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一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用技术

技术编号:19383711 阅读:2 留言:0更新日期:2018-11-10 00:11
一种吡咯‑罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用,属于有机合成领域。所述的吡咯‑罗丹明酰腙衍生物的制备方法包括如下步骤:S1:将N‑(2‑吗啉‑4‑乙基)‑5‑甲酰基‑2,4‑二甲基‑1H‑吡咯‑3‑甲酰胺加入有机溶剂中溶解,再加入罗丹明6G酰肼,得混合物;S2:将S1所得混合物在常压下进行回流搅拌反应;S3:反应结束后,冷却至室温,有固体析出,减压过滤,取滤渣;S4:将S3所得滤渣进行洗涤,得到吡咯‑罗丹明酰腙衍生物。本发明专利技术的吡咯‑罗丹明酰腙衍生物能选择性的与二价铜离子作用,由蓝色荧光变为绿色荧光,具有比率荧光效应,可实现裸眼辨别检测,特别是作为荧光探针在细胞溶酶体内二价铜离子的方便检测的应用。

Pyrrole Luo Danming hydrazone derivative and preparation method and application thereof

A pyrrole Luo Danming acylhydrazone derivative and its preparation method and application belong to the field of organic synthesis. The preparation method of the pyrrole-rhodamine acylhydrazone derivative comprises the following steps: S1: adding N(2 morpholine-4 ethyl)5 formyl-2,4 dimethyl-1 H_pyrrole-3_formamide into organic solvent, dissolving it, adding rhodamine-6 G acylhydrazine, and obtaining the mixture; S2: recycling the mixture obtained by S1 under atmospheric pressure. Flow stirring reaction; S3: After the reaction, cooling to room temperature, solid precipitation, vacuum filtration, filter residue; S4: S3 filter residue was washed to obtain pyrrole-rhodamine hydrazone derivatives. The pyrrole-rhodamine acylhydrazone derivative of the present invention can selectively interact with divalent copper ions, change from blue fluorescence to green fluorescence, has ratio fluorescence effect, and can realize naked eye discrimination detection, especially as a fluorescent probe for convenient detection of divalent copper ions in cell lysosome.

