菌株及其应用制造技术

本发明专利技术涉及微生物领域，特别涉及菌株及其应用。该菌株的26s D1‑D2区具有如I、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一项：I、具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；Ⅱ、具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。实验表明，该菌株具有优良的降解柠檬酸和/或苹果酸的能力以及发酵果酒的性能。

Strain and its application

The invention relates to the field of microorganisms, in particular to strains and their applications. The 26S D1_D2 region of the strain has any nucleotide sequence as shown in I and I I: I, with the nucleotide sequence as shown in SEQ ID NO.1; I I, with the nucleotide sequence as shown in SEQ ID NO.1 modified, replaced, deleted or added one or more bases. Experiments showed that the strain had excellent ability to degrade citric acid and/or malic acid and ferment fruit wine.

【技术实现步骤摘要】
菌株及其应用
本专利技术涉及微生物领域，特别涉及菌株及其应用。
技术介绍
随着我国人民生活水平的提高，果酒越来越受到消费者的认可。果酒质量受多种因素的影响，其中，酸度是影响果酒质量一个至关重要的因素。适量的酸度可以很好的平衡甜味和苦味，但过量的酸则会形成酒味酸涩、酒体粗糙等现象。猕猴桃是我国主要的鲜食水果，广泛种植于我国四川、陕西、河南、河北等地。由于其富含维生素C和抗氧化成分，被冠以“水果之王”称号。研究结果显示，柠檬酸是猕猴桃中主要的有机酸，占总酸含量的60％～80％，是影响猕猴桃果酒质量的一个重要因素。在猕猴桃发酵过程中，柠檬酸含量基本保持不变，且发酵结束后，总酸含量较高。目前，猕猴桃果酒降酸技术主要采用苹果酸-乳酸发酵，主要工艺参照葡萄酒酿造工艺。酒酒球菌(Oenococcusoeni)主要用于降解苹果酸，但其降酸效果不明显。猕猴桃果酒中主要有机酸是柠檬酸，因此，猕猴桃果酒降酸处理关键在于柠檬酸。柠檬酸(3-羟基-1,3,5-戊三酸)是三羧酸循环中的主要中间代谢产物，是三元羧酸。有研究表明，酿酒酵母可以在以一元羧酸为唯一碳源的培养基上代谢生长，但不能在以二元羧酸和三元羧酸的培养基上代谢生长，而有些非酿酒酵母可以在以柠檬酸循环中间代谢物为唯一碳源的培养基上代谢生长，如异常汉逊酵母(Hansenulaanomala)，圆球假丝酵母(Candidasphaerica)和产朊假丝酵母(Candidautilis)。王立芳等在分别以柠檬酸和苹果酸为唯一碳源的培养基上，筛选出一株可以降解苹果酸和柠檬酸的酵母菌，鉴定为陆生伊萨酵母(Issatchenkiaterricola)，但其发酵特性尚未见相关报导。胡小露等筛选出一株锁掷酵母属菌YAN1可将蓝莓酒中柠檬酸含量由1.1440g/L降低到0.5971g/L，但未进行酸含量较高的果酒的酿造。除柠檬酸外，苹果酸亦是许多果酒发酵中的主要有机酸。果酒降酸处理关键不仅在于柠檬酸，同时也在于苹果酸。苹果酸(2-羟基丁二酸)是三羧酸循环中的主要中间代谢产物(Etienneetal.,2013；Yoshidaetal.,2012)，是二元羧酸。医学研究表明：葡萄的营养很高，而以葡萄为原料的葡萄酒也蕴藏了多种氨基酸、矿物质和维生素，这些物质都是人体必须补充和吸收的营养品。已知的葡萄酒中含有的对人体有益的成分大约就有600种。葡萄酒的营养价值由此也得到了广泛的认可。据专家介绍：树龄在25岁以上的葡萄树树根在地下土壤里扎根很深，相对摄取的矿物质微量元素也多，以这种果实酿造出来的葡萄酒最具营养价值。葡萄酒是具有多种营养成分的高级饮料。适度饮用葡萄酒能直接对人体的神经系统产生作用，提高肌肉的张度。除此之外，葡萄酒中含有多种氨基酸、矿物质和维生素等，能直接被人体吸收。因此葡萄酒能对维持和调节人体的生理机能起到良好的作用，尤其对身体虚弱、患有睡眠障碍者及老年人的效果更好。但目前葡萄酒的发酵存在发酵产量低、品质不高的情况。因此，提供降解柠檬酸并应用于酸含量较高的果酒发酵的优良菌株具有重要的现实意义。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了菌株及其应用。该菌株具有较好的降解柠檬酸和/或苹果酸的能力，具有果酒发酵应用潜力。