含有氨基酸的蛋白质制剂制造技术

本发明专利技术提供了一种稳定的药物制剂，其包括：曲妥珠单抗；用于稳定所述曲妥珠单抗的一种或多种氨基酸，其包含精氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、丝氨酸或L‑甘氨酸；以及用于降低所述制剂的粘度的一种或多种氨基酸，其包含脯氨酸；所述液体的粘度低于100cP。本发明专利技术还提供了一种稳定的药物制剂，其包括：利妥昔单抗；用于稳定所述利妥昔单抗的一种或多种氨基酸，其包含：精氨酸、组氨酸、甲硫氨酸、赖氨酸、丝氨酸和苯丙氨酸；以及用于降低所述制剂的粘度的一种或多种氨基酸，其包含苏氨酸、缬氨酸和脯氨酸；所述液体的粘度低于100cP。本发明专利技术还提供了包含所述制剂的试剂盒以及所述制剂的制药用途。

Protein preparations containing amino acids

The invention provides a stable pharmaceutical preparation, which comprises: trastuzumab; one or more amino acids used to stabilize the trastuzumab, including arginine, asparagine, lysine, valine, threonine, isoleucine, glutamic acid, serine or L -glycine; and for reducing the preparation. A viscosity or a variety of amino acids that contain proline; the viscosity of the liquid is less than 100cP. The invention also provides a stable pharmaceutical preparation, which comprises: rituximab; one or more amino acids for stabilizing the rituximab, including arginine, histidine, methionine, lysine, serine and phenylalanine; and one or more amino acids for reducing the viscosity of the preparation. The acid contains threonine, valine and proline, and the viscosity of the liquid is less than 100cP. The invention also provides a kit containing the preparation and pharmaceutical uses of the preparation.

