一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法技术

技术编号:19000486 阅读:19 留言:0更新日期:2018-09-22 05:20
本发明专利技术涉及一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法,它包括以下步骤:(a)将邻苯二甲醇、二氯甲烷、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷混合后进行反应;过层析柱纯化得化合物II;(b)加入甲苯磺酰氨基甲酸甲酯、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯进行反应,浓缩后过柱纯化得到化合物III;(c)将所述化合物III溶于甲醇,降温至≤0℃,加入碳酸钾进行反应,加水淬灭;(d)浓缩过层析柱纯化得化合物V;(e)将所述化合物V溶于四氢呋喃,加入四丁基氟化铵溶液进行反应,加水淬灭;浓缩过层析柱纯化得化合物VI。实现了芳香八元环标记物成环中间体的合成路线的重新设计。

A synthetic method for hydroxyl derivatives of biomarkers of biomarkers

The invention relates to a synthesis method of hydroxyl derivatives, a cyclic intermediate of bio-orthogonal experimental markers, which comprises the following steps: (a) mixing phthalic alcohol, dichloromethane, imidazole and tert-butyl dimethyl chlorosilane for reaction; purifying compound II by chromatography column; (b) adding toluene sulfonyl carbamate methyl The ester, triphenylphosphine and diethyl azodicarbonate react and are concentrated and purified on a column to obtain compound III; (c) The compound III is dissolved in methanol, cooled to <0 C, reacted with potassium carbonate and quenched with water; (d) The compound V is purified on a concentrated column; (e) The compound V is dissolved in tetrahydrofuran. Compound VI was prepared by adding tetrabutylammonium fluoride solution and quenching with water. The synthetic route of aromatic eight membered ring labeled intermediate was redesigned.

【技术实现步骤摘要】
一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法
本专利技术属于生物检测标记领域,涉及一种芳香八元环,具体涉及一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法。
技术介绍
对活体生物大分子进行特异性标记是一项具有挑战性的工作,它要求这类化学反应能够在生理条件下高效特异地进行,不会与生物体系中存在的各种活性物质发生副反应。最近十几年开发的生物正交反应能够比较好地满足这些要求。它们在生物分子标记方面的应用拓展了科研工作者对细胞内生物体系的理解,即通过位点特异性引入生物正交官能团来进行选择性标记细胞内目标蛋白质以用于实现对细胞内生物体系的研究。芳香八元环是上述选择性标记细胞内目标蛋白质的常用物质,因此有必要设计能够缩短芳香八元环的反应路线以获得高产率的芳香八元环;而成环中间体是芳香八元环最核心的中间体。
技术实现思路
本专利技术目的是为了克服现有技术的不足而提供一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法。为达到上述目的,本专利技术采用的技术方案是:一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法,它包括以下步骤:(a)将邻苯二甲醇、二氯甲烷、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷混合后进行反应;加入饱和碳酸氢钠淬灭反应,分层,浓缩有机相,过层析柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于四氢呋喃,降温至≤0℃,加入甲苯磺酰氨基甲酸甲酯、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯进行反应,浓缩后过柱纯化得到化合物III;(c)将所述化合物III溶于甲醇,降温至≤0℃,加入碳酸钾进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩得化合物IV;(d)将所述化合物IV溶于四氢呋喃,加入化合物VIII和四丁基溴化铵进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩过层析柱纯化得化合物V;(e)将所述化合物V溶于四氢呋喃,加入四丁基氟化铵溶液进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩过层析柱纯化得化合物VI。优化地,步骤(d)中,所述化合物VIII通过以下步骤制得:将化合物A溶于二氯甲烷,降温至≤0℃,加入四溴化炭和三苯基膦进行反应;加入饱和碳酸氢钠淬灭,分层,水相用二氯甲烷提取多次后合并有机相,浓缩过层析柱纯化即可。优化地,步骤(b)中,分层获得的水相用二氯甲烷提取多次,合并有机相,浓缩后过层析柱纯化。由于上述技术方案运用,本专利技术与现有技术相比具有下列优点:本专利技术生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法,通过采用特定的合成步骤依次实现了化合物II、化合物III、化合物IV等化合物的合成而实现了芳香八元环标记物成环中间体的合成路线的重新设计,有利于工业化批量生产,具有较高的产率的纯度。附图说明附图1为本专利技术生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法的部分流程图。具体实施方式如图1所示的生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法,它包括以下步骤:(a)将邻苯二甲醇、二氯甲烷、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷混合后进行反应;加入饱和碳酸氢钠淬灭反应,分层,浓缩有机相,过层析柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于四氢呋喃,降温至≤0℃,加入甲苯磺酰氨基甲酸甲酯、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯进行反应,浓缩后过柱纯化得到化合物III;(c)将所述化合物III溶于甲醇,降温至≤0℃,加入碳酸钾进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩得化合物IV;(d)将所述化合物IV溶于四氢呋喃,加入化合物VIII和四丁基溴化铵进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩过层析柱纯化得化合物V;(e)将所述化合物V溶于四氢呋喃,加入四丁基氟化铵溶液进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩过层析柱纯化得化合物VI。步骤(d)中,所述化合物VIII优选通过以下步骤制得:将化合物A溶于二氯甲烷,降温至≤0℃,加入四溴化炭和三苯基膦进行反应;加入饱和碳酸氢钠淬灭,分层,水相用二氯甲烷提取多次后合并有机相,浓缩过层析柱纯化即可;化合物A的合成参考文献“Fluorine-18RadiolabelingandRadiopharmacologicalCharacterizationofaBenzodioxolylpyrimidine-basedRadiotracerTargetingtheReceptorTyrosineKinaseEphB4”ChemMedChem,7(11),1991-2003,S1991/1-S1991/14;2012。步骤(b)中,分层获得的水相用二氯甲烷提取多次,合并有机相,浓缩后过层析柱纯化。下面将结合对本专利技术优选实施方案进行详细说明:实施例1本实施例提供一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法,它包括以下步骤:(a)在250mL的三口瓶中加入邻苯二甲醇(5g,41.2mmo)、二氯甲烷(100mL)、咪唑(3.1g,45.4mmol)和叔丁基二甲基氯硅烷(6.0g,41.2mmol)混合形成反应液,在常温下搅拌3小时,反应完全;加入50mL饱和碳酸氢钠淬灭,分层,水相用二氯甲烷提取2次,合并有机相,浓缩,过层析柱纯化得到3.78g(36.4%,纯度为99.0%)化合物II;核磁和质谱数据如下:1HNMR(300MHz,CDCl3):δ7.39-7.28(m,4H),4.81(s,2H),4.68(s,2H),0.93(s,9H),0.14(s,6H);13CNMR(75MHz,CDCl3):δ139.7,138.6,129.4,128.6,128.3,127.9,64.8,64.0,26.0,18.4,-5.0.IR(neat,cm-1):3390,2929,2857,1471,1255,1185,1079,939,836,776.HRMS(FAB,matrix:3-nitrobenzylalcohol,positive):m/zcalcdforC14H15O2Si[M+H]+:253.1624,found:253.1622.;(b)在250mL的三口瓶中加入化合物II(3.78g,15.0mmol)、THF(100mL,即四氢呋喃),使化合物II溶解并降温至0℃;加入甲苯磺酰氨基甲酸甲酯(3.61g,15.8mmol)、三苯基膦(4.33g,16.5mmol)和偶氮二甲酸二乙酯(DEAD,7.5mL,40wt%甲苯溶液,1.65mmol);常温下搅拌4小时,TLC显示反应完全;水泵浓缩,过柱纯化得到6.89g化合物III(纯度为99.5%);核磁和质谱数据如下:1HNMR(300MHz,CDCl3):δ7.72(d,J=8.1Hz,2H),7.41-7.39(m,1H),7.29-7.24(m,5H),5.17(s,2H),4.83(s,2H),3.70(s,3H),2.44(s,3H),0.97(s,9H),0.12(s,6H);13CNMR(75MHz,CDCl3):δ153.0,144.6,137.9,136.0,134.6,129.1,128.5,127.5,127.3,127.0,126.2,63.5,54.0,47.2,2本文档来自技高网...
一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法

