一种创制抗根肿病大白菜种质的方法技术

本发明专利技术公开了一种创制抗根肿病大白菜种质的方法。本发明专利技术的创制方法包括如下步骤：1)以大白菜品种康根51‑1特殊自交后代为母本，大白菜品种宝根王1号特殊自交后代为父本进行杂交，得到杂交子代；将杂交子代进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的杂交子代；2)将抗根肿病的杂交子代连续自交多代，获得纯合抗根肿病自交系；3)将纯合抗根肿病自交系在碱性土壤环境下进行全生长周期的根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交系即为抗根肿病的大白菜种质。本发明专利技术通过不同抗性材料的性状聚合，创制广谱抗性的抗性种质；配制了安全高效的土壤改料肥料；建立了根肿病抗性鉴定的专用苗圃；实现了全生长周期的监测，根肿病抗性鉴定结果更加准确。

A method of creating Chinese Cabbage Germplasm Resistant to root knot disease

The invention discloses a method for creating Chinese Cabbage Germplasm Resistant to root knot disease. The invention comprises the following steps: 1) crossing the special inbred offspring of Chinese cabbage variety Kanggan 51 1 as female parent and the special inbred offspring of Chinese cabbage variety Baogenwang 1 as male parent to obtain hybrid offspring; identifying the resistance of hybrid offspring to root swelling disease, selecting the hybrid offspring resistant to root swelling disease; 2) crossing the resistance to root swelling disease; Homozygous root swelling resistant inbred lines were obtained through continuous self-crossing of multiple generations. 3) Homozygous root swelling resistant inbred lines were identified in alkaline soil environment for the whole growth cycle of root swelling resistance, and the inbred lines resistant to root swelling disease were selected as Chinese Cabbage Germplasm Resistant to root swelling disease. The invention creates broad-spectrum resistant germplasm by aggregating the properties of different resistant materials, formulates safe and efficient fertilizer for soil improvement, establishes a special nursery for resistance identification of root swelling disease, realizes the monitoring of the whole growth cycle, and achieves more accurate results of resistance identification of root swelling disease.