【技术实现步骤摘要】
含有氨基酸的蛋白质制剂本申请是分案申请，其原申请的申请号为201280065515.9，申请日为2012年10月26日，专利技术名称为“含有氨基酸的蛋白质制剂”。
本专利技术一般涉及稳定的蛋白质制剂及其制备和用途。
技术介绍
药用蛋白质和多肽，以及其他生物药物，提出了难以处理的制剂的挑战。药用蛋白质通常不能口服给药，因为它们通过消化过程会降解。透皮给药一般也不适合蛋白质，因为它们太大而不能有效地穿过皮肤。肺部递送已经发展到这样的程度，即，已经将一种胰岛素产品引入到市场，但只获得有限的成功。因此，药用蛋白质通常通过注射施用；但是，配置用于注射的蛋白质也存在以下问题。在常见溶液中的蛋白质通常是不稳定的。从化学和物理两种角度来讲，蛋白质其易于降解，例如脱酰胺作用、聚集和沉淀。聚集、沉淀和粘度对于大多数蛋白质来说是特别不利的，特别是在高蛋白质浓度下。蛋白质通常在冷冻干燥时比它们在溶液中更稳定。然而，不便和病人依从性限制冻干药物产品的成功销售和液体制剂的偏爱。蛋白质通常不能在足够高的浓度下配制成有效量的注射。当蛋白质的溶解度和/或稳定性受到限制时，在较低的浓度下配制产品并通过静脉输注输递。然而，病人和制造商都在期望基于高浓度蛋白质的药物。一个原因是，能够实现将较小体积的液体给予个体。然而，增加蛋白质浓度可导致不利效应。高浓度和冷冻干燥的目标是不易理解的，部分原因是随着浓度增加而发生的有害的粘弹性和其它性质。有时，浓度增加，例如，增加了聚集或形成凝胶的倾向，以及增大了通过标准皮下注射器和针头结构施用这些溶液的难度。在一个实施例中，抗体和类似抗体的疗法是固有地难以聚集，可能在某种程度上是由于它们互补决定区的性质(“CDRs”，下面进一步讨论)。然而，对于治疗应用，抗体组合物在浓度超过100mg/ml或甚至200mg/ml是理想的。类似地，常用于治疗个体的高浓度的其它蛋白质也是需要的，例如，对这些个体，通过静脉内或皮下施用蛋白。开发可接受的高浓度的蛋白质制剂是特别有挑战性的，例如所需的注射剂。目前，许多蛋白质不能在溶液剂中以较高浓度稳定地配制。即使对于那些在相对高的浓度下已经配制成的溶液剂，溶液剂不稳定、经受聚集或沉淀，以及太粘而不能用于注射。因此，存在很多蛋白遭受次优制剂或根本不能有利地用于配制注射剂。因此，需要方法以制备改进的蛋白质制剂，以及用于这些制剂本身。在一个方面，需要的蛋白质制剂是稳定的，并且具有低粘度。在另一个方面，需要稳定的和具有低粘度的蛋白质制剂，用于施用高蛋白浓度的蛋白质治疗制剂。在又一方面，需要稳定的和具有低粘度的蛋白质，用于通过注射施用高蛋白浓度的液体蛋白质治疗制剂。此外，在这里还需要更好的系统的方法来开发这类制剂。
技术实现思路
现在已经发现，在蛋白质制剂中包含一个、两个或多个、不同的氨基酸提高了蛋白质的稳定性，即使蛋白质在常规配制剂中在高浓度下通常不稳定。虽然不想受任何理论的约束，但相信氨基酸会限制有害的粘弹性效应并增强蛋白质的稳定性。同样，尽管不想受任何理论限制，但认为，当蛋白质制剂中包括多于两个的氨基酸，氨基酸组合可以可逆地拮抗或闭塞蛋白质区域，这些区域参与蛋白质-蛋白质相互作用，从而竞争性地抑制这种蛋白质-蛋白质接触，并改善蛋白质稳定性以及降低制剂中的粘度。该实验性实施例证实了蛋白质制剂中的氨基酸的使用允许保持在稀释的溶液剂中发现的粘弹性，而无需诉诸改变蛋白质结构本身。因此，用本技术制备的蛋白质制剂是稳定的，甚至当蛋白质浓度是大于约130mg/ml、200mg/ml或甚至更高，而没有有害的粘弹性效应或稳定性受到损害。本文还描述了合适的氨基酸和氨基酸组合的筛选方法，提高蛋白质制剂的稳定性，使用基于相关的物理或生化标记的高通量筛选协议。因此，一个实施例提供了一种稳定的药物制剂，其包括蛋白质和氨基酸。在一些方面中，氨基酸不是H、R或M。另一个实施例提供了一种稳定的药物制剂，其包括蛋白质和两种不同的氨基酸。在一个方面中，两种不同的氨基酸不是H或R。在一个方面，两种不同氨基酸中的至少一种含有带正电荷的侧链。另一方面，至少一种两种不同氨基酸含有带负电荷的侧链。另一方面，两种不同氨基酸中的至少一种含有疏水侧链。在又一个方面，两种不同的氨基酸中的至少一种含有极性不带电的侧链。