，无急慢性毒性，广泛用于食品添加剂、药物、容器等。但是随着研究深入以及不断有铝致毒性的报道，发现铝可扰乱生物体内的代谢作用，长期缓慢对人类健康造成危害，其中最为引人注目的是铝对神经系统的毒性作用。长期接触铝可以引起学习记忆功能减退、认知功能障碍等痴呆症状，被认为与阿尔兹海默病等老年性神经退行性疾病有关。因此，血中铝浓度的检测，作为最简单、直观监测铝接触对人体影响的生化指标，可在预防、诊断、治疗相关疾病中起到重要的作用。而在血铝的检测中，标准物质起到非常重要的作用，它可以评价方法的准确度、精确度，同时在浓度赋值、校正等方面起到重要的参考作用。目前在血铝的检测中用到的标准物质，为市面上销售的没有加血基质的铝的标准液，这种标准物质只能对仪器检测相关的方法评价及数值校正起到作用，并不能对血液前期处理等步骤进行全程监测。
技术实现思路
本专利技术为解决目前没有加血基质的铝的标准液而研制，这种标准物质不仅能对仪器检测相关的方法评价及数值校正起到作用，还能对血液前期处理等步骤进行全程监测的问题，从而提供一种血铝的标准物质及应用。为解决上述技术问题，本专利技术所采用的技术方案为：一种血铝的标准物质，是按照如下方法制备的：将Al(mal)3溶液腹腔注射至大鼠体内，隔日定时经腹腔注射90天后从大鼠体内取血置于抗凝或者不抗凝采血管中，离心取上清液，并将上清液冷冻干燥成粉末，然后对粉末进行定值，得到血铝标准物质；所述Al(mal)3溶液是AlCl3·6H2O和麦芽酚两种溶液等摩尔浓度等体积混合配制成的浓度为40mmol/L的Al(mal)3溶液。从大鼠体内取血制备血铝标准物质，与采用人血作为基质相比，老鼠血具有获得方便，影响因素单一，质量可保证等优势。将铝溶液注射于大鼠体内，并取大鼠血液为血铝的标准物质，完全模拟血铝的存在形式，可用于对血铝的检测的全程对方法学进行质控，尽可能低的减少基质效应对标准物质定值的影响。进一步的，所述腹腔注射是将Al(mal)3溶液按照1.62μM/kg的浓度剂量来注射到大鼠体内，隔日定时经腹腔注射90天，建立铝染毒亚慢性模型。进一步的，所述大鼠为无特定病原体级健康雄性成年SD大鼠，体重190±10g且活动能力相近，大鼠全营养饲料及自来水喂养，动物房按照昼夜节律自然采光，室温控制在22℃～24℃，湿度控制在40％～60％。进一步的，取血是从大鼠腹主动脉抽取血液，每只大鼠10ml置于抗凝或不抗凝采血管中，上清液是将大鼠体内取出的血液用离心机13600g离心15min后取上层清液而获得。进一步的，冷冻干燥的步骤为先将上清液分装后在-20℃冰箱或冷冻机中预冻，之后将冻结完全的上清液迅速装入冻干机中干燥架上进行冷冻干燥，结束后放入5ml塑料小瓶并密封。进一步的，采用电感耦合等离子体质谱检测法进行定值，包括如下步骤：(1)粉末样品复溶：分析天平称取1.000g粉末于5ml去离子离心管内，加1ml去离子水稀释成溶液；(2)前处理：将步骤(1)的溶液加1ml含1％Triton的4％硝酸稀释液，盖好盖子后封口膜密封以防硝酸挥发，涡旋混合器充分混匀后于常温放置24h。结束后13600g离心15min，上清液用0.22μm微孔过滤器过滤，过滤至2mL去离子离心管内得待测的稀释血样；(3)标准溶液制备：取铝标准溶液(100μg/mL)，用去离子水倍比稀释，制备0、1、5、10、20、40、80、160μg/L的系列标准溶液，上机检测，制备标准曲线；(4)将步骤(2)待测的稀释血样及试剂空白上机检测并由标准曲线得到稀释血样中铝的浓度；(5)采用如下公式标定标准物质中铝的浓度：C＝2(c-c0)式中：C——血中铝的浓度，单位为微克每升(μg/L)；c——由线性回归方程得到的稀释血样中铝的浓度，单位为微克每升(μg/L)；c0——由线性回归方程得到的试剂空白中铝的浓度，单位为微克每升(μg/L)；2——样品稀释倍数。采用电感耦合等离子体质谱检测法对血铝浓度进行检测，该仪器灵敏度高、准确度高、检测限低，使得定值结果更精确。将上述血铝的标准物质，应用在血铝的检测中，可应用在血液前处理过程平衡及监测血液基质效应对浓度测定的影响，应用在评价血铝检测方法的准确度、精密度中，应用在血中铝浓度赋值中。上述血铝的标准物质可应用在公共卫生及临床领域包括：职业铝人群相关疾病预防及监测、临床认知行为相关疾病筛查、治疗方案评估等。与现有技术相比本专利技术具有以下有益效果：本专利技术的血铝标准物质，以鼠的血液作为基体，成本低廉，易于获得，互通性好，定值结果可靠。血液复溶性良好，扩展不确定度为5.072μg/L，达到标准要求，为合格制品。