The invention discloses a preparation method of polypeptide nanobubbles, which comprises the following steps: constructing a recombinant plasmid, which includes Flag tag, adipose tissue targeting polypeptide and coding gene of nanobubbles marker membrane protein CD63; transfecting the recombinant plasmid into cells secreting nanobubbles through liposome for culture, and collecting fine particles. The present invention also discloses the polypeptide nanobubbles and their application in the preparation of drugs for treating obesity. The polypeptide nanobubbles provide great convenience for targeted therapy of anti-obesity drugs. They have high drug loading capacity and good biocompatibility. The encapsulation of the drug by the polypeptide nanobubbles makes the drug have good biocompatibility. At the same time, the stability of the drug in vivo is obviously enhanced and prolonged. The circulation time of drugs in vivo greatly improves the utilization rate of drugs, thus significantly enhancing the targeting anti-obesity activity of drugs.
【技术实现步骤摘要】
一种多肽纳米泡及其制备方法和应用
本专利技术涉及纳米泡及其应用,具体涉及一种多肽纳米泡及其制备方法和应用。
技术介绍
随着人们生活水平的提高,肥胖人群逐年增加。世界卫生组织报道,作为一种慢性代谢性疾病,肥胖已成为全世界引起死亡的五大风险之一,其原因是由于肥胖可引发多种代谢性疾病,如:2型糖尿病、心脑血管疾病及肿瘤等。因此,针对肥胖的干预治疗是预防和治疗肥胖相关疾病的重要措施。至今,对于肥胖的治疗主要有饮食行为疗法、外科手术和药物治疗。对于饮食行为疗法来讲,当停止减肥后,体重会严重反弹,甚至超过了减肥前的体重。而外科手术(如:缩胃术、胃旁路手术、胃束带手术)的风险又太大。所以许多肥胖患者把药物治疗作为首选。目前,美国FDA批准的两种减肥药,分别为西布曲明(Sibutramine)和奥利司他(Orlistat)。但长期使用后存在较大副作用,比如前者可引发高血压、失眠等,后者会造成腹泻、排泄失禁等。因此,在参与代谢综合征相关的器官中,如何使得药物能够仅仅作用于脂肪组织,却对其他脏器和组织不造成影响,从而达到不改变人体免疫系统的基础上能更高效治疗代谢综合征的目的,成为现在肥胖治疗面临的重要问题和研究重点。2004年,发表在“NatureMedcine”上的一篇报道发现一种多肽能特异性的与白色脂肪组织血管的内皮细胞受体结合,其氨基酸序列为CKGGRAKDC。中国专利2010101599163公开了一种棕色脂肪组织靶向性多肽及其应用,公开了经修饰的多肽可以与具有生物药理活性的物质相连接,能够靶向运送药物到达棕色脂肪组织,发挥药理学效应,从而达到靶向治疗疾病的目的,侧重 ...
【技术保护点】
1.一种多肽纳米泡的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)构建重组质粒,所述重组质粒包括Flag标签、脂肪组织靶向性多肽和微泡标志性膜蛋白CD63的编码基因,Flag标签和脂肪组织靶向性多肽的编码基因按顺序依次连接在微泡标志性膜蛋白CD63编码基因的起始密码子后;其中所述脂肪组织靶向性多肽的氨基酸序列为CKGGRAKDC;(2)将步骤(1)得到的重组质粒通过脂质体转染到分泌纳米泡的细胞中培养,收集细胞培养液,经超速离心提取多肽纳米泡。
【技术特征摘要】
1.一种多肽纳米泡的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)构建重组质粒,所述重组质粒包括Flag标签、脂肪组织靶向性多肽和微泡标志性膜蛋白CD63的编码基因,Flag标签和脂肪组织靶向性多肽的编码基因按顺序依次连接在微泡标志性膜蛋白CD63编码基因的起始密码子后;其中所述脂肪组织靶向性多肽的氨基酸序列为CKGGRAKDC;(2)将步骤(1)得到的重组质粒通过脂质体转染到分泌纳米泡的细胞中培养,收集细胞培养液,经超速离心提取多肽纳米泡。2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,步骤(1)中所述重组质粒的构建步骤如下:以CD63的cDNA为模板,以CD63-F/CD63-R为引物,经PCR扩增得到Flag-peptide-CD63片段,将Flag-peptide-CD63片段插入出发质粒pIRES2-EGFP的XhoI、EcoRI酶切位点之间得到重组质粒;其中引物CD63-F的核苷酸序列如SEQIDNO:1所示,引物CD63-R的核苷酸序列如SEQI...
【专利技术属性】
技术研发人员:张亚琴,韩晓,吴金道,袁毅,庞晶,许茹凤,李宏卫,武和明,浦立勇,
申请(专利权)人:南京医科大学,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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