一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法技术

本发明专利技术属于生物学分析领域，提供一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法。其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有9.6‑12g的Tris碱、4.89‑6.11g的硼酸、0.186‑0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.40‑3.67g的KH2PO4。使用时，在室温下，每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶，即得到1L 1×浓度的电泳缓冲液。本发明专利技术配制电泳缓冲液时省去了常规方法的称量多项药品、调节溶液pH值的步骤，使得缓冲液的配制过程在5‑10分钟内完成，提高核酸电泳实验效率。

A prefabricated test powder for rapid preparation of nucleic acid electrophoresis buffer based on boric acid and its usage

The invention belongs to the field of biological analysis, and provides a prefabricated test powder for rapidly preparing nucleic acid electrophoretic buffer based on boric acid and a use method thereof. Its composition and weight are as follows: based on the electrophoretic buffer of 1 L double (1 x) concentration, each sample contains 9.6_12 g Tris base, 4.89_6.11 g boric acid, 0.186_0.744 g Na2EDTA.2H2O, 3.40_3.67 g KH2PO4. When in use, at room temperature, each part of the test powder and 1L deionized water are fully mixed and soluble, that is, the electrophoretic buffer of 1L 1 x concentration is obtained. The preparation of the electrophoretic buffer eliminates the steps of weighing a plurality of drugs and adjusting the pH value of the solution by the conventional method, so that the preparation process of the buffer is completed within 5 to 10 minutes, thereby improving the efficiency of the nucleic acid electrophoresis experiment.