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了菌株，其26sD1-D2区具有如I、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一项：I、具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列；Ⅱ、具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。在本专利技术的一些具体实施方案中，对核苷酸序列的修饰成倍扩增。在本专利技术的一些具体实施方案中，对核苷酸序列的取代为取代1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、44个、45个、46个、47个、48个、49个或50个碱基。在本专利技术的一些具体实施方案中，核苷酸序列的缺失为缺失1个、2个、3个、4个、、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、44个、45个、46个、47个、48个、49个或50个碱基。在本专利技术的一些具体实施方案中，对核苷酸序列的添加为添加1个、2个、3个、4个、5个、6个、7个、8个、9个、10个、11个、12个、13个、14个、15个、16个、17个、18个、19个、20个、21个、22个、23个、24个、25个、26个、27个、28个、29个、30个、31个、32个、33个、34个、35个、36个、37个、38个、39个、40个、41个、42个、43个、44个、45个、46个、47个、48个、49个或50个碱基。在本专利技术的一些具体实施方案中，本专利技术提供的菌株为东方伊萨酵母(I.orientalis)在本专利技术的一些具体实施方案中，本专利技术提供的菌株的保藏编号为CGMCCNO.14647。本专利技术还提供了上述的菌株在降解柠檬酸和/或苹果酸中的应用。本专利技术还提供了上述的菌株在制备琥珀酸中的应用。本专利技术还提供了上述的菌株在果酒发酵中的应用。在本专利技术的一些具体实施方案中，果酒为猕猴桃果酒或葡萄酒；葡萄酒为赤霞珠干红葡萄酒。本专利技术还提供了一种用于柠檬酸和/或苹果酸的组合物，包括上述的菌株。本专利技术还提供了一种用于降解柠檬酸和/或苹果酸的方法，取上述菌株或上述柠檬酸和/或苹果酸降解物与原料混合发酵。本专利技术还提供了一种制备琥珀酸的组合物，包括上述的菌株。本专利技术还提供了一种制备琥珀酸的方法，取上述菌株或上述柠檬酸和/或苹果酸降解物与原料混合发酵。本专利技术还提供了一种用于果酒发酵的组合物，包括上述菌株。果酒为猕猴桃果酒或葡萄酒；葡萄酒为赤霞珠干红葡萄酒。本专利技术还提供了一种果酒的发酵方法，取上述菌株或上述柠檬酸和/或苹果酸降解物与原料混合发酵。果酒为猕猴桃果酒或葡萄酒；葡萄酒为赤霞珠干红葡萄酒。本专利技术提供了菌株，其26sD1-D2区具有如I、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一项：I、具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列；Ⅱ、具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。本专利技术获得的菌株具有如下效果：(1)通过对130株酵母菌在柠檬酸培养基和YPD-柠檬酸培养基中进行降酸能力筛选，共得到8株非酿酒酵母可以有效的降解柠檬酸，分别为M100、M130、B9S-2、B6-1、B4-19、GS1-1、GS1-20和M1-1。8株酵母菌在含1％柠檬酸的柠檬酸培养基和含2％葡萄糖及1％柠檬酸的YPD-柠檬酸培养基中，柠檬酸降解率均高于20％。(2)对8株筛选菌株进行发酵性能及有机酸测定，结果显示，除对照菌株NX11424外，所有试验菌株均表现出优良的降酸能力和发酵性能本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.菌株，其特征在于，其26s D1‑D2区具有如I、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一项：I、具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；Ⅱ、具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。

【技术特征摘要】
1.菌株，其特征在于，其26sD1-D2区具有如I、Ⅱ所示的核苷酸序列中任意一项：I、具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列；Ⅱ、具有SEQIDNO.1所示的核苷酸序列经修饰、取代、缺失或添加一个或多个碱基获得的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的菌株，其特征在于，其为东方伊萨酵母(I.orientalis)。3.根据权利要求1或2所述的菌株，其特征在于，其保藏编号为CGMCCNO.14647。4.根据权利要求1至3任一项所述的菌株在降解柠檬酸和/或苹果酸中的应用。5.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘延琳，宋育阳，叶冬青，秦义，李莹，杜青，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61