一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法技术

本发明专利技术提供了一种高纯度的N‑乙氧羰基‑2，3‑二取代丁烯二酰亚胺的合成方法，包括如下步骤：(1)将3，4‑二甲基呋喃‑2，5‑二酮溶于DMF中，冰浴下加入HMDS和甲醇，室温反应，旋去溶剂；加入DMF、HMDS和甲醇反应，萃取；合并有机相、水洗、饱和食盐水洗后，干燥，蒸去溶剂，油泵拉干，得2，3‑二甲基丁烯二酰亚胺；(2)将氯甲酸乙酯逐滴加入到2，3‑二甲基丁烯二酰亚胺和N‑甲基吗啉的乙酸乙酯混合液中，室温反应；水洗、饱和食盐水洗、稀盐酸洗，干燥蒸干后得目标产物。本发明专利技术能高效得到高纯度用于生物试剂盒开发的N‑乙氧羰基‑2，3‑二取代丁烯二酰亚胺，具有很好的市场应用价值。

A method for the synthesis of high purity N- ethoxy carbonyl -2, 3- two substituted butene two imide

The invention provides a synthesis method of high purity N_ethoxycarbonyl_2,3_disubstituted butene diamides, which comprises the following steps: (1) dissolving 3,4_dimethylfuran_2,5_diketone in DMF, adding HMDS and methanol in ice bath, reacting at room temperature, spinning off the solvent, adding DMF, HMDS and methanol, and extracting; 2,3-dimethylbutylene diamide was obtained by drying, steaming and drying after washing with organic phase, water washing and saturated salt water, and pulling dry with oil pump; (2) Ethyl chloroformate was added to the mixture of 2,3-dimethylbutylene diamide and ethyl acetate of N-methylmorpholine dropwise at room temperature; water washing, saturated salt washing, dilute salt After pickling, drying and drying, the target product can be obtained. The invention can efficiently obtain high purity N_ethoxycarbonyl_2,3_disubstituted butene diamides for the development of biological kits, and has good market application value.

