The invention relates to the field of genetic diversity evaluation method, in particular to the genetic diversity evaluation method of sheep resource population. It includes the following steps: A. collecting sheep blood samples; B. extracting genomic DNA from blood samples; C. screening 30 pairs of microsatellite marker primers in the microsatellite marker database, distributing on 26 pairs of autosomal and X sex chromosomes of sheep, and verifying the primer sequence through the NCBI database. The microsatellite markers were 5 ROX, 5 6 FAM (FITC). 5. TAMRA and 5. HEX were used for fluorescent markers; D. PCR amplification and microsatellite marker allele typing; E. statistical analysis and genetic diversity evaluation of resource population. The invention comprehensively and systematically analyzes and evaluates the genetic diversity of the sheep resource population, provides a theoretical basis at the molecular level for the development and utilization of the sheep resource population, improves the comprehensiveness of the evaluation, and saves the cost.
【技术实现步骤摘要】
绵羊资源群体的遗传多样性评价方法
本专利技术涉及遗传多样性评价方法领域,尤其是绵羊资源群体的遗传多样性评价方法。
技术介绍
生物多样性(biodiversity)是生物多样性是指地球上所有生物(动物、植物、微生物等)、它们所包含的基因以及由这些生物与环境相互作用所构成的生态系统的多样化程度,包括物种多样性、遗传多样性和生态系统多样性。遗传多样性可以表现在多个层次上,如分子、细胞、个体等,在生物的长期演化过程中,遗传物质的改变(或突变)是产生遗传多样性的根本原因,即染色体数目和结构的变化及基因位点内部的核苷酸的变化,在表型上表现出各种各样的形态。遗传多样性是生物多样性的重要组成部分,种内个体间的差异是因生活环境的差异和经历长时间的选择、突变的结果,如果遗传多样性越高,则种群内可提供环境选择的基因就愈多,对于环境的适应能力就越强,有利于种群的生存和演化。绵羊(Ovisaries)的资源群体是在一定的地域、环境和生态区域内,经过长期的自然选和人民群众的人工选择而逐步形成的具有一定生物学特性的群体。遗传标记常用于对动植物群体的遗传多样性评价,形态标记是最早使用的一种标记,能够用肉眼识别出来的显示遗传多样性的外观特征,如绵羊的体高、体长、毛色等,早期的绵羊育种曾利用角的有无、被毛颜色等作为选择的依据,但由于形态标记数量少,受环境、生理时期的影响较大,在实际应用中受到很大的限制。细胞学标记是采用染色体的结构和数量特征来显示遗传多态性,如染色体的核型、带型以及数目等,随着分子水平的发展和深入,逐渐取代了细胞学标记。蛋白质标记有酶蛋白质和非酶蛋白质两种,常用的有血红蛋白多 ...
【技术保护点】
1.一种绵羊资源群体的遗传多样性评价方法,其特征在于:包括以下步骤:a.采集绵羊的血液样品;b.提取血液样品的基因组DNA;c.在微卫星标记数据库中筛选30对微卫星标记引物,分布于绵羊26对常染色体和X性染色体,并通过NCBI数据库验证引物序列,微卫星标记采用5‑ROX、5'6‑FAM(FITC)、5‑TAMRA和5‑HEX进行荧光标记;d.PCR扩增及微卫星标记的等位基因分型;e.统计分析及资源群体的遗传多样性评价,采用软件分析微卫星标记的杂合度和多态信息含量,按照衡量基因变异程度高低的多态信息含量指标,即PIC>0.50的标记为高度多态信息位点,PIC
【技术特征摘要】
1.一种绵羊资源群体的遗传多样性评价方法,其特征在于:包括以下步骤:a.采集绵羊的血液样品;b.提取血液样品的基因组DNA;c.在微卫星标记数据库中筛选30对微卫星标记引物,分布于绵羊26对常染色体和X性染色体,并通过NCBI数据库验证引物序列,微卫星标记采用5-ROX、5'6-FAM(FITC)、5-TAMRA和5-HEX进行荧光标记;d.PCR扩增及微卫星标记的等位基因分型;e.统计分析及资源群体的遗传多样性评价,采用软件分析微卫星标记的杂合度和多态信息含量,按照衡量基因变异程度高低的多态信息含量指标,即PIC>0.50的标记为高度多态信息位点,PIC<0.25的标记为低度多态信息位点,0.25<P<0.50的标记为中度多态信息位点,绵羊群体30个微卫星标记的遗传多态信息含量为0.3338~0.8660,其中7个标记为中度多态信息位点,23个标记为高度多态信息位点,群体的平均多态信息含量为0.6257,来表明绵羊资源群体具有丰富的遗传多态性。2.根据权利要求1所述的绵羊资源群体的遗传多样性评价方法,其特征在于:在步骤a中,所述采集步骤为:采用颈静脉采布拖黑绵羊的血3~4mL,注入加有抗凝剂肝素钠的一次性真空采血管中,随后将采血管180°颠倒混匀5-6次,置于低温保存箱中运输,带回实验室-20°保存备用。3.根据权利要求1所述的绵羊资源群体的遗传多样性评价方法,其特征在于:在步骤b中,所述提取DNA的步骤为:1)取血样200μL,加入到1.5mL的EP管中,...
【专利技术属性】
技术研发人员:周明亮,杨平贵,庞倩,陈明华,蒋世海,
申请(专利权)人:四川省草原科学研究院,
类型:发明
国别省市:四川,51
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