一种双黄酮类化合物及其用途制造技术

本发明专利技术一种双黄酮类化合物及其用途，属于天然药物化学和药物治疗学领域，具体涉及一种C‑3′‑C‑8′′型双黄酮类化合物或其药学上可接受的盐，含有这些化合物的药用组合物以及它们的医药用途，特别是在作为铂类药物肿瘤化疗药物增敏剂的应用，以及对于BRCA基因缺陷型晚期卵巢癌的治疗作用。

【技术实现步骤摘要】
一种双黄酮类化合物及其用途
本专利技术涉及一种C-3′-C-8″型双黄酮类化合物，及其在治疗肝癌、肺癌化疗铂类药物增敏方面的药物中的应用，及对于BRCA基因缺陷型晚期卵巢癌的治疗作用，属于药学

技术介绍
恶性肿瘤严重危害人类的生命健康，已成为当今疾病致死亡的主要原因之一。目前恶性肿瘤的主要治疗手段有手术治疗、放疗和化疗等。对于被诊断为晚期肿瘤的患者和已经发生转移的患者来说，化疗是一个较好的选择。临床医生通过调节用药剂量可以优化得到最大的疗效和最小的毒性，帮助患者延长生存时间和提高预后生活质量。然而，肿瘤细胞的耐药性的产生导致肿瘤细胞对化疗药物的敏感性下降，尤其是铂类药物，大大限制了化疗的治疗的效果。为了增加肿瘤对化疗药物，尤其是铂类药物的敏感性，研究者们一直在寻找有效的增敏剂。1981年，Tsuruo首次报道了钙通道阻滞剂异搏定(Verapami1)和钙调蛋白抑制剂三氟拉嗪(TFP)在体外和体内实验中均能增强耐药小鼠白血病P388/VCR细胞对长春新喊(vincristine，VCR)的敏感性。在随后30年的研究中，新的化疗增敏剂不断被发现和研究，但较高的细胞毒性一直是困扰该研究开发的一大问题。因此，开发毒性较小、增敏效果更强的化疗增敏剂仍然是肿瘤药物研究的热点之一。在新一代化疗增敏剂的研究过程中，从天然产物中筛选高效低毒的化疗增敏剂日益被医学界所重视并逐渐成为研究的热点。在细胞的生长过程中，DNA不可避免地会受到外源或内源因素的作用产生DNA损伤。因此，细胞必须建立多种DNA损伤发现和修复体系，使受损的DNA得到及时的修复，以维持细胞的正常生理功能。2015年诺贝尔化学奖获得者托马斯·林达尔提出的“碱基切除修复(Baseexcisionrepair,BER)”机制已成为共识。被称为DNA修复酶的聚二磷酸腺苷核糖聚合酶[poly(ADP-ribose)polymerase，PARP]，密切参与DNA单链损伤的碱基切除修复，维持基因组稳定，近年年来已成为肿瘤治疗领域的热门药物发现靶点。铂类药物的作用机制可分为4个步骤：跨膜转运、水合解离、靶向迁移、作用于DNA引起DNA复制障碍，从而抑制癌细胞的分裂。因此，抑制PAPR-1活力可以显著增加铂类药物的敏感性，可用于铂类药物化疗增敏剂的开发应用。此外，在正常情况下，DNA双链断裂可以被同源重复修复机制进行修复，其中关键基因为BRCA1和BRCA2。如果BRCA基因出现突变导致BRCA1和BRCA2蛋白失去其功能，就会导致同源重组修复机制的缺陷；一方面可以导致基因突变导致癌变发生，另一方面使得这种癌细胞没有正常细胞有的同源重组修复机制，进而对PAPR-1抑制剂比较敏感。卵巢癌发病隐匿，且缺乏有效的筛选及早期诊断措施，约70％患者在确诊时已属晚期。研究发现BRCA基因突变与卵巢癌的发生关系密切，在2016年的国际妇癌协会双年会上中国首个多中心卵巢癌患者BRCA突变研究数据公布。数据显示我国卵巢癌患者BRCA突变率为28.45％，其中BRCA1突变率20.82％，BRCA2突变率为7.63％。因此，PARP-1抑制剂单独使用也可以应用于治疗BRCA基因缺陷型晚期卵巢癌，效果也较为明显。江南卷柏(SelaginellaMoellendorfiiHieron.)属于卷柏科(Selaginellaceae)卷柏属(Selaginella)植物，别名石柏、岩柏草、黄疸卷柏，主要分布于我国长江流域以及长江以南各地，北至秦岭山区。江南卷柏具有清热解毒、止血生肌、抗癌等功能，临床上用于治疗原发性血小板减少性紫癜、肺炎、癌症、眼结膜炎、急性扁桃体炎和乳腺炎等。然而，该植物在增加卡铂、顺铂等铂类药物肿瘤治疗敏感性方面及治疗卵巢癌方面未见文献报道。目前为止，江南卷柏中报道的化学成分主要有双黄酮类，木脂素类及生物碱等类型化合物，其中所含双黄酮类成分具有显著的抗病毒及抗肿瘤活性，为江南卷柏特征活性成分。