【技术实现步骤摘要】
一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法
本专利技术涉及N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的制备领域，尤其涉及一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法。
技术介绍
N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺，是一类特别的构建酶特异性试剂盒必备的有机合成切块，用以修饰DNA多聚酶，保持其酶活性热稳定性，而使其具有做成试剂盒的能力；对于整个酶试剂盒而言，N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的纯度将直接影响酶试剂盒的最终检测结果。据此，对高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成开发将具有极其重要的现实意义。然而，目前为止，采用现有方法得到的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的纯度还不够高，无法达到上述酶特异性试剂盒的开发要求。例如，EP1806400A2、US2007224611A1中关于N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺合成方法的报道中，目标产物的纯度只有95％，若需更高纯度，则仍需要柱色谱方法进行进一步纯化。据此，目前急需一种无需柱色谱进一步纯化的高纯度N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种无需柱色谱进一步纯化的高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法。本专利技术采用以下技术方案解决上述技术问题：一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法，包括如下步骤：(1)制备2，3-二甲基丁烯二酰亚胺A.将1.0-1.2g3，4-二甲基呋喃-2，5-二酮溶于10-12mLDMF中，冰浴下加入17-19mL六甲基二硅氮烷HMDS和1.7-1.9mL甲醇，加毕室温反应1-3h，旋去溶剂；B.加入4-6mLDMF、17-19mLHMDS和1.7-1.9mL甲醇反应7-9h，再加入65-75mL水、45-55mL乙酸乙酯进行萃取，萃取2-4次；C.合并有机相，并对萃取液进行水洗、饱和食盐水洗后，采用无水硫酸钠干燥法进行干燥，再蒸去溶剂，油泵拉干，得白色固体，即2，3-二甲基丁烯二酰亚胺；(2)制备N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺A.0-5℃温度下，将0.9-1.1mL氯甲酸乙酯逐滴加入到2，3-二甲基丁烯二酰亚胺和N-甲基吗啉的乙酸乙酯混合液中，室温反应4-6h；其中，乙酸乙酯混合液的体积为19-21mL，2，3-二甲基丁烯二酰亚胺的含量为0.9-1.1g，N-甲基吗啉的含量为0.9-1.1mL；B.反应完全，对反应产物先后进行水洗、饱和食盐水洗、稀盐酸洗，接着采用无水硫酸钠干燥，蒸干后得无色液体，即N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺。作为本专利技术的优选方式之一，所述步骤(1)中旋去溶剂指采用旋转蒸发仪把相应溶剂蒸干。作为本专利技术的优选方式之一，所述步骤(1)中2，3-二甲基丁烯二酰亚胺的产量为0.9-1.1g，收率89％，纯度99.0％。作为本专利技术的优选方式之一，所述步骤(2)中乙酸乙酯混合液的具体体积为20mL，其中，2，3-二甲基丁烯二酰亚胺的含量为1.0g，N-甲基吗啉的含量为1.0mL。作为本专利技术的优选方式之一，所述步骤(2)中对反应产物进行稀盐酸洗时的稀盐酸浓度具体为1M。作为本专利技术的优选方式之一，所述步骤(2)中N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的最终产量为1.3-1.5g，收率90％，纯度98.0％。本专利技术相比现有技术的优点在于：采用两步合成法合成N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺，步骤简单、操作方便，且最终以HPLC:purity>98％，90％的收率得到目标产物；其中，第一步反应为本专利技术最为关键的步骤，该步骤中，使用HMDS替代传统的脲，无需高温(150℃)，于室温下反应即可得到第一步产物，并且杂质少，操作简单；此外，第一步反应中，利用二次加入HMDS和溶剂再反应和纯化一步进行，以89％的收率，99.0％纯度得到第一步产物，为第二步反应产物的纯度提供了有效保障。因此，本专利技术能高效得到高纯度用于生物试剂盒开发的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺，利用该产品能够顺利得到性能高效的酶反应试剂盒，具有很好的市场应用价值。具体实施方式下面对本专利技术的实施例作详细说明，本实施例在以本专利技术技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本专利技术的保护范围不限于下述的实施例。实施例1本实施例的一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法，包括如下步骤：(1)制备2，3-二甲基丁烯二酰亚胺A.将1.0g3，4-二甲基呋喃-2，5-二酮(结构式如式1所示)溶于10mLDMF中，冰浴下加入17mL六甲基二硅氮烷HMDS和1.7mL甲醇，加毕室温反应1h，再采用旋转蒸发仪把相应溶剂蒸干；B.加入4mLDMF、17mLHMDS和1.7mL甲醇反应7h，再加入65mL水、45mL乙酸乙酯进行萃取，萃取2次；C.合并有机相，并对萃取液进行水洗、饱和食盐水洗后，采用无水硫酸钠干燥法进行干燥，再蒸去溶剂，油泵拉干，得0.9g白色固体，即2，3-二甲基丁烯二酰亚胺(结构式如式2所示)，收率89％，纯度99.0％。(2)制备N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺A.0℃温度下，将0.9mL氯甲酸乙酯逐滴加入到2，3-二甲基丁烯二酰亚胺和N-甲基吗啉的乙酸乙酯混合液中，室温反应4h；其中，乙酸乙酯混合液的体积为19mL，2，3-二甲基丁烯二酰亚胺的含量为0.9g，N-甲基吗啉的含量为0.9mL；B.反应完全，对反应产物先后进行水洗、饱和食盐水洗、1M稀盐酸洗，接着采用无水硫酸钠干燥，蒸干后得1.3g无色液体，即N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺(结构式如式3所示)，收率90％，纯度98.0％。实施例2本实施例的一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法，包括如下步骤：(1)制备2，3-二甲基丁烯二酰亚胺A.将1.2g3，4-二甲基呋喃-2，5-二酮(结构式如式1所示)溶于12mLDMF中，冰浴下加入19mL六甲基二硅氮烷HMDS和1.9mL甲醇，加毕室温反应3h，再采用旋转蒸发仪把相应溶剂蒸干；B.加入6mLDMF、19mLHMDS和1.9mL甲醇反应9h，再加入75mL水、55mL乙酸乙酯进行萃取，萃取4次；C.合并有机相，并对萃取液进行水洗、饱和食盐水洗后，采用无水硫酸钠干燥法进行干燥，再蒸去溶剂，油泵拉干，得1.1g白色固体，即2，3-二甲基丁烯二酰亚胺(结构式如式2所示)，收率89％，纯度99.0％。(2)制备N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺A.5℃温度下，将1.1mL氯甲酸乙酯逐滴加入到2，3-二甲基丁烯二酰亚胺和N-甲基吗啉的乙酸乙酯混合液中，室温反应6h；其中，乙酸乙酯混合液的体积为21mL，2，3-二甲基丁烯二酰亚胺的含量为1.1g，N-甲基吗啉的含量为1.1mL；B.反应完全，对反应产物先后进行水洗、饱和食盐水洗、1M稀盐酸洗，接着采用无水硫酸钠干燥，蒸干后得1.5g无色液体，即N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺(结构式如式3所示)，收率90％，纯度98.0％。实施例3本实施例的一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种高纯度的N‑乙氧羰基‑2，3‑二取代丁烯二酰亚胺的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备2，3‑二甲基丁烯二酰亚胺A.将1.0‑1.2g 3，4‑二甲基呋喃‑2，5‑二酮溶于10‑12mL DMF中，冰浴下加入17‑19mL六甲基二硅氮烷HMDS和1.7‑1.9mL甲醇，加毕室温反应1‑3h，旋去溶剂；B.加入4‑6mL DMF、17‑19mL HMDS和1.7‑1.9mL甲醇反应7‑9h，再加入65‑75mL水、45‑55mL乙酸乙酯进行萃取，萃取2‑4次；C.合并有机相，并对萃取液进行水洗、饱和食盐水洗后，采用无水硫酸钠干燥法进行干燥，再蒸去溶剂，油泵拉干，得白色固体，即2，3‑二甲基丁烯二酰亚胺；(2)制备N‑乙氧羰基‑2，3‑二取代丁烯二酰亚胺A.0‑5℃温度下，将0.9‑1.1mL氯甲酸乙酯逐滴加入到2，3‑二甲基丁烯二酰亚胺和N‑甲基吗啉的乙酸乙酯混合液中，室温反应4‑6h；其中，乙酸乙酯混合液的体积为19‑21mL，2，3‑二甲基丁烯二酰亚胺的含量为0.9‑1.1g，N‑甲基吗啉的含量为0.9‑1.1mL；B.反应完全，对反应产物先后进行水洗、饱和食盐水洗、稀盐酸洗，接着采用无水硫酸钠干燥，蒸干后得无色液体，即N‑乙氧羰基‑2，3‑二取代丁烯二酰亚胺。...

