一种辅助癫痫诊断的标志物及其检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种辅助癫痫诊断的标志物及其检测试剂盒，涉及癫痫诊断领域。本发明专利技术的研究通过对一个癫痫家系患者的成员的KCNT1基因的检测发现，该家系中患有癫痫的成员的KCNT1基因上具有突变c.G1955T，该基因突变导致其对应的KCNT1蛋白的第652位氨基酸由谷氨酸(G)变异为缬氨酸(V)，为错义突变。含有c.G1955T突变的核酸分子，或者含有突变p.G652V的蛋白均可以作为癫痫诊断的生物标志物，从分子水平上为癫痫的诊断提供一种快速、可靠的检测辅助标记物。

A marker for assisting epilepsy diagnosis and its detection kit

The invention discloses a marker for assisting epilepsy diagnosis and a detection kit thereof, which relates to the field of epilepsy diagnosis. The KCNT1 gene of a member of a family with epilepsy was detected to have a mutation C. G1955T on the KCNT1 gene of the member with epilepsy. The mutation caused the 652 amino acid of the corresponding KCNT1 protein to change from glutamate (G) to valine (V) and become a missense mutation. The nucleic acid molecule containing C. G1955T mutation or the protein containing P. G652V mutation can be used as a biomarker for epilepsy diagnosis, providing a rapid and reliable auxiliary marker for the diagnosis of epilepsy at the molecular level.

