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一种双鲍菇菌种发酵培养方法技术

技术编号:19190992 阅读:26 留言:0更新日期:2018-10-17 03:40
一种双鲍菇菌种发酵培养方法。本发明专利技术使用木屑原种培养基,该培养基能提供生长旺盛、发菌均匀的菌丝片段,在双鲍菇菌种培养过程中用于母种繁殖的专用母种培养基,该母种培养基能促使苗丝生长旺盛、生长时间短、苗丝强壮、菌丝质量高,该培养基能降低成本,利于产生高质量菌种。

【技术实现步骤摘要】
一种双鲍菇菌种发酵培养方法
本专利技术涉及菌种发酵培养方法,特别是双鲍菇菌种发酵培养方法。
技术介绍
双鲍菇生产一直使用固体菌种进行生产,近几年开始有人在进行液体菌种发酵培养技术的研究,但这种用于生产的菌种还存在很多问题,(1)母种的繁殖,多使用通用型培养基,没有专门用于双鲍菇菌种的培养基,因此母种繁殖时间较长,苗丝质量不高;(2)在生产液体菌种的接种,多是用母种培养基培养的菌种直接进行一级摇瓶培养,这样生产菌球的时间长、菌球大小不一,不利于菌球的生长;(3)液体菌种所用的培养基含有大量的葡萄糖、蔗糖等成份,经济费用较高。
技术实现思路
本专利技术克服现有双鲍菇液体菌种发酵培养方法的不足,设计一种能培养出大小均匀适中的菌种且缩短培养时间的双鲍菇液体菌种深层发酵培养方法。本专利技术另一目的是提供一种在双鲍菇液体菌种培养过程中用于母种繁殖的专用母种培养基,该母种培养基能促使苗丝生长旺盛、生长时间短、苗丝强壮、菌丝质量高。本专利技术的第二个目的是提供一种在双鲍菇液体菌种培养过程中使用的木屑原种培养基,该培养基能提供生长旺盛、发菌均匀的菌丝片段。本专利技术的第三个目的是提供一种在双鲍菇液体菌种培养过程中使用的深层发酵培养基,该培养基能降低成本,利于产生高质量菌种。本专利技术的技术方案为一种双鲍菇液体菌种的培养方法:包括如下步骤:1、将母种培养基内进行培养;2、将在母种培养基内培养长满试管的菌丝移种到木屑原种培养基内进行过渡培养,培养条件为:温度22-27±1℃,暗培养12-20天,待菌丝长满;3、将木屑菌种充分打碎后,立即移种到液体培养基中进行一级摇瓶的培养扩增;4、将一级摇瓶内生长5-7天的菌液移入盛有新鲜注体培养基的二级摇瓶中进行扩增;5、将二级摇瓶出来的菌液进行发酵处理即可得到成品双鲍菇液体菌种。上述木屑原种培养基为含有木屑的培养基。上述木屑原种培养基为含有木屑、棉子壳和豆粉的培养基。上述木屑原种培养基培养是在三角瓶内进行的。上述木屑原种培养基原料部分的成分和重量百分比含量范围为:蔗糖0.5-1.5%,棉子壳70-75%,木屑5-10%,麦麸5-10%,豆粉2-6%,石膏粉(CaCO3)0.5-2.5%,木屑原种培养基由上述原料与水按1∶1.2-1.4混合而得,其PH值为5.5-6.5上述母种培养基为专用母种培养基,在原有的马铃薯培养基内加入了双鲍菇废料浸出液,其PH值范围为5.5-6.5,其成分和重量百分比含量范围为:马铃薯10-30%,双鲍菇废料1-5%,葡萄糖1-3%,酵母膏0.02-2%,蛋白胨0.05-0.2%,KH2PO4:0.05-0.2%,MgSO4.7H2O:0.01-0.07%,琼脂1-3%,水:60-85%。母种培养基内的培养条件为:温度20-27±1℃,黑暗培养,时间5-10天。上述液体培养基为深层发酵培养基,其成分及其重量百分比含量范围为:酵母膏0.1-0.5%,麦麸0.5-3%,玉米粉1-5%,淀粉1-5%,石膏粉(CaCO3)0.05-0.5%KH2PO4:0.02-0.1%,MgSO4.7H20:0.01-0.2%,NaCI:0.01-0.1%,维生素B1:0.0001-0.008%,琼脂0.05-0.9%,水:86-96%。采用本深层发酵培养基在一、二级摇瓶内液体菌种的培养条件为:温度25-27±1℃,振荡频率125-155转/分,培养时间3-5天,接种量和液体培养基装料系数根据所需的产物不同,分别是10-15%和100ml-150ml/500ml。采用本深层发酵培养基在发酵阶段的培养条件为:温度25-29±1℃,通气压力0.04-0.08Mpa,搅拌速度120-160转/分,频率指示20.0-26.6。时间5-7天。