【技术实现步骤摘要】
一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用
本专利技术属于有机合成
,具体涉及一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用。
技术介绍
荧光传感器是监测阳离子,阴离子和小分子的强大工具,主要由于其具有高灵敏度,简便的操作以及实时和在线检测的优点。铜是所有生物体维持正常生存所必需的微量营养素,也是人体中第三丰富的过渡金属。过量的二价铜离子主要是通过溶酶体-胆汁途径排泄到胆汁中,引起人体神经退行性疾病,如威尔森氏病,门克斯病和阿尔茨海默氏病。此外,一些铜转运蛋白定位于溶酶体中以促进细胞对铜的吸收。鉴于二价铜离子在人体内的作用,开发可用于检测亚细胞中特别是溶酶体中的二价铜离子荧光探针非常重要。此外,现有二价铜离子荧光探针多为单纯依赖荧光强度的“off-on”或“on-off”荧光探针,容易受到诸如设备效率、环境条件及探针浓度等因素的影响,限制了其进一步应用。相比之下,比率荧光探针信号参量为两个不同波长处的荧光发射强度的比值,能够消除上述因素影响而备受关注。但能够靶向溶酶体的二价铜离子比率荧光探针寥寥无几。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术的不足而提供一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物及其制备方法和应用,该吡咯-罗丹明酰腙衍生物在作为荧光探针检测二价铜离子时具有较高的灵敏度和较强的选择性,并可用于癌细胞溶酶体中二价铜离子的比率荧光检测。基于上述目的,本专利技术采用如下技术方案:一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物,其结构式如下:上述化合物的合成路线如下:上述吡咯-罗丹明酰腙衍生物的制备方法,包括如下步骤:S1:将N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺加入有机溶剂中溶解,再加入罗丹明6G酰肼,得混合物;S2:将S1所得混合物在常压下进行回流搅拌反应;S3:反应结束后,冷却至室温,有固体析出,减压过滤,取滤渣;S4:将S3所得滤渣进行洗涤,得到吡咯-罗丹明酰腙衍生物。更进一步地,步骤S1中所述有机溶剂为乙醇。更进一步地,所述乙醇为无水乙醇或体积浓度为95%的乙醇。更进一步地,步骤S2中所述回流搅拌反应的时间为3h。更进一步地,步骤S4中,用无水乙醇洗涤S3所得滤渣。更进一步地,步骤S1中加入的将N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺和罗丹明6G酰肼的摩尔比为1:1。更进一步地,步骤S1中每0.3L有机溶剂中加入0.01mol的N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺。本专利技术还提供所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物作为荧光探针在测定水中二价铜离子的应用。在测定水中二价铜离子时,不仅定性,还可以定量检测出二价铜离子的浓度。所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物作为荧光探针在测定水中二价铜离子的应用,步骤如下:将所述吡咯-罗丹明酰腙衍生物加入CH3CN和羟乙基哌嗪乙硫磺酸(HEPES)缓冲溶液(pH=5.0)的混合介质中,配制成摩尔浓度为1×10-5mol/L的荧光探针溶液,分别在含摩尔浓度为3×10-5mol/L的Ag+,Al3+,Ca2+,Cd2+,Co2+,Cr3+,Cu2+,Fe3+,Hg2+,K+,Mg2+,Mn2+,Na+,Ni2+,Pb2+和Zn2+的金属离子的溶液中加入等体积的上述荧光探针溶液,分别进行荧光光谱分析,其中,所述混合介质中CH3CN和HEPES缓冲溶液的体积比为8︰2。基于吡咯-罗丹明酰腙衍生物通常情况下能够与二价铜离子形成稳定的配合物,加入二价铜离子会出现比率荧光信号,故吡咯-罗丹明酰腙衍生物具有较好的二价铜离子识别性能。同时由于溶酶体定位基吗啉的引入,使得探针能够实现细胞溶酶体中二价铜离子的检测。即所述吡咯-罗丹明酰腙衍生物可用于制备定性检测细胞溶酶体中二价铜离子的检测剂。本专利技术与现有技术相比,具有以下有益效果:本专利技术通过用缩合反应制备吡咯-罗丹明酰腙衍生物荧光探针,合成方法简单,原料易得,在多种常见金属离子中,对二价铜离子表现出较高的选择性比率荧光识别性能。探针溶液中加入二价铜离子,荧光颜色由青色变为绿色,具有比率荧光效应,可实现裸眼辨别检测,具有快速、简便、灵敏度高、选择性强的特点,以及广泛的潜在应用价值。附图说明图1为本专利技术实施例1制得的荧光探针乙醇合物的晶体结构图;图2为本专利技术实施例1制得的荧光探针的核磁共振氢谱图;图3为本专利技术实施例1制得的荧光探针的质谱谱图;图4为本专利技术实施例1制得的荧光探针(1×10-5mol/L)的CH3CN/HEPES(8/2,v/v)溶液(图4中的1)中加入不同金属离子(Ag+,Al3+,Ca2+,Cd2+,Co2+,Cr3+,Cu2+,Fe3+,Hg2+,K+,Mg2+,Mn2+,Na+,Ni2+,Pb2+,Zn2+,3×10-5mol/L)的荧光光谱图;图5为本专利技术实施例1制得的荧光探针的CH3CN/HEPES(8/2,v/v)溶液(1×10-5mol/L)滴定不同浓度Cu2+的荧光光谱图;图6在Hela细胞中,荧光探针与二价铜离子及商用溶酶体定位染料LysoTrackerRed的荧光成像图;Hela细胞用1×10-5mol/L荧光探针及商用溶酶体定位染料LysoTrackerRed培育30分钟后加入2×10-5mol/L二价铜离子,继续培育30分钟后使用OlympusFV500-IX70激光共聚焦显微镜进行荧光成像;荧光探针+LysoTrackerRed共染:a为蓝色通道荧光成像图;b为绿色通道荧光成像图;c为LysoTrackerRed红色通道荧光成像图;d为蓝色通道,绿色通道和红色通道叠加图;e为明场图;f为明场图和荧光图叠加图;荧光探针+Cu2++LysoTrackerRed共染:g为蓝色通道荧光成像图;h绿色通道荧光成像图;i为LysoTrackerRed红色通道荧光成像图;j为蓝色通道,绿色通道和红色通道叠加图;k为明场图;l为明场图和荧光图叠加图;m为荧光探针横跨HeLa细胞线性区域的蓝色通道强度与LysTraseRed红色通道强度的重叠图;n为荧光探针与二价铜离子作用后横跨HeLa细胞线性区域的绿色通道强度与LysTraseRed红色通道强度的重叠图。具体实施方式下面通过具体实施方式对本专利技术作进一步详细说明,但本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本专利技术,而不应视为限定本专利技术的范围。实施例1吡咯-罗丹明酰腙衍生物的合成:将N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺(279mg,1mmol)加入到含罗丹明6G酰肼(428mg,1mmol)的无水乙醇(30mL)中,加热回流3小时,然后将其冷却至室温,冷却至室温后,减压抽滤,用无水乙醇洗涤滤饼,然后在空气中干燥,得到白色固体,即为目标产物,收率72%。采用单晶衍射确定了吡咯-罗丹明酰腙衍生物乙醇合物的晶体结构,具体见图1。对制得的吡咯-罗丹明酰腙衍生物进行核磁共振分析,具体核磁图谱见图2,图2分析结果如下:1HNMR(400MHz,DMSO-d6),δ(ppm):11.09(s,1H,NH-吡咯),8.00(s,1H,CH=N),7.85-7.87(dd,1H,Ar-H),7.52-7.55(m,2H,Ar-H),7.10-7.13(t,1H,本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种吡咯‑罗丹明酰腙衍生物, 其特征在于,结构式如下:

【技术特征摘要】
1.一种吡咯-罗丹明酰腙衍生物,其特征在于,结构式如下:。2.权利要求1所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1:将N-(2-吗啉-4-乙基)-5-甲酰基-2,4-二甲基-1H-吡咯-3-甲酰胺加入有机溶剂中溶解,再加入罗丹明6G酰肼,得混合物;S2:将S1所得混合物在常压下进行回流搅拌反应;S3:反应结束后,冷却至室温,有固体析出,减压过滤,取滤渣;S4:将S3所得滤渣进行洗涤,得到吡咯-罗丹明酰腙衍生物。3.根据权利要求2所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物的制备方法,其特征在于,步骤S1中所述有机溶剂为乙醇。4.根据权利要求3所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物的制备方法,其特征在于,所述乙醇为无水乙醇或体积浓度为95%的乙醇。5.根据权利要求2所述的吡咯-罗丹明酰腙衍生物的制备方法,其特征在于,步骤S2中所述回...

【专利技术属性】
技术研发人员:许志红王阳王元罗文峰雷萌萌周起航
申请(专利权)人:许昌学院
类型:发明
国别省市:河南,41

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