在其它方面，这些类型的氨基酸用于任意可能的排列和组合。在一个方面，两种不同的氨基酸中的一种包含极性不带电侧链，而另一个含有疏水侧链。在另一个方面中，两种不同的氨基酸中的一种含有极性不带电荷的侧链，并且另一种选自由G和P组成的组。同样，提供了稳定的蛋白质制剂，包括一种或多种蛋白质和两种或多种不同的氨基酸。在某些方面中，制剂包含三个、四个、五个、六个、七个、八个、九个、十个或甚至更多不同的氨基酸。在上述任一实施例中，每种氨基酸的浓度例如可以至少约为0.1mg/ml。在任何方面，一种或多种蛋白各自的存在浓度可以至少约为100mg/mL。在本文所述的制剂中配制的蛋白质可选自由以下组成的组：酶、细胞因子、神经营养因子、抗体、肽、激素、脱氧核糖核酸结合蛋白质、适体、红细胞生成素(EPO)、人胰岛素、干扰素-α(内含子A)、粒细胞集落刺激因子(G-CSF)、人生长激素、干扰素-β、重组乙型肝炎疫苗、葡糖脑苷脂酶、半乳糖苷酶、伊米苷酶、α-半乳糖苷酶A，和组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)。在一个方面，所述蛋白质是一种抗体，例如，但不局限于，雷珠单抗、贝伐单抗、西妥昔单抗、英夫利昔单抗、帕利珠单抗、阿昔单抗、阿仑单抗、喷替酸阿妥莫单抗、阿特利珠单抗、巴利昔单抗、达克珠单抗、依库珠单抗、莫罗单抗-CD3、那他珠单抗、奥法木单抗、帕尼单抗、利妥昔单抗、托珠单抗，和曲妥珠单抗。此外，也提供了制备和使用稳定的蛋白质制剂的方法。专利技术概述本专利技术的各方面公开一种稳定的药物制剂，其包括一种或多种氨基酸以在药物制剂中稳定蛋白质和一种或多种氨基酸以减小药物制剂的粘度。本专利技术的其它方面公开了一种制剂，其中第一氨基酸使蛋白质稳定，第二不同的氨基酸降低了蛋白质溶液的粘度，或者其中相同的氨基酸使蛋白质稳定并降低了蛋白质溶液的粘度。本专利技术的各方面公开了一种稳定的药物制剂，其中所述药物制剂包括两种或多种不同的氨基酸来稳定蛋白质。本专利技术的其它方面公开了一种稳定的药物制剂，其中药物制剂包括两种或多种不同氨基酸以减少药物制剂的粘度。本专利技术的其它方面公开了一种药物制剂，其包括两种或更多种不同的氨基酸以稳定药物制剂中的蛋白质，或者包括两种或多种不同的氨基酸以降低药物制剂的粘度，其中在药物制剂中稳定蛋白质的所述两种或多种不同的氨基酸是与减小药物制剂的粘度的两种或更多种不同的氨基酸相同的，其中药物制剂包括两种或更多种不同的氨基酸以稳定药物制剂中的蛋白质，或者，包括两种或更多种不同的氨基酸以降低药物制剂的粘度，其中，用来稳定药物制剂中的蛋白质的所述两种或更多种不同氨基酸不同于两种或更多种不同的氨基酸。本专利技术的各方面公开一种药物制剂，其中，所述稳定所述蛋白质的氨基酸选自G、S、T、A、R、M、K、P和N，以及，减小制剂粘度的氨基酸是脯氨酸或甘氨酸。本专利技术的其它方面公开了药物制剂，其中氨基酸的至少一种：(i)含有带正电荷的侧链，(ii)含有带负电荷的侧链，(iii)含有疏水侧链，或(iv)含有极本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种稳定的药物制剂，其包括：曲妥珠单抗；用于在所述制剂中稳定所述曲妥珠单抗的一种或多种氨基酸，其包含精氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、丝氨酸或L‑甘氨酸；以及用于降低所述制剂的粘度的一种或多种氨基酸，其包含脯氨酸；其中，所述液体的粘度低于100cP。

【技术特征摘要】
2011.10.28 US 61/552,6881.一种稳定的药物制剂，其包括：曲妥珠单抗；用于在所述制剂中稳定所述曲妥珠单抗的一种或多种氨基酸，其包含精氨酸、天冬酰胺、赖氨酸、缬氨酸、苏氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、丝氨酸或L-甘氨酸；以及用于降低所述制剂的粘度的一种或多种氨基酸，其包含脯氨酸；其中，所述液体的粘度低于100cP。2.一种稳定的药物制剂，其包括：利妥昔单抗；...

【专利技术属性】
技术研发人员：B·S·常，
申请(专利权)人：诚信生物公司，
类型：发明
国别省市：美国,US