【技术实现步骤摘要】
一种创制抗根肿病大白菜种质的方法
本专利技术属于农业
，涉及大白菜育种，具体的说，涉及一种创制抗根肿病大白菜种质的方法及大白菜根肿病抗性鉴定的方法。
技术介绍
根肿病是由芸薹根肿菌引起的一种十字花科植物的世界性病害。1737年首次在英国地中海西岸和欧洲南部发现，现已在全世界蔓延。感病植物有白菜、甘蓝、芜菁、花椰菜、芥菜、萝卜、苤蓝等作物。近些年，该病的发病率持续升高，根肿病发生带来的直接后果就是十字花科植物大面积减产，严重影响蔬菜的产量。由于根肿病危害损失大，防治困难，抗根肿病的研究就显得尤为重要。根肿病抗源及品种创制和筛选是大白菜育种中的重要内容。根肿病是一种土传病害，植物发生病害后，致病菌在土壤中的存活时间能达到8年以上，危害巨大。根肿病菌分为多个生理小种，国内主要致病小种包括2号生理小种、4号生理小种和7号生理小种。根肿病菌主要侵染植物根部，并在侵染部位形成肿块，进而阻碍水分以及营养物质的运输，导致植株萎蔫，阻碍生长发育，造成减产甚至绝收。目前，根肿病在我国许多地方有发生，云南、四川、山东等地大白菜根肿病发生面积己经超过种植面积的65％，部分田块的损失超过了50％，严重制约了大白菜的生产，病害发生范围不断扩大，危害不断加重。对于发生病害的区域，将不再适合种植十字花科作物，经济损失严重，土地污染同样严重，甚至危及蔬菜安全。对于根肿病害的防控方法主要有：一是改良土壤。主要通过调节土壤pH值的方法，通常用熟石灰、酸性肥料和钙盐等进行调节。熟石灰、酸性肥料和钙盐虽然具有一定的防治效果，但是防治持续时间不长，且长期使用会改变土壤的正常结构，成本较高，因而不适宜长期使用。二是化学防治。这是普遍采用的防治方法。目前常用的防治药物有多菌灵、达科宁、福帅得、百菌清、五氯硝基苯、氰霜唑、氟啶胺、甲基托布津和多菌灵等能够抑制根肿菌。但是考虑到人类健康以及环境安全问题，许多国家都已经禁止或限制使用某些农药成分，比如甲基溴、甲醛、二溴乙烯和氯化汞等，而正是诸如此类的剧毒成分，才能根治根肿病，这就限制了针对该病专用农药的开发进程。三是生物防治。主要有引进新菌种对根肿病菌进行寄生，降低根肿菌数量，降低病害发生，或者采用种植诱饵植物的方法，使病菌集中到诱饵植物，降低对主栽品种的损耗，但是生物菌防会引进新的微生物，改变土壤菌群结构，破坏原有的生态平衡，可能会导致新的病虫害的发生，而诱饵植物只能一定程度的降低损耗，病害发生依然严重，且损失土壤肥力。四是选择抗病品种。抗病新品种的选育是防治根肿病的治本之策。选育抗病品种是最为经济又安全有效的方法。但由于大白菜根肿病病原菌生理小种存在进化及地区分布的差异，所以抗病材料也存在地区差异性，不能对所有生理小种同时产生抗性。目前，在大白菜育种中根肿病抗性鉴定方法主要有两种：一种是在感病地区进行材料种植，全周期鉴定抗性及植株表现；但存在的缺陷是：第一，感病地区进行实验带有气候等环境不确定性；第二，非感病区域的科研机构进行田间试验，需要到感病区域，过程比较繁琐，在材料生长过程较长，期间不能做到实时观察。另一种是实验室进行鉴定，主要是注射法、蘸根法以及菌土法，通常鉴定苗期；其缺点是：实验室鉴定对大白菜生长限制性较大，无法模拟整个田间生长的条件，目前只能进行苗期鉴定，不能对大白菜的整个生长周期进行有效观察。目前关于大白菜根肿病的研究也有一些文献，包括园艺学现代农业科技2011年第13期的“大白菜品种对根肿病抗性鉴定的研究”该研究采用五种传统的研究方法，如菌土法、注射法、浸芽法、蘸根法、插入法，但是在南方福建当地研究，实验室内还是只鉴定苗期，无法鉴定大白菜成熟期的抗性。湖南农业大学学报2014年2月第40卷第1期“湖南白菜品种根肿病抗性鉴定及评价”，在组培室内也是采用传统的菌土法，只能鉴定苗期抗病情况，大田鉴定成熟期抗性，而大田鉴定也只能是在南方酸性土壤高热等环境自然诱发。CN201110458726.6公开的一种芸薹属植物对根肿病抗性的鉴定方法：种子播于冷冻盒的格内，每一格播1粒种子，冷冻盒置于瓷盘内，用1/2MS培养基和打碎的芸薹根肿菌菌根制成pH为5.5，病菌孢子含量为1×108个/毫升以上的接种菌液；接种菌液注入瓷盘内，置入人工气候箱内培养，根据调查的病情指数鉴定待鉴定品种对根肿病的抗性；该方法还是局限于传统的实验室方法，只能鉴定苗期抗性。CN201610248555.7公开的一种不结球白菜抗根肿病的种质资源获取的方法，将抗根肿病大白菜的抗性基因通过蕾期的杂交和回交转育技术，转育到不结球白菜中，简单易行，排除了其他方式如转基因、基因工程技术等造成生物风险，但只是提供了种质资源获取方法，其中涉及到的鉴定方法，也只是苗期人工接种鉴定方法，只能鉴定苗期抗性。综上所述，现有的鉴定大白菜根肿病抗性的方法繁琐，时间长，效率低，大田实验区域局限性大，同时，导致准确率较低；也就是说无法在北方碱土环境下，进行准确的整个周期的大白菜根肿病鉴定。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种抗根肿病大白菜的制种方法。本专利技术提供的抗根肿病大白菜的制种方法包括如下步骤：1)以大白菜品种康根51-1特殊自交后代为母本，大白菜品种宝根王1号特殊自交后代为父本进行杂交，得到杂交子代；将所述杂交子代进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的杂交子代；2)将所述抗根肿病的杂交子代进行自交，得到自交子代F1，对所述自交子代F1进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F1；将所述抗根肿病的自交子代F1继续自交，得到自交子代F2，对所述自交子代F2进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F2；如此重复，连续自交多代，获得纯合抗根肿病自交系；3)将所述纯合抗根肿病自交系进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交系即为抗根肿病的大白菜种质。上述方法中，所述步骤1)中，所述大白菜品种康根51-1特殊自交后代和所述大白菜品种宝根王1号特殊自交后代的制备方法如下：将大白菜品种康根51-1或大白菜品种宝根王1号的种株进行自交，得到自交子代F1，对所述自交子代F1进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F1；将所述抗根肿病的自交子代F1继续自交，得到自交子代F2，对所述自交子代F2进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F2，如此重复，连续自交多代，获得纯合抗根肿病自交系；所述大白菜品种康根51-1的种株是具有外叶较绿，叶柄白色，叶球叠抱，叶球直筒形，内叶浅黄色，大根较长表型的康根51-1植株；所述大白菜品种宝根王1号的种株是具有外叶较绿，叶柄白色，叶球合抱近炮弹形，球心闭合，内叶呈深黄色，小根系表型的宝根王1号植株；所述自交的次数具体可为7次；所述根肿病抗性鉴定为苗期根肿病抗性鉴定。上述方法中，所述步骤2)中，所述自交的次数具体可为7次；所述根肿病抗性鉴定为苗期根肿病抗性鉴定。上述方法中，所述步骤1)和步骤2)中，所述苗期根肿病抗性鉴定方法如下：将自交获得的种子播种于装满基质的72孔苗盘，在植株长到2片真叶时，用小刀在距植株1cm处伤根，同时向伤根处浇入3ml根肿病菌7号生理小种的菌液，菌液的孢子浓度为2.5×108个/ml；伤根后，将土壤温度控制在25℃以上，湿度控制在80％-90％，pH控制在4.5-5.5进行培养，选取地上部生长正常，根部本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抗根肿病大白菜的制种方法，包括如下步骤：1)以大白菜品种康根51‑1为母本，大白菜品种宝根王1号为父本进行杂交，得到杂交子代；将所述杂交子代进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的杂交子代；2)将所述抗根肿病的杂交子代进行自交，得到自交子代F1，对所述自交子代F1进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F1；将所述抗根肿病的自交子代F1继续自交，得到自交子代F2，对所述自交子代F2进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F2；如此重复，连续自交多代，获得纯合抗根肿病自交系；3)将所述纯合抗根肿病自交系进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交系即为抗根肿病的大白菜种质。

