一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法技术

技术编号:19383561 阅读:2 留言:0更新日期:2018-11-10 00:08
本发明专利技术涉及一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法,它包括以下步骤:(a)将化合物A溶于四氢呋喃,降温至≤0℃;随后加入烯丙醇、三苯基膦以及偶氮二甲酸二乙酯进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于二氯甲烷中,加入Grubbs 1

A concise synthesis method of eight membered ring labeling of E olefins in biological orthogonal experiment

The present invention relates to a simple synthesis method of the bio-orthogonal experimental E-type olefin octacyclic marker, which includes the following steps: (a) dissolving compound A in tetrahydrofuran and cooling it to <0 C; then adding allyl alcohol, triphenylphosphine and diethyl azodicarbonate for stirring reaction, and purifying compound II through column after concentration. (b) dissolve the compound II into dichloromethane and add Grubbs 1.

【技术实现步骤摘要】
一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法
本专利技术属于生物检测标记领域,涉及一种E型烯烃八元环,具体涉及一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法。
技术介绍
对活体生物大分子进行特异性标记是一项具有挑战性的工作,它要求这类化学反应能够在生理条件下高效特异地进行,不会与生物体系中存在的各种活性物质发生副反应。最近十几年开发的生物正交反应能够比较好地满足这些要求。它们在生物分子标记方面的应用拓展了科研工作者对细胞内生物体系的理解,即通过位点特异性引入生物正交官能团来进行选择性标记细胞内目标蛋白质以用于实现对细胞内生物体系的研究。E型烯烃八元环是上述选择性标记细胞内目标蛋白质的常用物质,因此有必要设计能够缩短E型烯烃八元环的反应路线以获得高产率的E型烯烃八元环。
技术实现思路
本专利技术目的是为了克服现有技术的不足而提供一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法。为达到上述目的,本专利技术采用的技术方案是:一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法,它包括以下步骤:(a)将化合物A溶于四氢呋喃,降温至≤0℃;随后加入烯丙醇、三苯基膦以及偶氮二甲酸二乙酯进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于二氯甲烷中,加入Grubbs1st催化剂进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物III;(c)将所述化合物III加入正庚烷中,随后加入间苯二甲酸二乙酯以及AgNO3/SiO2吸附剂,在280nmUV灯照射下进行反应,随后通过AgNO3/SiO2吸附硅胶柱层析纯化即可。优化地,步骤(a)中,所述偶氮二甲酸二乙酯以其甲苯溶液的形式加入,其浓度为30~50wt%。进一步地,步骤(c)中,反应后加入氨水进行分层,用乙醚提取有机相多次,无水硫酸钠干燥并浓缩得到粗品;将所述粗品通过AgNO3/SiO2吸附硅胶柱层析纯化。由于上述技术方案运用,本专利技术与现有技术相比具有下列优点:本专利技术生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法,通过采用特定的合成路线而只需要三步即可实现对E型烯烃八元环的合成,具有高的产率和纯度。附图说明附图1为本专利技术生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法的流程图。具体实施方式如图1所示的生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法,它包括以下步骤:(a)将化合物A溶于四氢呋喃,降温至≤0℃;随后加入烯丙醇、三苯基膦以及偶氮二甲酸二乙酯进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于二氯甲烷中,加入Grubbs1st催化剂进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物III;(c)将所述化合物III加入正庚烷中,随后加入间苯二甲酸二乙酯以及AgNO3/SiO2吸附剂,在280nmUV灯照射下进行反应,随后通过AgNO3/SiO2吸附硅胶柱层析纯化即可。通过采用特定的合成路线而只需要三步即可实现对E型烯烃八元环的合成,具有高的产率和纯度。步骤(a)中,上述偶氮二甲酸二乙酯以其甲苯溶液的形式加入(即加入偶氮二甲酸二乙酯溶液),其浓度优选为30~50wt%,以降低反应的激烈程度。