The invention discloses a preparation method and application of Yiqi Huoxue recipe for inhibiting the activation of NF_kappa B and anti-LPS-induced thrombosis-promoting factor expression in HUVECs. The Yiqi Huoxue recipe consists of Astragalus extract, raw and sun-dried ginseng extract, red peony extract and safflower extract. Inhibiting HUVECs cells with Yiqi Huoxue recipe composed of Astragalus extract, ginseng extract A, ginseng extract B, Radix Paeoniae Rubra extract and safflower extract, we found that the drug could significantly inhibit the expression of PAI_1 and TF protein induced by LPS, which had anti-inflammatory and anti-coagulation effects; NF_kappa B was the main regulatory pathway of inflammatory response. When stimulated by LPS, NF kappa B is activated by phosphorylation, regulating the network of inflammatory mediators and thrombotropic factors. The Yiqi Huoxue Formula of the invention can reduce the expression of LPS-induced thrombopoietin factor by inhibiting the phosphorylation of NF kappa B.
【技术实现步骤摘要】
抑制NF-κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法及应用
本专利技术涉及中药组方。更具体地,涉及抑制NF-κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法及应用。
技术介绍
血管内皮细胞是覆盖在血管内腔表面的连续单层扁平细胞,是处于血液与血管壁之间的一道天然屏障,正常生理条件下具有维持血管通透性、抗凝、抗炎等作用。而当大量细菌侵入体内,出现脓毒血症或并发症,血液中内毒素(lipopolysaccharide,LPS)浓度升高时,内皮细胞受到炎症刺激,功能发生紊乱,释放大量促凝血因子及细胞表面粘附因子,打破凝血平衡环境,激发凝血级联反应,与其他血管炎症相关因素形成血栓网络,极易诱发血栓的形成。纤溶酶原激活物抑制剂(plasminogenactivatorinhibitor-1,PAI-1)和组织因子(tissuefactor,TF)是两个凝血反应启动因子,二者表达量的升高加剧血栓形成风险。体外研究表明,用LPS、TNFα等致炎因子刺激人脐静脉内皮细胞(humanumbilicalveinendothelialcells,HUVECs)后能够诱导PAI-1和TF的大量表达。Krüppel样因子家族(Kruppel-likefactor,KLFs)属于锌指蛋白的亚类,是一类具有DNA结合区的重要调控因子,参与多种基因的表达调控过程。目前鉴定出的KLFs家族成员有17种,其中KLF2是研究较多的一个,表达于多种细胞,调控机体多项生理、病理反应。KLF2血管内皮中具有较高表达,是重要的内皮功能调控因子,可调控多个血栓相关因子的 ...
【技术保护点】
1.抑制NF‑κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法,其特征在于,所述益气活血方由黄芪提取物、生晒参提取物、赤芍提取和红花提取物组成。
【技术特征摘要】
1.抑制NF-κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法,其特征在于,所述益气活血方由黄芪提取物、生晒参提取物、赤芍提取和红花提取物组成。2.根据权利要求1所述的抑制NF-κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法,其特征在于,生晒参提取物由生晒参提取物A和生晒参提取物B组成,黄芪提取物、生晒参提取物A、生晒参提取物B、赤芍提取物和红花提取物的质量比为1:(2-4):(0.5-1.5):(1-3):(5-7)。3.根据权利要求2所述的抑制NF-κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法,其特征在于,所述黄芪提取物的制备方法为:(HQ-1)粉碎后的黄芪过60-80目筛;(HQ-2)加入四氢呋喃或液体四氢呋喃衍生物的水溶液,所加入的四氢呋喃或液体四氢呋喃衍生物的水溶液的质量是黄芪质量的8-10倍,所述四氢呋喃或液体四氢呋喃衍生物与水的体积比为(0.5-1):1,回流提取2-3次,每次提取30-60min;(HQ-3)合并提取液,减压浓缩至20-25℃时相对密度为0.85-1.25;(HQ-4)然后调节pH值到6.8-7.2,使用X-5大孔树脂对提取液进行吸附,然后用乙醇的水溶液进行洗脱,V乙醇:V水=(4-5):1,采用减压蒸馏除去溶剂,30-60℃干燥,所得固体即为黄芪提取物。4.根据权利要求2所述的抑制NF-κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法,其特征在于,所述生晒参提取物A和生晒参提取物B的制备方法,包括如下步骤:(SSS-1)生晒参粉碎后,过50-80目筛;(SSS-2)加入丙氧基丙烷和水进行回流,所加入的丙氧基丙烷和水的总质量是生晒参质量的5-6倍,回流提取2-3次,每次提取1-1.5h,合并提取液;所述丙氧基丙烷与水的体积比为(0.5-1.5):1;(SSS-3)提取液静置20-30min分层,得到有机相和无机相;(SSS-4)无机相减压蒸馏除去溶剂后,采用微波干燥法干燥,微波的频率为300-500MHz,所得固体即为生晒参提取物A;(SSS-5)有机相先用无水氯化钙干燥除水,再采用减压浓缩,然后采用微波干燥法干燥,微波的频率为300-500MHz,所得固体即为生晒参提取物B。5.根据权利要求2所述的抑制NF-κB激活抗LPS诱导HUVECs促血栓因子表达益气活血方制备方法,其特征在于,所述赤...
【专利技术属性】
技术研发人员:高水波,王新洲,吴鸿,雷震,高海霞,韩勇军,尹悦,王振涛,
申请(专利权)人:河南省中医院河南中医药大学第二附属医院,
类型:发明
国别省市:河南,41
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。