【技术保护点】
1.一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法,其特征在于,它包括以下步骤:(a)将邻苯二甲醇、二氯甲烷、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷混合后进行反应;加入饱和碳酸氢钠淬灭反应,分层,浓缩有机相,过层析柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于四氢呋喃,降温至≤0℃,加入甲苯磺酰氨基甲酸甲酯、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯进行反应,浓缩后过柱纯化得到化合物III;(c)将所述化合物III溶于甲醇,降温至≤0℃,加入碳酸钾进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩得化合物IV;(d)将所述化合物IV溶于四氢呋喃,加入化合物VIII和四丁基溴化铵进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩过层析柱纯化得化合物V;(e)将所述化合物V溶于四氢呋喃,加入四丁基氟化铵溶液进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩过层析柱纯化得化合物VI。

【技术特征摘要】
1.一种生物正交实验标记物成环中间体羟基衍生物的合成方法,其特征在于,它包括以下步骤:(a)将邻苯二甲醇、二氯甲烷、咪唑和叔丁基二甲基氯硅烷混合后进行反应;加入饱和碳酸氢钠淬灭反应,分层,浓缩有机相,过层析柱纯化得化合物II;(b)将所述化合物II溶于四氢呋喃,降温至≤0℃,加入甲苯磺酰氨基甲酸甲酯、三苯基膦和偶氮二甲酸二乙酯进行反应,浓缩后过柱纯化得到化合物III;(c)将所述化合物III溶于甲醇,降温至≤0℃,加入碳酸钾进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫酸钠干燥,浓缩得化合物IV;(d)将所述化合物IV溶于四氢呋喃,加入化合物VIII和四丁基溴化铵进行反应,加水淬灭;用乙酸乙酯提取多次后合并有机相,用无水硫...

【专利技术属性】
技术研发人员:倪润炎
申请(专利权)人:苏州金点生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏,32

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