步骤(c)中,反应后加入氨水进行分层,用乙醚提取有机相多次,无水硫酸钠干燥并浓缩得到粗品;将所述粗品通过AgNO3/SiO2吸附硅胶柱层析纯化,这样有利于提高产品的产率和纯度。下面将结合对本专利技术优选实施方案进行详细说明:实施例1本实施例提供一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法,它包括以下步骤:(a)在250mL的三口瓶中加入化合物A(7g,29.3mmol)和THF(100ml),使化合物A溶于THF(即四氢呋喃),降温至0℃;随后加入烯丙醇(2.73mL,32.2mmol)、三苯基膦(9.2g,35.1mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(DEAD)(16mL,40wt%甲苯溶液,35.1mmol),在室温下搅拌4小时,TLC显示反应完全;用水泵浓缩,过柱纯化得到4.8g化合物II(纯度为99.2%),核磁解析为:1HNMR(300MHz,CDCl3):δ7.70(d,J=8.1Hz,2H),7.30(d,J=8.1Hz,2H),5.85-5.66(m,2H),5.10-4.97(m,4H),3.21-3.11(m,4H),2.43(s,3H),2.43-2.26(m,2H),2.10-2.03(m,2H),1.74-1.63(m,2H);13CNMR(75MHz,CDCl3):143.0,137.4,136.9,134.7,129.6,127.1,117.0,115.2,47.9,47.8,33.3,30.7,27.8,21.4.IR(neat,cm–1):2928,1641,1598,1494,1455,1340,1157,1091,994,916,815,732,656.。化合物A的合成参考文献“Fluorine-18RadiolabelingandRadiopharmacologicalCharacterizationofaBenzodioxolylpyrimidine-basedRadiotracerTargetingtheReceptorTyrosineKinaseEphB4,ChemMedChem,7(11),1991-2003,S1991/1-S1991/14;2012”。(b)在1000mL的单口瓶中加入化合物II(1.7g,5.8mmol)和CH2Cl2(580mL),使化合物II溶于CH2Cl2;加入Grubbs1st催化剂(48mg,5.8×10-2mmol),在室温下搅拌36小时,TLC显示反应完全;用水泵浓缩,过柱纯化得到1.5g化合物III(纯度为99.5%);核磁解析为:1HNMR(300MHz,CDCl3):δ7.67(d,J=8.1Hz,2H),7.27(d,J=8.1Hz,2H),5.72-5.67(m,2H),3.16-3.06(m,4H),2.40(s,3H),2.30-2.21(m,4H),1.78-1.71(m,2H);13CNMR(75MHz,CDCl3):143.0,137.0,131.5,129.7,128.4,126.9,50.9,48.4,29.5,28.2,23.4,21.5.IR(neat,cm–1):3434,2934,1599,1494,1454,1334,1155,992,892,815,694,642.;(c)在100mL的三口瓶中,加入化合物III(265mg,1.0mmol)、正庚烷50mL、间苯二甲酸二乙酯(444mg,2.0mmol)以及1gAgNO3/SiO2吸附硅胶,在280nmUV灯照射下反应3天;反应液加入氨水50mL进行分层,有机相用乙醚提取2次;无水硫酸钠干燥,浓缩得到粗品;粗品再通过AgNO3/SiO2吸附硅胶柱层析纯化得到147mg化合物I(纯度为99.6%);核磁解析为:1HNMR(300MHz,CDCl3):δ7.72(d,J=8.1Hz,2H),7.32(d,J=8.1Hz,2H),5.65-5.53(m,2H),3.24-3.11(m,4H),2.42(s,3H),2.27-2.23(m,4H),1.79-1.74(m,2H);13CNMR(75MHz,CDCl3本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法,其特征在于,它包括以下步骤:(a)将化合物A溶于四氢呋喃,降温至≤0℃;随后加入烯丙醇、三苯基膦以及偶氮二甲酸二乙酯进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于二氯甲烷中,加入Grubbs 1st催化剂进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物III;(c)将所述化合物III加入正庚烷中,随后加入间苯二甲酸二乙酯以及AgNO3/SiO2吸附剂,在280 nm UV灯照射下进行反应,随后通过AgNO3/SiO2吸附硅胶柱层析纯化即可。

【技术特征摘要】
1.一种生物正交实验E型烯烃八元环标记物的简洁合成方法,其特征在于,它包括以下步骤:(a)将化合物A溶于四氢呋喃,降温至≤0℃;随后加入烯丙醇、三苯基膦以及偶氮二甲酸二乙酯进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于二氯甲烷中,加入Grubbs1st催化剂进行搅拌反应,浓缩后过柱纯化得化合物III;(c)将所述化合物III加入正庚烷中,随后加入间苯二甲酸二乙酯以及AgNO3/SiO2吸附剂,在280nmUV灯照射下进行反应...

【专利技术属性】
技术研发人员:倪润炎
申请(专利权)人:苏州金点生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏,32

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