【技术特征摘要】
1.一种抗根肿病大白菜的制种方法，包括如下步骤：1)以大白菜品种康根51-1为母本，大白菜品种宝根王1号为父本进行杂交，得到杂交子代；将所述杂交子代进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的杂交子代；2)将所述抗根肿病的杂交子代进行自交，得到自交子代F1，对所述自交子代F1进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F1；将所述抗根肿病的自交子代F1继续自交，得到自交子代F2，对所述自交子代F2进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F2；如此重复，连续自交多代，获得纯合抗根肿病自交系；3)将所述纯合抗根肿病自交系进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交系即为抗根肿病的大白菜种质。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述步骤1)中，所述大白菜品种康根51-1和所述大白菜品种宝根王1号在杂交前均还包括筛选纯合抗根肿病自交系的步骤；和/或，所述筛选纯合抗根肿病自交系的方法包括如下步骤：将所述大白菜品种康根51-1或所述大白菜品种宝根王1号的种株进行自交，得到自交子代F1，对所述自交子代F1进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F1；将所述抗根肿病的自交子代F1继续自交，得到自交子代F2，对所述自交子代F2进行根肿病抗性鉴定，选取抗根肿病的自交子代F2，如此重复，连续自交多代，获得纯合抗根肿病自交系；和/或，所述自交的次数为7次；和/或，所述根肿病抗性鉴定为苗期根肿病抗性鉴定。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述步骤2)中，所述自交的次数为7次；和/或，所述根肿病抗性鉴定为苗期根肿病抗性鉴定。4.根据权利要求1-3任一所述的方法，其特征在于：所述步骤3)中，所述根肿病抗性鉴定为在碱性土壤环境下进行全生长周期的根肿病抗性鉴定；和/或，所述在碱性土壤环境下进行全生长周期的根肿病抗性鉴定的方法包括如下步骤：步骤A、选择土壤为碱性的地区作为试验区，所述试验区设有拱棚，所述拱棚内设有苗圃；所述苗圃划分为三个等面积小区；在所述苗圃四周及每个小区间垂直下挖隔离沟；所述隔离沟...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙继峰，韩太利，徐立功，谭金霞，杨晓东，
申请(专利权)人：山东省潍坊市农业科学院，
类型：发明
国别省市：山东,37