The present invention discloses a DNA molecule expressing hairpin RNA inhibiting SPA gene and its application. The DNA molecule expressing hairpin RNA inhibiting SPA gene disclosed by the present invention is the DNA fragment shown in formula (I): SEQ forward X SEQ reverse (I); SEQ forward sequence is the sequence of SPA gene or any fragment thereof; SEQ reverse sequence is reverse complementary to SEQ forward sequence or more than 90% nucleotide complementary; X is SEQ forward and SEQ forward sequence. On the sequence, the reverse sequence between X and SEQ is not complementary to SEQ. Experiments show that the present invention transforms the DNA molecule expressing hairpin RNA inhibiting SPA gene into a plant, and obtains a genetically modified plant whose SPA gene expression is inhibited. The seed quality of the genetically modified plant has changed and can be used to change the seed quality.
【技术实现步骤摘要】
表达抑制SPA基因的发卡RNA的DNA分子及其应用
本专利技术涉及生物
中,表达抑制SPA基因的发卡RNA的DNA分子及其应用。
技术介绍
小麦是世界三大粮食作物之一,食物利用的主要形式是由水和储藏蛋白形成的具有独特弹性和延展性的面团。储藏蛋白由谷蛋白和醇溶蛋白构成,占面粉蛋白质的70-80%,是决定小麦品质优劣的主要因素。谷蛋白又可以分为高分子量谷蛋白亚基(highmolecularweightgluteninsubunit,HMW-GS)和低分子量谷蛋白亚基(lowmolecularweightgluteninsubunit,LMW-GS),两者能够依靠分子间二硫键形成一种独特的谷蛋白大聚体,HMW-GS呈链状组成聚合体骨架,LMW-GS呈簇状构成聚合体分枝。HMW-GS包括1Dy、1Dx、1By和1Bx亚基。醇溶蛋白则是一种单体蛋白,为面团提供延展性。蛋白质的组成及表达量对于改良小麦品质具有极为关键的作用。储藏蛋白的表达调控主要发生在转录水平,因此理解转录因子对蛋白的调控作用对于指导小麦品质遗传改良具有重要理论意义。SPA基因是一种属于opaque2亚家族的bZIP类转录因子。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何调控种子中储藏蛋白的含量。本专利技术首先提供了如式(I)所示的DNA片段:SEQ正向-X-SEQ反向(I)所述SEQ正向的序列为SPA基因的序列或其任意片段;所述SEQ反向的序列与所述SEQ正向的序列反向互补或有90%以上的核苷酸互补;所述X是所述SEQ正向与所述SEQ反向之间的间隔序列,在序列上,所述X与所述SEQ正向与所述 ...
【技术保护点】
1.如式(I)所示的DNA片段:SEQ正向‑X‑SEQ反向 (I)所述SEQ正向的序列为SPA基因的序列或其任意片段;所述SEQ反向的序列与所述SEQ正向的序列反向互补或有90%以上的核苷酸互补;所述X是所述SEQ正向与所述SEQ反向之间的间隔序列,在序列上,所述X与所述SEQ正向与所述SEQ反向均不互补。
【技术特征摘要】
1.如式(I)所示的DNA片段:SEQ正向-X-SEQ反向(I)所述SEQ正向的序列为SPA基因的序列或其任意片段;所述SEQ反向的序列与所述SEQ正向的序列反向互补或有90%以上的核苷酸互补;所述X是所述SEQ正向与所述SEQ反向之间的间隔序列,在序列上,所述X与所述SEQ正向与所述SEQ反向均不互补。2.根据权利要求1所述的DNA片段,其特征在于:所述SEQ正向的序列为如下a1)至a4)中的任一种:a1)序列表中序列1的第791-1242位;a2)在a1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列;a3)与a1)或a2)限定的单链DNA具有85%以上的同一性的序列;a4)在严格条件下与a1)或a2)限定的单链DNA杂交的序列;和/或,所述SEQ反向的序列为如下b1)至b4)中的任一种:b1)序列表中序列1的第2419-2870位;b2)在b1)的5′端和/或3′端添加一个或几个核苷酸得到的序列;b3)与b1)或b2)限定的单链DNA具有85%以上的同一性的序列;b4)在严格条件下与b1)或b2)限定的单链DNA杂交的序列;和/或,所述X的序列为含有FAD2基因的内含子的序列。3.根据权利要求1或2所述的DNA片段,其特征在于:所述FAD2基因的内含子的序列为序列1的第1270-2400位。4.根据权利要求1-3任一所述的DNA片段,其特征在于:所述DNA片段的核苷酸序列为序列表中序列1的第791-2870位。5.与权利要求1-4中任一所述DNA片段相关的生物材料,为下述B1)至B6)中的任一种:B1)含有权利要求1-4中任一所述DNA片段的表达盒;B2)含有B1)所述表达盒的重组载体;B3)含有B1)所述表达盒的重组微生物、或含有B2)所述重组载体的重组微生物;B4)含有B1)所述表达盒的转基因植物细胞系、或含有B2)所述重组载体的转基因植物细胞系;B5)含有B1)所述表达盒的转基因植物组织、或含有B2)所述重组载体的转基因植物组织;B6)含有B1)所述表达盒的转基因植物器官、或含有B2)所述重组载体的转基因植物器官。6.根据权利要求5所述的生物材料,其特征在于:B1)所述表达盒中,驱动所述DNA片段转录的启动子为胚乳特异性启动子;和/或,所述表达盒中终止所述DNA片段转录的终止子为NOS终止子。7.权利要求1-4中任一所述DNA片段编码得到的RNA分子。8.权利要求1-4中任一所述的DNA片段,或权利要...
【专利技术属性】
技术研发人员:李保云,郭丹丹,张玉峰,梁荣奇,尤明山,解超杰,
申请(专利权)人:中国农业大学,
类型:发明
国别省市:北京,11
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