技术效果本专利技术的双鲍菇液体菌种的培养方法,在通常的液体菌种发酵培养工艺中增加了木屑原种培养基的过渡培养过程,即上述方法中的步骤2在现有技术中是没有,该步骤由于木屑本身具有细小的间隙,双鲍菇菌丝在该培养基内培养一段时间后再在接种时被充分打碎,就可增加大量苗丝片段,在液体培养基内形成大量发菌点,这些发菌点在合适的培养基中,就可形成大量细小均匀的有效菌丝球,因而能培养出大小均匀适中的菌种且缩短培养时间。通过木屑原种培养基培养的菌种接种后形成大量细小的有效菌球,直径在0-2mm之间的有效菌球达90%以上,最具有活力。而直接通过母种培养基培养的菌种接种的菌球大不不一,大的菌球由于直径太大,已失去活力。本屑原种培养基是一种加入了木屑、棉子壳、豆粉和石膏粉的培养基,木屑和棉子壳的细小间隙有利于菌丝生长,豆粉等其他营养成分的加入,可以使菌丝生长旺盛。专用母种培养基由于是一种针对双鲍菇液体菌种培养的专用培养基,因此在该培养基中加入了双鲍菇废料培养物的浸出液,同时去掉了麸皮和降低了酵母膏的含量,由于在双鲍菇废料中含有原来菌丝分解木屑多糖时所用的激素物质和含有被原菌丝分解、但没有被吸收完的多糖营养物质,故经专用母种培养基的培养,可以缩短培养时间,使菌丝生长旺盛,菌丝强壮。深层发酵培养基与原有的液体培养基不同点,在于它不含有单糖成份(葡萄糖),菌球生长所需的糖源来自多糖的玉米粉和淀粉,这两种物质的使用,不光降低了培养基的成本,也使菌丝生长在更接近自然的环境中,同时玉米粉和淀粉提供给菌丝生长所需的碳源。由于这种培养基在矿物质元素和琼脂含量方面进行了适当的变动,产生的产物就大不相同,所以可根据我们需要的发酵产物,来使用不同的培养基。实施例1:双鲍菇液体菌种的培养方法:本实施例为较优实施例,其具体步骤是:(1)将母种在母种培养基内进行培养:取0.5cm2见方双鲍菇母种,接种至专用设备母种培养基培养,在23±1℃条件下,黑暗培养7天,进行菌种活化和继代,形成一支试管母种;本步骤的专用母种培养基配制的含量及成分为:100份专用母种培养基内含有马铃薯20份,双鲍菇废料1.5份,葡萄糖2份,酵母膏0.05份,蛋白胨0.1份,KH2PO4:0.1份,MgSO4:7H2O:0.05份,琼脂2份,水:76.2份,按上述组分所得到的培养基的PH值为6.0;而原马铃薯培养基,酵母膏为0.25份,还有麦麸5份,本实施例的专用母种培养基增加了双鲍菇废料1.5份,减少了酵母膏的含量,去掉了麦麸;相对于原马铃薯培养基,达到满瓶的培养时间至少可缩短2天,且母种在专用培养基上菌丝生长旺盛、菌丝强壮。(2)将在母种培养基内培养满管的菌丝移种到木屑原种培养基内进行过渡培养;由步骤(1)所得的满瓶菌丝移种到150毫升的三角瓶中,可移栽六瓶,然后进行暗培养,温度条件为25±1℃,培养15天。木屑原种培养基原料部分的成分和重量百分比含量为:蔗糖1%,棉子壳72%,木屑10%,麦麸10%,豆粉5%,石膏粉(CaCO3)2%,木屑原种培养基由上述原料与水按1∶1.2混合而得,其PH值为6.0;(3)一级摇瓶扩增:将上述六瓶满瓶的菌丝接种到六个500毫升的一级摇瓶,接种的同时要充分将木屑菌种打碎,使木屑菌种形成大量的菌丝碎片,增加在液体培养基中的发菌点,这些发菌点在合适的培养基中,培养三天就可见大量的均匀菌球产生,一级摇瓶的培养条件:温度25±1℃、振荡频率125转/分、接种量10%、液体培养基装料系数为100ml-150ml/500ml(三角本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双鲍菇菌种发酵培养方法,其特征在于用于母种繁殖的专用母种培养基,该母种培养基能促使苗丝生长旺盛、生长时间短、苗丝强壮、菌丝质量高。

【技术特征摘要】
1.一种双鲍菇菌种发酵培养方法,其特征在于用于母种繁殖的专用母种培养基,该母种培养基能促使苗丝生长旺盛、生长时间短、苗丝强壮、菌丝质量高。2.如权利要求1所述的一种双鲍菇菌种发酵培养方法,其特征在于使用的木屑原种培养基,该培养基能提供生长旺盛、发菌均匀的菌丝片段。3.如权利要求1所述的一种双...

【专利技术属性】
技术研发人员:张建华
申请(专利权)人:张建华
类型:发明
国别省市:山东,37

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