将铝溶液注射于大鼠体内，并取大鼠血液为血铝的标准物质，完全模拟血铝的存在形式，可全程对方法学进行质控，尽可能低的减少基质效应对标准物质定值的影响。采用电感耦合等离子体质谱检测法对血铝浓度进行检测，该仪器灵敏度高、准确度高、检测限低，使得定值结果更精确。因此，本专利技术血铝标准物质在职业预防、环境监测等需要对血铝进行监测的领域有着广阔的应用前景。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术作进一步说明。下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径获得。下述实施例中使用的仪器、试剂等如下：1、仪器1.1NexIONTM300D型电感耦合等离子体质谱检测仪1.2LABCONCO型冷冻干燥仪1.3Milli-Q净化水装置1.4Eppendorfreference移液器1.5S200S型电子天平(美国Sartorius)1.6离心机2、试剂2.1去离子水(电阻值≥18.2MΩ)2.2三氯化铝(结晶)(AlCl3·6H2O，纯度98.0％，美国sigma-aldrich公司)2.3麦芽酚(美国sigma-aldrich公司)2.4分析纯硝酸(纯度100％，天津化学试剂厂)2.5铝标准溶液：国家标准物质GBW(E)080179(铝：100μg/mL)3、耗材去离子离心管去离子枪尖5ml一次性注射器0.22μm微孔过滤器4、溶液配制AlCl3·6H2O配制方法：取4.856g溶于200ml生理盐水，浓度为80mmol/L，取100ml加入生理盐水100ml，此时为40mmol/L。麦芽酚铝溶液配制：6.048g溶于200mlPBS中，浓度为240mmol/L，取出100ml加入PBS100ml，此时浓度为120mmol/L，再将中浓度取33.3ml加入PBS66.7ml，此时浓度为40mmol/L。Al(mal)3溶液配制：将配置好的AlCl3·6H2O及麦芽酚两种溶液等体积混合配制成浓度为40mmol/L的Al(mal)3溶液，并用孔径为0.22μm滤膜对其进行抽滤。用20％的NaOH调pH值至7.4左右。4％硝酸溶液配制：用移液器取浓硝酸溶液(体积分数65％)4ml置于盛少量超纯离子水的100ml容量瓶中，边加边摇匀，之后继续加超纯离子水本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血铝的标准物质，其特征在于，是按照如下方法制备的：将Al(mal)3溶液腹腔注射至大鼠体内，隔日定时经腹腔注射90天后从大鼠体内取血置于采血管中，离心取上清液，并将上清液冷冻干燥成粉末，然后对粉末进行定值，得到血铝标准物质；所述Al(mal)3溶液是 AlCl3·6H2O 和麦芽酚两种溶液等摩尔浓度等体积混合配制成的浓度为 40mmol/L 的 Al(mal)3 溶液。

【技术特征摘要】
1.一种血铝的标准物质，其特征在于，是按照如下方法制备的：将Al(mal)3溶液腹腔注射至大鼠体内，隔日定时经腹腔注射90天后从大鼠体内取血置于采血管中，离心取上清液，并将上清液冷冻干燥成粉末，然后对粉末进行定值，得到血铝标准物质；所述Al(mal)3溶液是AlCl3·6H2O和麦芽酚两种溶液等摩尔浓度等体积混合配制成的浓度为40mmol/L的Al(mal)3溶液。2.根据权利要求1所述的一种血铝的标准物质，其特征在于，所述腹腔注射是将Al(mal)3溶液按照1.62μM/kg的浓度剂量来注射到大鼠体内。3.根据权利要求1所述的一种血铝的标准物质，其特征在于，所述大鼠为无特定病原体级健康雄性成年SD大鼠，体重190±10g，大鼠全营养饲料及自来水喂养，动物房按照昼夜节律自然采光，室温控制在22℃~24℃，湿度控制在40%~60%。4.根据权利要求1所述的一种血铝的标准物质，其特征在于，取血是从大鼠腹主动脉抽取血液，每只大鼠10ml置于抗凝或不抗凝的采血管中，上清液是将大鼠体内取出的血液用离心机13600g离心15min后取上层清液而获得。5.根据权利要求1所述的一种血铝的标准物质，其特征在于，冷冻干燥的步骤为先将上清液分装后在-20℃冰箱或冷冻机中预冻，之后将冻结完全的上清液迅速装入冻干机中干燥架上进行冷冻干燥，结束后放入5ml塑料小瓶并密封。6.根据权利要求1所述的一种血铝的标准物质，其特征在于，采用电感耦合等离子体质谱检测法进行定值，包括如下...

【专利技术属性】
技术研发人员：张勤丽，尚楠，牛侨，王硕，王姗姗，
申请(专利权)人：山西医科大学，
类型：发明
国别省市：山西,14