【技术特征摘要】
1.一种高纯度的N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺的合成方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)制备2，3-二甲基丁烯二酰亚胺A.将1.0-1.2g3，4-二甲基呋喃-2，5-二酮溶于10-12mLDMF中，冰浴下加入17-19mL六甲基二硅氮烷HMDS和1.7-1.9mL甲醇，加毕室温反应1-3h，旋去溶剂；B.加入4-6mLDMF、17-19mLHMDS和1.7-1.9mL甲醇反应7-9h，再加入65-75mL水、45-55mL乙酸乙酯进行萃取，萃取2-4次；C.合并有机相，并对萃取液进行水洗、饱和食盐水洗后，采用无水硫酸钠干燥法进行干燥，再蒸去溶剂，油泵拉干，得白色固体，即2，3-二甲基丁烯二酰亚胺；(2)制备N-乙氧羰基-2，3-二取代丁烯二酰亚胺A.0-5℃温度下，将0.9-1.1mL氯甲酸乙酯逐滴加入到2，3-二甲基丁烯二酰亚胺和N-甲基吗啉的乙酸乙酯混合液中，室温反应4-6h；其中，乙酸乙酯混合液的体积为19-21mL，2，3-二甲基丁烯二酰亚胺的含量为0.9-1.1g，N-甲基吗啉的含量为0.9-1.1mL；B.反应完全，对反应产物先后进行水洗、饱和食盐水洗、稀盐酸洗，接着采用无水...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈太杰，冯依玲，徐衡，王志远，严达，黄荣谊，
申请(专利权)人：安庆师范大学，
类型：发明
国别省市：安徽,34