淀粉样蛋白缀合物及其用途和方法技术

技术编号:19127153 阅读:6 留言:0更新日期:2018-10-10 08:28
本发明专利技术涉及一种药物组合物,所述药物组合物允许或产生针对Aβ40的有效且特异性的免疫应答(产生的抗体是Aβ40特异性的并且不显著结合Aβ42),除此以外,所述药物组合物与同样包含CysAβ(33‑40)肽和KLH(且其中所述元件已经通过同样允许肽与转运蛋白结合的另一种交联剂结合或缀合)的其他缀合物产生的应答相比增强所述应答。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】淀粉样蛋白缀合物及其用途和方法专利
本专利技术涉及生物化学领域,更具体地涉及蛋白缀合部分的领域。另外,本专利技术具有在药物和兽医科学领域中在治疗淀粉样蛋白疾病方面的应用。专利技术背景现有技术中已经描述了可用于主动或被动免疫接种患有淀粉样蛋白疾病,尤其是阿尔茨海默病的患者的多种缀合物。应当指出,所述现有技术中的大多数集中在选择允许在患者中生成合适的免疫应答的肽或转运蛋白,所使用的交联剂没有被给予太多的重视或关注。所述交联剂通常以迄今可用的或已知的全部交联剂的列表的形式表示,表明它们中的任何一种可以以等效的方式使用,或甚至根本未表明。例如,具有公布号ES2246105的西班牙专利申请公开了通过用缀合物主动免疫接种患者来预防或治疗淀粉样蛋白疾病,尤其是阿尔茨海默病,所述缀合物由Aβ33-40肽和转运蛋白钥孔虫戚血蓝蛋白(下文中称为KLH)形成,蛋白数据库(ProteinDataBank)中的登录号为4BED。还构思了所述缀合物用于生成抗体(例如,通过用所述缀合物免疫哺乳动物或鸟类)的用途,所述抗体随后在用于预防或治疗淀粉样蛋白疾病,尤其是阿尔茨海默病的被动免疫接种方法中使用。所述专利文献未具体说明所使用的交联剂。专利技术人所知晓的且其中认为缀合物中的交联剂在产生的免疫应答方面是重要的唯一现有技术文献是公布号为WO2005/072777的PCT专利申请。所述文献公开了基于交联剂LPA的用于主动或被动免疫接种患者的缀合物,其同时结合或具有两个肽的能力突出,使其适合于在患者中生成合适的免疫应答。在基于LPA的缀合物的一般解释中,构思所使用的肽可以是Aβ42或Aβ40C端片段,且具体提及并示例了片段33-42、35-42、36-42、37-42、38-42和39-42。另外,所述文献提及转运蛋白可以是KLH。该同一文献描述了使用不同交联剂(N-琥珀酰亚胺基3-(2-吡啶基二硫代)丙酸酯,通常被称为SPDP)生成其他缀合物。专利技术概述在进行大量且深入的实验之后,专利技术人令人惊讶地发现马来酰亚胺丁酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(下文中称为SM)(一种异双功能交联剂,其中,其每个分子将肽与转运蛋白结合)用作用于制备CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)和KLH缀合物的交联剂,产生了允许生成与由用现有技术的同样允许将肽与转运蛋白结合的其他同双功能交联剂或异双功能交联剂诸如SPDP生成的缀合物产生的免疫应答相比的改进的免疫应答的缀合物。这样的改进在本说明书的实施例1至4中清楚地示出。此外,所述实施例示出了所述新的缀合物或包含所述缀合物的药物组合物产生:-尽可能特异性的免疫应答,用于使与(预防性或治疗性)疫苗处理相关的副作用最小化的目的;-最高的可能的免疫应答,用于确保患者的有效免疫和降低所需的免疫原性缀合物的剂量的目的。因此,在第一方面,本专利技术涉及一种缀合物,其特征在于交联剂是SM。在另一方面,本专利技术涉及一种组合物,所述组合物包含本专利技术的缀合物。在本专利技术的另外的方面,构思了所述缀合物用于制备药物产品,更具体地,预期用于治疗或预防淀粉样蛋白疾病的药物产品的用途。本专利技术涉及的另一方面是包含本专利技术的缀合物的组合物,所述组合物用于用作药物产品使用,更具体地用于在治疗或预防淀粉样蛋白疾病中使用。另外,本专利技术还涉及一种通过递送包含本专利技术的缀合物的组合物来治疗或预防淀粉样蛋白疾病的方法。在又另一个方面,本专利技术涉及一种基于本专利技术的缀合物的使用来制造抗体的方法。专利技术详述定义如本文中使用的,“淀粉样蛋白疾病(amyloiddisease)”及其复数形式指的是与β-淀粉样蛋白积累相关的疾病。所述积累可以主要在脑中出现,产生疾病,其中发现了阿尔茨海默病、帕金森病、脑淀粉样血管病、淀粉样蛋白起源的血管性痴呆和具有Lewy小体的痴呆。β-淀粉样蛋白积累还可以主要在骨骼肌中发生,产生包涵体肌炎。如本文中使用的,“被动免疫接种”及其复数形式指的是将抗体或其片段递送至患者,预期赋予所述患者免疫力。如本文中使用的,“主动免疫接种”及其复数形式指的是将充当免疫原(即,它们允许抗体生成,预期赋予患者免疫力)的肽(以缀合物的形式)递送至所述患者。如本文中使用的,“佐剂”及其复数形式指的是能够与本专利技术的缀合物组合以增强、改进或以其他方式调节患者中的免疫应答的免疫调节物质。如本文中使用的,“患者”及其复数形式指的是任何哺乳动物,优选人类,其中本专利技术的缀合物或包含其的组合物可以被施用以用于治疗或预防淀粉样蛋白疾病的目的。如本文中使用的,“CysAβ(33-40)”指的是已经向其N端添加半胱氨酸的Aβ40(SEQIDNO:2)的位置33至40的序列。所述序列以SEQIDNO:1体现并且为:CGLMVGGVV。描述本专利技术的第一方面涉及一种缀合物,所述缀合物包含至少一个CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)和钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH),其特征在于连接所述缀合物的每个组分(所述至少一个肽中的每一个与KLH)的交联剂是马来酰亚胺丁酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SM)。