秦皮素的抗真菌应用制造技术

技术编号:19377340 阅读:34 留言:0更新日期:2018-11-09 22:02
本发明专利技术公开的秦皮素的抗真菌应用,属于医药技术领域。本发明专利技术通过体外实验表明,秦皮素对真菌有较好的抑制效果,并能使抗真菌药物氟康唑恢复对耐药真菌的作用,因此秦皮素可用作抗真菌药物及抗真菌药物的增效剂。本发明专利技术为秦皮素开辟了新的用途,将其用于抗真菌药物及抗真菌药物的增效剂,不仅为真菌治疗提供了新的候选药物,而且提高了现有药物的抗真菌作用,在临床真菌耐药性日趋普遍、耐药程度日趋严重的情况下,使抗真菌药物恢复对耐药真菌的作用,降低了抗真菌药物的用药剂量,从而为患者节省了医疗费用,减少药物的毒副作用。

Antifungal application of Fraxinus

The antifungal application of Fraxinus is in the field of medicine technology. The present invention has good inhibition effect on fungi and can restore the effect of fluconazole on drug-resistant fungi. Therefore, Qinpi can be used as synergist of antifungal drugs and antifungal drugs. The invention opens up a new use for aesculin and applies it to antifungal drugs and synergists of antifungal drugs. It not only provides a new candidate drug for fungal treatment, but also improves the antifungal effect of existing drugs. Under the circumstances of increasing clinical fungal resistance and drug resistance, the antifungal drugs are made more and more serious. The effect of drug recovery on drug-resistant fungi reduces the dosage of antifungal drugs, thus saving medical expenses and reducing the toxicity and side effects of drugs.

