The invention belongs to the field of microbial technology, in particular to a pyrrolidine 2 carboxylic acid extraction method. The following steps are taken: inoculate marine bacteria Arenibactersp.6A1 into fermentation medium and ferment and culture, and ferment liquid; adjust the fermentation broth to pH = 3~4, then extract the extract, extract the extract, dissolve the extract, sequentially carry out gel column chromatography and HPLC separation, and obtain pyrrolidine 2 carboxylic acid. The separation conditions of the HPLC include gradient elution with methanol/water mixed solvent, detection wavelength of 254 nm and collection time of liquid peak of 23.05 min. The pyrrole 2 carboxylic acid with high purity and antibacterial activity was obtained by this method, which provided a good basis for the industrial production of pyrrole 2 carboxylic acid.
【技术实现步骤摘要】
吡咯-2-羧酸的提取方法
本专利技术属于微生物
,具体涉及一种吡咯-2-羧酸的提取方法。
技术介绍
随着有害病菌耐药性问题越来越严重,对新型有效的抗菌类活性物质的开发愈显重要。从陆栖微生物中探索新型活性物质的难度越来越大,相对而言,海洋因其环境多样性和特殊性,成为更具发展前景的探索目标。海洋来源的细菌能产生各种具有抗菌活性的物质。研究较多的菌种有芽孢杆菌属Bacillussp.、弧菌属Vibriosp.、假单胞菌属Pseudomonassp.、黄杆菌属Flavobacteriumsp.等。李厚金等从大亚湾来源的假单胞菌属细菌中分离获得灵菌红素,其在体外能有效抑制革兰氏阳性菌(金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌)和病原真菌(白色念珠菌、近平滑念珠菌和隐球酵母菌)的生长;Tareq等报道了从海洋芽孢杆菌属(Bacillussp.109GGC020)中分离得到的4种新型脂肽化合物gageopeptidesA~D,该类化合物对1对金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌及铜绿假单胞菌等细菌显示出中等抗菌活性(MIC=8~64μg/ml)。Arenibacter属于拟杆菌门(Bacteroidetes)黄杆菌科(Flavobacteriaceae)的革兰氏阴性菌,该属细菌目前文献报导全部采集自海洋环境,来源包括海洋底泥、褐藻(Chordafilum)、绿藻(Ulvafenestrata)以及可食用海参(Apostichopusjaponicus)。文献报导Arenibacter能够合成多种特殊的糖苷酶,特别是高活性的beta-N-乙酰-氨基葡萄糖苷酶以及alpha-N-乙酰半乳糖 ...
【技术保护点】
1.一种吡咯‑2‑羧酸的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:将海洋细菌Arenibactersp.6A1接种到发酵培养基中进行发酵培养,得到发酵液;调节所述发酵液至pH=3~4,然后进行萃取处理得到萃取物;将所述萃取物溶解,依次进行凝胶柱层析和HPLC分离,得到吡咯‑2‑羧酸;其中,所述HPLC分离的条件包括:用甲醇/水混合溶剂进行梯度洗脱,检测波长为254nm,收集液相峰的时间为23.05min。
【技术特征摘要】
1.一种吡咯-2-羧酸的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:将海洋细菌Arenibactersp.6A1接种到发酵培养基中进行发酵培养,得到发酵液;调节所述发酵液至pH=3~4,然后进行萃取处理得到萃取物;将所述萃取物溶解,依次进行凝胶柱层析和HPLC分离,得到吡咯-2-羧酸;其中,所述HPLC分离的条件包括:用甲醇/水混合溶剂进行梯度洗脱,检测波长为254nm,收集液相峰的时间为23.05min。2.如权利要求1所述的吡咯-2-羧酸的提取方法,其特征在于,所述海洋细菌Arenibactersp.6A1接种到发酵培养基之前,先在2216E固体培养基上经复苏处理。3.如权利要求1所述的吡咯-2-羧酸的提取方法,其特征在于,所述发酵培养基为2216E液体培养基。4.如权利要求1所述的吡咯-2-羧酸的提取方法,其特征在于,所述发酵培养的条件为:转速180rpm,温度28℃,时间96h。5.如权利要求1所述的吡咯-2-羧酸的提取方法,其特征在于,所述萃取处理的步骤包括:以...
【专利技术属性】
技术研发人员:王立岩,伍嘉慧,李晓帆,林培玲,
申请(专利权)人:深圳大学,
类型:发明
国别省市:广东,44
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