所述缀合物允许或产生针对Aβ40的有效且特异性的免疫应答(产生的抗体是Aβ40特异性的并且不显著结合Aβ42),除此以外,所述缀合物与同样包含CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)和KLH(且其中所述元件已经通过同样允许肽与转运蛋白结合的另一种交联剂结合或缀合)的其他缀合物产生的应答相比增强所述应答。在第二方面,本专利技术涉及一种组合物,所述组合物包含根据本专利技术的缀合物。在优选的实施方案中,组合物另外包含一种或更多种佐剂,其优选地选自矿物盐(诸如氢氧化铝、磷酸铝或磷酸钙)、微粒和表面活性剂[诸如非离子型嵌段聚合物表面活性剂、病毒体、皂角苷、脑膜炎球菌外膜蛋白(蛋白酶体)、免疫刺激复合物、蜗形物(cochleate)、二甲基双十八烷基溴化铵、阿夫立定(avridine)、维生素A或维生素E]、细菌产物[诸如草分枝杆菌(Mycobacteriumphlei)的细胞壁骨架、胞壁酰二肽和三肽(苏氨酰-MDP、MDP-丁酰酯、二棕榈酰基磷脂酰乙醇胺MTP)、单磷酰脂质A、肺炎克雷伯菌(Klebsiellapneumoniae)糖蛋白、百日咳博代氏杆菌(Bordetellapertussis)、卡介苗(BacillusCalmette-Guérin)、霍乱弧菌(V.Cholerae)和大肠杆菌(E.coli)热不稳定肠毒素、海藻糖二霉菌酸酯(trehalosedimycolate)、CpG寡脱氧核苷酸]、激素和细胞因子(例如,白介素-2、干扰素α、干扰素β、粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子、脱氢表雄酮、Flt3配体、1,25二羟基维生素D3、白介素-1、白介素-6、白介素-12、人生长激素、β-微球蛋白和淋巴细胞趋化因子(lymphotactin))、单抗原构建体(诸如结合至赖氨酸核的多个肽抗原或结合至辅助T细胞表位并在N端棕榈酰化的细胞毒性T细胞表位)、聚阴离子(诸如右旋糖酐或双链多核苷酸)、聚丙烯酸物(诸如聚甲基丙烯酸甲酯或用烯丙基蔗糖交联的丙烯酸)、载体[诸如破伤风类毒素、白喉类毒素、乙型脑膜炎球菌外膜蛋白(蛋白酶体)、假单胞菌属(Pseudomonas)外毒素A、霍乱毒素B亚基、热不稳定的突变的肠产毒性大肠杆菌肠毒素本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组合物,所述组合物包含与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)连接的至少一个CysAβ(33‑40)肽(SEQ ID NO:1)的缀合物,其中连接所述缀合物的每个CysAβ(33‑40)肽与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)的交联剂是马来酰亚胺丁酸N‑羟基琥珀酰亚胺酯(SM)。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.02.15 ES ES2016301731.一种组合物,所述组合物包含与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)连接的至少一个CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)的缀合物,其中连接所述缀合物的每个CysAβ(33-40)肽与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)的交联剂是马来酰亚胺丁酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SM)。2.如权利要求1所述的组合物,其中所述组合物还包含氢氧化铝凝胶。3.一种药物组合物,所述药物组合物包含i)包含与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)连接的至少一个CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)的缀合物,和ii)氢氧化铝凝胶,其中连接所述缀合物的每个CysAβ(33-40)肽与钥孔虫戚血蓝蛋白(KLH)的交联剂是马来酰亚胺丁酸N-羟基琥珀酰亚胺酯(SM),且其中所述组合物的pH的范围为从5.8至7.0。4.根据权利要求3所述的药物组合物,其中所述组合物的pH的范围为从6.2至7.0。5.根据权利要求3所述的药物组合物,其中所述组合物的pH的范围为从5.8至6.2。6.根据权利要求3至5中任一项所述的药物组合物,其中所述药物组合物中CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)的浓度为至少100μg。7.根据权利要求3至5中任一项所述的药物组合物,其中所述药物组合物中CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)的浓度为至少150μg。8.根据权利要求3至5中任一项所述的药物组合物,其中所述药物组合物中CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)的浓度为从150μg至400μg。9.根据权利要求3至5中任一项所述的药物组合物,其中所述药物组合物中CysAβ(33-40)肽(SEQIDNO:1)的浓度为从160μg至240μg。10.根据权利要求3至9中任一项所述的药物组合物,其中所述缀合物进...

【专利技术属性】
技术研发人员:曼努埃尔·萨拉萨巴里奥
申请(专利权)人:艾拉科隆生物技术公司
类型:发明
国别省市:西班牙,ES

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