The invention discloses a method for extracting and purifying astaxanthin from shrimp shells and crab shells by neutral protease. First, fresh shrimp shells or crab shells are crushed and prepared into an enzyme solution. The shrimp shells or crab shells are enzymatically hydrolyzed with the enzyme solution, solid and organic solvents are mixed, and astaxanthin is extracted under certain conditions, filtered, evaporated and dried. After the drying, astaxanthin was obtained, and the shrimp astaxanthin was qualitatively and quantitatively analyzed by HPLC. The astaxanthin yield of Arctic sweet shrimp shell was 145 ug/g, the purity of crude astaxanthin extract was 1.12 mg/g, and the astaxanthin content was 92% after purification. The yield of astaxanthin from crayfish shell was 294 ug/g, and the purity of crude astaxanthin extract was 2.06 mg/g. After purification, the purity of crude astaxanthin extract reached 95%. The invention has the advantages of low raw material price, mild reaction conditions, simple operation, easy popularization of production and environmental friendliness. This method not only can extract astaxanthin monomer quickly, but also has high extraction rate, stability and purity.
【技术实现步骤摘要】
一种利用中性蛋白酶提取纯化虾壳和蟹壳中虾青素的方法
本专利技术涉及一种提取虾青素单体的方法,具体涉及一种利用中性蛋白酶提取纯化虾壳和蟹壳中虾青素的方法。
技术介绍
虾青素(3,3′-二羟基-4,4′-二酮基-β,β′-胡萝卜素)广泛存在于生物界,特别是虾、蟹、鱼、藻体中含量较高,是海洋生物体内主要的类胡萝卜素之一。虾青素具有极强的抗氧化活性,是维生素E的500倍以上,并具有抗肿瘤、抗氧化和抗衰老等多重生理功效。不仅如此,虾青素对视力的改善和保护具有独特的效果,可预防和治疗年龄相关性黄斑退化,改善视网膜功能。此外,虾青素具有极强的清除自由基的能力,可预防癌症和心血管等疾病的发生以及帮助修复中枢神经系统。由此可知,虾青素在保健品、药品、食品和化妆品等领域具有广阔的应用前景。虾、蟹外壳主要来源于海产品加工厂虾、蟹的下脚料和餐桌的废弃物,来源不仅广泛,而且价格低廉。其中除了含有大量的甲壳素、脂肪、蛋白质外,还含有重要的红色类胡萝卜素——虾青素。目前虾壳多被用于饲料的加工或作为废弃物处理,从中提取虾青素,既能够对废弃物进行有效的处理,保护环境,同时能够带来巨大的经济效益,使其“变废为宝”。为了提高虾壳的经济价值,有人通过有机溶剂萃取法或超临界CO2提取法从虾壳中提取了虾青素,提取的虾青素可以应用于天然的食品色素、保健品、化妆品和药品等领域,具有巨大的经济潜力。然而,有机溶剂萃取法使用的有机溶剂量大,提取率低,生产成本高,且虾青素酯需要强碱水解成单体,对环境有较大的污染。超临界CO2提取法较为安全无毒害,但是设备要求较高,且需要较高的生产成本,较难在工业化生产中普及。 ...
【技术保护点】
1.一种利用中性蛋白酶提取纯化虾/蟹壳中虾青素的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)将新鲜或干燥的虾壳或蟹壳粉碎,作为原料;(2)将中性蛋白酶溶于水,原料在酶的水溶液中恒温进行酶解反应;酶解反应结束后,70℃灭活后离心,收集酶解后固体;(3)将固体与乙酸乙酯有机溶剂混匀,在40‑60℃条件下,通过超声或搅拌进行提取,收集提取液,浓缩,得到天然的虾青素粗提物;(4)将粗提物通过硅胶或大孔吸附树脂柱色谱,以石油醚和甲醇混合溶液为洗脱溶剂,进行分离纯化,得到虾青素的纯品,高效液相色谱测定,纯度为90%。
【技术特征摘要】
1.一种利用中性蛋白酶提取纯化虾/蟹壳中虾青素的方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:(1)将新鲜或干燥的虾壳或蟹壳粉碎,作为原料;(2)将中性蛋白酶溶于水,原料在酶的水溶液中恒温进行酶解反应;酶解反应结束后,70℃灭活后离心,收集酶解后固体;(3)将固体与乙酸乙酯有机溶剂混匀,在40-60℃条件下,通过超声或搅拌进行提取,收集提取液,浓缩,得到天然的虾青素粗提物;(4)将粗提物通过硅胶或大孔吸附树脂柱色谱,以石油醚和甲醇混合溶液为洗脱溶剂,进行分离纯化,得到虾青素的纯品,高效液相色谱测定,纯度为90%。2.根据权利要求1所述的利用中性蛋白酶提取纯化虾/蟹壳中虾青素的方法,其特征在于,在步骤(1)中,所述原料包括:阿根廷红虾虾壳、北极甜虾虾壳、克氏原螯虾虾壳、南极磷虾虾壳、梭子蟹蟹壳和闸蟹蟹壳中的一种或几种混合。3.根据权利要求1所述的利用中性蛋白酶提取纯化虾/蟹壳中虾青素的方法,其特征在于,在步骤(2)中,所述中性蛋白酶与底物的用量比为:1000-10000U/g;酶解反应的条件为:酶解温度35-55℃,酶解时间30-300min,酶解环境pH值5-8。4.根据权利要求1所述的...
【专利技术属性】
技术研发人员:王利涛,吕美,胡锦霞,卢尉航,丁瑞芳,王其宝,王慧云,
申请(专利权)人:济宁医学院,
类型:发明
国别省市:山东,37
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