【技术实现步骤摘要】
一种辅助癫痫诊断的标志物及其检测试剂盒
本专利技术涉及癫痫诊断领域，具体而言，涉及一种辅助癫痫诊断的标志物及其检测试剂盒。
技术介绍
癫痫是慢性反复发作性短暂脑功能失调综合征。以脑部神经元高度同步化异常放电引起反复痫性发作为特征。癫痫是神经系统常见疾病之一，患病率仅次于脑卒中。癫痫的发病率与年龄有关。一般认为1岁以内患病率最高，1～10岁以后逐渐降低。我国癫痫患者男女之比为(1.15-1.7):1。癫痫病因极其复杂，可分三大类，并存在多种影响发病的因素：1.特发性癫痫可疑遗传倾向且无其他明显病因，常在特定年龄段起病，有特征性临床及脑电图表现，诊断较明确。2.症状性癫痫中枢神经系统病变影响结构或功能等，如染色体异常、局灶性或弥漫性脑部疾病，以及某些系统性疾病所致。(1)局限性或弥漫性脑部疾病①先天性异常胚胎发育中各种病因导致脑穿通畸形、小头畸形、先天性脑积水胼胝体缺如及大脑皮质发育不全，围生期胎儿脑损伤等；②获得性脑损伤如脑外伤，颅脑手术后，脑卒中后，颅内感染后，急性酒精中毒；③产伤所致新生儿癫痫发生率约为1％，分娩时合并产伤多伴脑出血或脑缺氧损害，新生儿合并脑先天发育畸形或产伤，癫痫发病率高达25％；④感染包括中枢神经系统细菌、病毒、真菌、寄生虫、螺旋体感染及AIDS神经系统并发症等；⑤脑血管疾病如脑动静脉畸形、脑梗死和脑出血等；⑥颅内原发性肿瘤如神经胶质瘤、脑膜瘤等；⑦遗传代谢性疾病如结节性硬化、脑-面血管瘤病、苯丙酮酸尿症等；⑧神经系统变性疾病如Alzheimer病、Pick病等约1/3的患者合并癫痫发作。(2)系统性疾病①缺氧性脑病如心搏骤停、CO中毒窒息、麻醉意外和呼吸衰竭等可引起肌阵挛性发作或全身性大发作；②代谢性脑病如低血糖症，其他代谢及内分泌障碍如高血糖症、低钙血症、低钠血症，以及尿毒症、肝性脑病和甲状腺毒血症等均可导致癫痫发作；③心血管疾病如心脏骤停、高血压脑病等；④热性惊厥热性发作；⑤子痫；⑥中毒如酒精、异烟肼、卡巴唑等药物及铅、铊等重金属中毒。3.隐源性癫痫较多见，临床表现提示症状性癫痫，但未找到明确病因，可在特殊年龄段起病，无特定临床和脑电图表现。癫痫的临床表现有以下：1.全面强直-阵挛发作(大发作)系指全身肌肉抽动及意识丧失的发作。以产伤、脑外伤、脑瘤等较常见。强直-阵挛发作可发生在任何年龄，是各种癫痫中最常见的发作类型。其典型发作可分为强直期、阵挛期、恢复期三个临床阶段。发作期间脑电图为典型的爆发性多棘波和棘-慢波综合，每次棘-慢波综合可伴有肌肉跳动。2.单纯部分发作是指脑的局部皮质异常放电而引起的与该部位的功能相对应的症状，发作时意识始终存在，包括运动、感觉、自主神经、精神症状及体征。分为四组：①伴运动症状者；②伴躯体感觉或特殊感觉症状者；③伴自主神经症状和体征者；④伴精神症状者。3.复杂部分发作习惯上又称精神运动性发作，伴有意识障碍。先兆多在意识丧失前或即将丧失时发生，发作后不能或部分不能回忆发作细节。4.失神发作(小发作)其典型表现为意识障碍，而不伴先兆或发作后症状。5.癫痫持续状态是指单次癫痫发作超过5分钟，或者短期内癫痫频繁发作，以致患者尚未从前一次发作中完全恢复而又有另一次发作。癫痫持续状态是一种需要抢救的急症。癫痫的治疗可分为控制发作、病因治疗、外科治疗、一般卫生及预防五个方面。其中最重要的是控制发作，目前以药物治疗为主。临床上根据癫痫发作类型选用抗癫痫药物，一旦找到可以完全控制发作的药物和剂量，就应不间断地应用。一般应于发作完全控制后，如无不良反应再继续服用3～5年，方可考虑逐渐停药。目前多主张用单药治疗，确认单药治疗失败后，方可加用第2种药物。如失神发作或肌阵挛发作无法用单药控制者，可合用乙琥胺和丙戊酸钠，或其一加用苯二氮类。对合并多种发作类型者可以根据发作类型合理联合用药，但以不超过3种药物为宜。用药宜从小剂量开始，然后逐渐增量，以既能控制发作，又不产生毒性反应的最小有效剂量为宜。换药宜采取先加用新药及后递减旧药的原则。不能骤然停药。有些器质性脑病的癫痫患者可能需要终身服药；有人主张发病年龄大于30岁者需谨慎停药，因其停药后复发率较高，需长期服药或终身服药。但仍有10％～15％患者难以控制发作，可以采用外科治疗。在预防方面：1.预防癫痫病的发生，应详细地进行家系调查，了解患者双亲同胞和近亲中是否有癫痫发作及其发作特点，对能引起智力低下和癫痫的一些严重遗传性疾病，应进行产前诊断或新生儿期过筛检查，以决定终止妊娠或早期进行治疗。防止分娩意外，新生儿产伤是癫痫发病的重要原因之一，避免产伤对预防癫痫有重要意义。2.对癫痫患者要及时诊断，及早治疗，治疗越早脑损伤越小，复发越少，预后越好。去除或减轻引起癫痫的原发病如颅内占位性疾病、代谢异常、感染等，对反复发作的病例也有重要意义。3.癫痫是一种慢性疾病，可迁延数年、甚至数十年之久，因而可对患者身体、精神、婚姻以及社会经济地位等，造成严重的不良影响。患者在家庭关系、学校教育和就业等方面的不幸和挫折、文体活动方面的限制等，可使患者产生耻辱感和悲观心理，从而严重影响患者的身心发育，这就要求社会各界对癫痫患者给予理解和支持。早诊断早治疗是防治癫痫的有效方法，但目前缺乏癫痫诊断相关的标志物。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种用于辅助癫痫诊断的生物标志物，该生物标志物可以用于辅助癫痫的诊断，为癫痫的诊断提供一种新的思路。本专利技术的另一目的在于提供上述生物标志物的应用。本专利技术的另一目的在于提供一种辅助癫痫诊断的试剂盒。本专利技术的另一目的在于提供一种用于辅助癫痫诊断的基因芯片。本专利技术是这样实现的：第一方面，本专利技术提供了一种辅助癫痫诊断的生物标志物，其为核酸分子，其相对于正常KCNT1的编码序列具有突变c.G1955T。从功能及结构角度来看，钾离子通道是电压门控离子通道中最复杂的一类。其复杂多样的功能包括：调控神经递质释放、心率、胰岛素释放、神经元兴奋性、上皮电解质转运、平滑肌收缩以及细胞体积。KCNT1基因编码钙离子钾离子通道亚单位，被认为在离子电导与发育信号通路中起作用，该基因的突变会引起早发型幼儿癫痫脑病、婴儿恶性游走性部分性癫痫发作以及常染色体显性遗传夜间额叶癫痫。可变剪切可产生多种转录本变体。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述标志物的碱基序列如SEQIDNO.1所示。本专利技术的研究通过对一个癫痫家系患者的成员的KCNT1的检测测序发现，该家系中患有癫痫的成员的KCNT1上具有突变c.G1955T，该基因突变导致其对应的KCNT1蛋白的第652位氨基酸由谷氨酸(G)变异为缬氨酸(V)，为错义突变。该变异不属于多态性位点，在人群中发生频率极低。在HGMD专业版数据库中未见报道。经家系验证分析，受检人(图1中4号成员)之母(图1中3号成员)该位点无变异，受检人之父(图1中2号成员)该位点杂合变异，受检人之叔(图1中1号成员)该位点杂合变异。因此，含有c.G1955T突变的核酸分子即相对于正常KCNT1的编码序列具有突变c.G1955T的核酸片段，或者含有突变p.G652V的蛋白均可以作为癫痫诊断的生物标志物，从分子水平上为癫痫的诊断提供一种快速、可靠的检测辅助标记物。第二方面，本专利技术提供了一种辅助癫本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种辅助癫痫诊断的生物标志物，其特征在于，其为核酸分子，其相对于正常KCNT1的编码序列具有突变c.G1955T。

【技术特征摘要】
1.一种辅助癫痫诊断的生物标志物，其特征在于，其为核酸分子，其相对于正常KCNT1的编码序列具有突变c.G1955T。2.根据权利要求1所述的辅助癫痫诊断的生物标志物，其特征在于，所述标志物的碱基序列如SEQIDNO.1所示。3.一种辅助癫痫诊断的生物标志物，其特征在于，其为蛋白或多肽，其相对于正常KCNT1蛋白具有突变p.G652V。4.根据权利要求3所述的辅助癫痫诊断的生物标志物，其特征在于，所述标志物的氨基酸序列如SEQIDNO.2所示。5.检测权利要求1或2所述的标志物的引物或探针、或检测权利要求3或4所述的生物标志物的抗体在制备癫痫辅助诊断试剂盒、癫痫产前诊断试剂盒或新生儿癫痫筛查试剂盒中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述探针相对于...

【专利技术属性】
技术研发人员：田鑫，王学峰，王唯，肖飞，阳勇，马远林，胡以达，徐馨，谷万杰，杨艺，
申请(专利权)人：重庆医科大学附属第一医院，
类型：发明
国别省市：重庆,50