【技术实现步骤摘要】
一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法
本专利技术属于生物学分析领域，提供一种生物化学或分子生物学实验分析中，用于核酸电泳缓冲液快速制备的预制试粉及其使用方法。
技术介绍
电泳检测在核酸的生化和分子生物学分析中，具有重要地位，是核酸质量和浓度检测的常规方法之一，是分析DNA和RNA片段大小、质量浓度和纯度的重要依据。传统的核酸电泳主要使用醋酸盐缓冲体系TAE(Tris-Aceticacid-EDTA)或硼酸盐缓冲体系TBE(Tris-Boricacid-EDTA)。相对于TAE缓冲液，TBE缓冲液具有更好的核酸稳定性和更长的电泳寿命，但不论是TAE还是TBE缓冲液，都需要实验人员自主配制，包括称量多项药品和调节pH值等步骤，浪费较多人力和时间。急需开发一种简单、快速、准确配制固定浓度和pH值的电泳缓冲液方法，以提高电泳实验整体效率。本专利技术针对以上实验需求和方法不足，开发出一种快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，该试粉为改良的TBE缓冲液，使用Tris碱、硼酸、Na2EDTA、以及KH2PO4为主成分，按一定比例与去离子水混合互溶后，可以在5-10分钟内，快速制备核酸电泳缓冲液，减少电泳实验准备时间，提高电泳实验效率。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供了一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉。该试粉的主要成分包括Tris碱(三羟甲基氨基甲烷)、硼酸(H3BO3)、Na2EDTA(乙二胺四乙酸二钠)、以及KH2PO4(磷酸二氢钾)。使用该试粉所制得的电泳缓冲液，是传统TBE(Tris-Boricacid-EDTA)即硼酸盐缓冲液的改良体系。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有9.6-12g的Tris碱、4.89-6.11g的硼酸、0.186-0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.40-3.67g的KH2PO4。由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱80-100mmol/L、硼酸80-100mmol/L、Na2EDTA0.5-2mmol/L，KH2PO425-27mmol/L，pH值稳定在7.8-8.2之间。试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。所述的Na2EDTA·2H2O和KH2PO4可以被其他含不同结晶水的Na2EDTA所代替，但Na2EDTA和KH2PO4的质量浓度保持不变。所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，预制试粉的各组成成分及重量优选为：每份预制试粉中含有10.8g的Tris碱、5.5g的硼酸、0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.53g的KH2PO4；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱90mmol/L、硼酸90mmol/L、Na2EDTA1mmol/L，KH2PO426mmol/L，缓冲液pH值在8.0-8.1之间。一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉的使用方法如下：在室温下，每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶，即得到1L1×浓度的电泳缓冲液。此过程无需称量试粉，无需调节缓冲液pH值，操作简单快捷。一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉的制备方法如下：所述的预制试粉可进行放大或缩小规模的制备，以1L1×浓度电泳缓冲液试粉中各组分质量份数为基准，根据目标缓冲液体积和浓度的乘积，计算得到基准中各组分质量的放大或缩小倍数，称量各组分且均匀混合后，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。举例如下：如配备1L10×浓度电泳缓冲液试粉，则将基准中各组分质量放大至10倍，如配备5L0.5×浓度电泳缓冲液试粉，则将基准中各组分质量放大至2.5倍。所述的预制试粉还可以整体制备，按照所述组分的质量比例，称量且均匀混合各组分，储存于塑料容器或袋中。在配制电泳缓冲液时，根据待配缓冲液的浓度和体积的乘积，先计算所需预制试粉质量，再称量预制试粉，最后与待配缓冲液体积的去离子水充分混合，制得电泳缓冲液。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：本专利技术提供的预制试粉为改良的TBE缓冲液，提供的预制试粉的使用过程简便快速，使用Tris碱、硼酸、Na2EDTA、以及KH2PO4为主成分，按一定比例与去离子水混合互溶后，省去了常规方法的称量多项药品、调节溶液pH值的步骤，使得缓冲液的配制过程在5-10分钟内完成，快速制备核酸电泳缓冲液，减少电泳实验准备时间，提高电泳实验效率。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术做进一步说明。实施例1基于配制1L1×浓度的核酸电泳缓冲液，制备预制试粉，每份试粉含有10.8g的Tris碱、5.5g的硼酸、0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.53g的KH2PO4。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的电泳缓冲液(Tris碱90mmol/L、硼酸90mmol/L、Na2EDTA2mmol/L，KH2PO426mmol/L，pH值8.02)，电泳5小时后，电泳槽中正极pH值8.0，负极pH值8.4，核酸样品稳定，紫外成像良好。实施例2对实施例1中的试粉配方略加调整，基于配制1L1×浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有10.8g的Tris碱、5.5g的硼酸、0.372g的Na2EDTA·2H2O、3.4g的KH2PO4。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的电泳缓冲液(Tris碱90mmol/L、硼酸90mmol/L、Na2EDTA1mmol/L，KH2PO425mmol/L，pH值8.03)，电泳5小时后，电泳槽中正极pH值8.1，负极pH值8.3，核酸样品稳定，紫外成像良好。以上所述实施例仅表达了本专利技术的实施方式，但并不能因此而理解为对本专利技术专利的范围的限制，应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些均属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的预制试粉中各组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有9.6‑12g的Tris碱、4.89‑6.11g的硼酸、0.186‑0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.40‑3.67g的KH2PO4；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱80‑100mmol/L、硼酸80‑100mmol/L、Na2EDTA 0.5‑2mmol/L，KH2PO4 25‑27mmol/L，pH值稳定在7.8‑8.2之间；试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式储存。

【技术特征摘要】
1.一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的预制试粉中各组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉含有9.6-12g的Tris碱、4.89-6.11g的硼酸、0.186-0.744g的Na2EDTA·2H2O、3.40-3.67g的KH2PO4；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱80-100mmol/L、硼酸80-100mmol/L、Na2EDTA0.5-2mmol/L，KH2PO425-27mmol/L，pH值稳定在7.8-8.2之间；试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式储存。2.根据权利要求1所述的一种基于硼酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，预制试粉的各组成成分及重量优选为：...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐卫平，王文霞，刘玉婷，许建强，佟慧妍，穆罕默德·拉塞尔，杨骁婧，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21