有公开专利表明，穗花杉双黄酮是中药卷柏治疗癌症的药效成分，为其临床应用提供了科学依据，具有无成瘾性、用量小的特点。但是，并未见江南卷柏中双黄酮类成分对PARP-1抑制作用、铂类药物增敏剂及治疗BRCA基因缺陷型晚期卵巢癌的报道。本课题组对江南卷柏进行了较为系统的化学成分研究，采用色谱及波谱方法分离鉴定了穗花杉双黄酮(1)、银杏双黄酮(2)、去甲基银杏双黄酮(3)、罗汉松双黄酮A(4)、7-O-甲基穗花杉双黄酮(5)、榧黄素(6)、异银杏双黄酮(7)、芹菜素(8)、5-carboxymethyl-7,4′-dihydroxyflavone(9)、5-carboxymethyl-7,4′-dihydroxyflavanone(10)等单体化合物。对所分离化合物进行PARP-1酶活力测试，结果发现，C-3′-C-8″类双黄酮化合物(1-7)可以显著抑制PARP-1活力(IC50值为0.198μM-0.512μM)，而简单黄酮(8)及其他连接方式的双黄酮化合物(9-10)对PARP-1的抑制作用较弱(IC50值为5.343μM-12.342μM)(表1)。采用MTT法测定受试化合物对人肺癌细胞株(A549)及人肝癌细胞株(HepG2)卡铂化疗增敏作用。结果显示，C-3′-C-8″类双黄酮化合物可以显著增强卡铂对癌细胞的损伤作用，而单黄酮(8)、及其他连接方式的双黄酮类化合物(9-10)无协同增敏作用(表2)。综上所述，C-3′-C-8″连接方式的双黄酮类化合物可以有效抑制PARP-1活力，增强卡铂对肝癌、肺癌细胞的敏感性，其中穗花杉双黄酮(1)效果最为明显，优选穗花杉双黄酮(1)为后续研究对象。为了进一步验证穗花杉双黄酮的化疗增敏作用，采用荷瘤小鼠(A549,HepG2)模型，结果显示穗花杉双黄酮口服给药(100mg/kg)可以有效增加卡铂对肝癌及肺癌肿瘤的抑制作用(图1、图2)。此外，如前文所述，PARP-1抑制剂单独使用可以治疗BRCA基因缺陷晚期卵巢癌，目前已经上市的PARP-1抑制剂均用于治疗晚期卵巢癌。因此，继续采用MTT法，考察穗花杉双黄酮对晚期卵巢癌细胞株Ovarian细胞存活率的影响。结果显示，穗花杉双黄酮可以显著降低Ovarian细胞存活率(图3)，这与文献报道的PARP-1抑制剂结果相似，提示穗花杉双黄酮可用于治疗晚期卵巢癌。
技术实现思路
目的：本专利技术提供一种C-3′-C-8″型双黄酮类化合物及医药用途。技术方案：为解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：一种双黄酮类化合物，为通式I所示的化合物，或其药学上可接受的盐：其中：R1、R2、R3、R4为氢或甲基。作为优选方案，所述化合物选自：穗花杉双黄酮(化合物1)、银杏双黄酮(化合物2)、去甲基银杏双黄酮(化合物3)、罗汉松双黄酮A(化合物4)、7-O-甲基穗花杉双黄酮(化合物5)、榧黄素(化合物6)、异银杏双黄酮(化合物7)。对不同铂类药物在肝癌、肺癌的增敏作用，及其单独用于治疗晚期卵巢癌的应用。更为优选的，所述化合物为穗花杉双黄酮。另一方面，本专利技术提供一种药物组合物，其中含有治疗有效量的一种或多种所述的双黄酮类化合物或其药学上可接受的盐。以及所述的药物组合物在制备肿瘤铂类药物增敏剂药物及晚期卵巢癌中的应用。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种双黄酮类化合物，为通式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：

【技术特征摘要】
1.一种双黄酮类化合物，为通式I所示的化合物或其药学上可接受的盐：其中：R1、R2、R3、R4为氢或甲基。2.根据权利要求1所述的双黄酮类化合物，其特征在于，所述化合物选自：穗花杉双黄酮、银杏双黄酮、去甲基银杏双黄酮、罗汉松双黄酮A、7-O-甲基穗花杉双黄酮、榧黄素、异银杏双黄酮。3.根据权利要求1所述的双黄酮类化合物，其特征在于：所述化合物为穗花杉双黄酮。4.权利要求1-3任一项所述的双黄酮类化合物作为肿瘤化疗铂类药物增敏剂的应...

【专利技术属性】
技术研发人员：汪豪，胡晓龙，熊非，叶文才，
申请(专利权)人：中国药科大学，
类型：发明
国别省市：江苏,32