【技术实现步骤摘要】
秦皮素的抗真菌应用
本专利技术属于医药
,具体涉及秦皮素的抗真菌应用。
技术介绍
秦皮素属于香豆素类化合物,是水犀、喜马白蜡树叶子里含有的有效成分之一。具有抗痢疾杆菌的作用,临床上用于治疗儿童急性菌痢。现代药理研究显示,秦皮素具有抗细菌、抗氧化、抗肿瘤、肝脏保护等药理作用,但是,国内外未见秦皮素抗真菌作用的报道,也未见秦皮素作为抗真菌药物增效剂,与抗真菌唑类药物联合使用治疗真菌病的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供秦皮素的抗真菌应用。本专利技术是通过以下技术方案来实现:本专利技术公开了秦皮素在制备抗真菌药物中的应用。优选地,所述真菌包括克柔念珠菌(ATCC2340)、光滑念珠菌(ATCC2281)、新生隐球菌(32609)和耐药白色念珠菌(103)。本专利技术公开了秦皮素在制备抗真菌药物增效剂中的应用。优选地,所述抗真菌药物为唑类药物。优选地,所述真菌包括克柔念珠菌(ATCC2340)、光滑念珠菌(ATCC2281)、新生隐球菌(32609)和耐药白色念珠菌(103)。本专利技术还公开了一种抗真菌药物,由秦皮素与可药用辅料制成;其中,秦皮素的MIC值为64μg/mL。优选地,所述的可药用辅料包括稳定剂、增溶剂、润滑剂和崩解剂中的一种或几种。本专利技术还公开了一种抗真菌药物,由秦皮素、唑类药物与可药用辅料制成;其中,唑类药物的MIC值为16μg/mL,秦皮素的MIC值为0.125μg/mL。优选地,所述唑类药物为咪唑类药物或三唑类药物。优选地,所述的可药用辅料包括稳定剂、增溶剂、润滑剂和崩解剂中的一种或几种。与现有技术相比,本专利技术具有以下有益的技术效果:本专利技术为秦皮素开辟了新的用途,将其用于制备抗真菌药物及抗真菌药物的增效剂,不仅为真菌治疗提供了新的候选药物,而且提高了现有药物的抗真菌作用,在临床真菌耐药性日趋普遍、耐药程度日趋严重的情况下,使抗真菌药物恢复对耐药真菌的作用,降低了抗真菌药物的用药剂量,从而为患者节省了医疗费用,减少药物的毒副作用。本专利技术通过体外细胞实验表明,秦皮素单独使用对光滑念珠菌、克柔念珠菌和新生隐球菌具有不同程度的抑制作用,当抗真菌药物氟康唑和秦皮素合用时,能明显降低抗真菌药物的用药剂量,并增强对耐药真菌的抑制作用,使抗真菌药物恢复对耐药真菌的作用。因此可将秦皮素用作抗真菌药物及抗真菌药物的增效剂。附图说明图1为不同浓度的秦皮素与氟康唑合用后对耐药白念珠菌103生长情况的影响图。具体实施方式下面结合具体的实施例对本专利技术做进一步的详细说明,所述是对本专利技术的解释而不是限定。一、秦皮素单独使用对不同真菌的作用1、试药秦皮素:购于成都德思特生物技术有限公司,纯度≥99%,批号DST170411-006。氟康唑(FLC)):sigma公司,批号036M4709V。二甲亚砜:天津市天力化学试剂有限公司。各试药置于-20℃保存。实验前,将药物取出置于35℃温箱融化,充分混匀,分别进行药效学检验。2、菌株使用的菌株,包括:1)敏感菌株:敏感白色念珠菌(SC5314)、近平滑念珠菌(22019)和新生隐球菌(32609);2)耐药菌株:耐药菌株:耐药白色念珠菌(103)、耐药热带念珠菌、天然耐药克柔念珠菌(ATCC2340)和天然耐药光滑念珠菌(ATCC2281)。以上均由上海长海医院真菌室提供,分别采自长海医院不同科室临床样本,并经形态学和生化学鉴定。所有实验用菌株均于沙堡葡萄糖琼脂培养基(SDA)划板活化,白念珠菌、热带念珠菌、新生隐球菌等球状菌于30℃培养2-3天后,分别挑取单克隆再次划板活化,取第二次所得单克隆置SDA斜面,用上述方法培养后于4℃保存备用。3、培养液/基1)RPMI1640液体培养液RPMI1640(GibcoBRL)10g,NaHCO32.0g,吗啡啉丙磺酸(Sigma)34.5g(0.165mol),加三蒸水900mL溶解,1mol/LNaOH调pH至7.0(25℃),三蒸水定容至1000mL,0.22μm微孔滤膜过滤除菌,分装后于4℃保存备用。2)沙堡葡萄糖琼脂固体培养基(SDA)蛋白胨10g,葡萄糖40g,琼脂18g,加三蒸水900mL溶解,加入2mg/mL氯霉素水溶液50mL,调整pH至7.0,以三蒸水定容至1000mL,高压灭菌(121℃,15min)后于4℃保存备用。3)YEPD培养液酵母浸膏10g,蛋白胨20g,葡萄糖20g,加三蒸水900mL溶解,加入2mg/mL氯霉素水溶液50mL,三蒸水定容至1000mL,高压灭菌(121℃,15min)后于4℃保存备用。4、仪器设备隔水式电热恒温培养箱(上海跃进医疗器械厂);THZ-82A台式恒温振荡器(上海跃进医疗器械厂);SW-CT-IF型超净化工作台(苏州安泰空气技术有限公司)。5、秦皮素和氟康唑贮备液将秦皮素和氟康唑分别用DMSO溶解,配成浓度6.4mg/mL,于-20℃保存备用。6、菌液制备实验前,用接种圈从4℃保存的SDA培养基上分别挑取白念珠菌、热带念珠菌、新生隐球菌各球状菌少量,分别接种至1mLYEPD培养液,于30℃,200rpm振荡培养,活化16h,使真菌处于指数生长期后期。然后将各菌液分别加至1mLYEPD培养液中,用上述方法再次活化,培养16h,用血细胞计数板计数,以RPMI1640培养液分别调整各菌液浓度至1×103~5×103CFU/mL。7、药敏板制备:各菌株分别取无菌96孔板一块,于每排1号孔加RPMI1640液体培养基100μL作空白对照;3~12号孔各加上述新鲜配制的菌液100μL;2号孔加菌液198μL;12号孔不含药物,只加菌液100μL作阳性生长对照。在每排的2号孔加母液浓度为6.4mg/mL的秦皮素或氟康唑各2μL。对2~11号孔进行10级倍比稀释,使各孔的最终秦皮素药物浓度分别为64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25和0.125μg/mL,氟康唑的药物浓度分别为64、32、16、8、4、2、1、0.5、0.25、0.125μg/mL。各孔中DMSO含量均低于1%。将各药敏板于30℃恒温箱培养。8.MIC值判定:在30℃恒温箱中,念珠菌培养24h,新生隐球菌培养72h,观察实验结果,并确定其MIC值。观察结束后,放回恒温培养箱中,继续培养。当药物的MIC值超过测定浓度范围时,按以下方法进行统计:MIC值高于最高浓度64μg/mL时,计为“>64μg/mL”;MIC值为最低浓度或在最低浓度以下时,不作区别,均计为“≤0.125μg/mL”。上述实验均平行操作3次,当MIC值能准确重复或只差一个浓度时才被接受,并以较高浓度作为MIC值;当MIC值相差两个浓度以上时,则需重新实验,直到符合要求为止。实验结果如下表1所示:表1秦皮素单独使用对各种真菌的MIC值(μg/mL)从表1可以看出,秦皮素单独作用各种真菌24h,对克柔念珠菌、光滑念珠菌和新生隐球菌的MIC值分别32μg/mL、4μg/mL和4μg/mL,药物作用48h后,对克柔念珠菌、光滑念珠菌和新生隐球菌的MIC值分别32μg/mL、8μg/mL和8μg/mL,这显示了秦皮素具有抗真菌作用。二、秦皮素与氟康唑合用对耐药白色念珠菌的作用所用药物、菌株及实验材料同上述所示。取无菌96孔板一块,于每排1本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.秦皮素在制备抗真菌药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.秦皮素在制备抗真菌药物中的应用。2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述真菌包括克柔念珠菌(ATCC2340)、光滑念珠菌(ATCC2281)、新生隐球菌(32609)和耐药白色念珠菌(103)。3.秦皮素在制备抗真菌药物增效剂中的应用。4.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述抗真菌药物为唑类药物。5.如权利要求3所述的应用,其特征在于,所述真菌包括克柔念珠菌(ATCC2340)、光滑念珠菌(ATCC2281)、新生隐球菌(32609)和耐药白色念珠菌(103)。6.一种抗真菌药物,其特征在于,由秦皮...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘伟乔欣悦张子悦
申请(专利权)人:陕西科技大学
类型:发明
国别省市:陕西,61

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