一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法，包括采用超声波协同超临界CO2萃取以及高压液相色谱分离对纯度为95％左右的雷公藤内酯醇提取物进行纯化，使其纯度达到99％以上；然后将纯度为99％以上的雷公藤内酯醇纯化提取物制备成缓释微胶囊。本发明专利技术减少了杂质对雷公藤内酯醇提取物在药物治疗中的影响，有助于研究者采取有效措施有针对性的对雷公藤内酯醇提取物的毒性进行处理；且本发明专利技术对提纯过的雷公藤内酯醇提取物进行微囊化处理，药物的包埋性高，缓释速度好，能够缓慢释放药物中的有效成分，延长药物在体内的释放、吸收、分布，从而降低雷公藤内酯醇对人体的毒性。

Preparation method of Tripterygium wilfordii sustained release microcapsule

The invention discloses a preparation method of Tripterygium wilfordii sustained-release microcapsules, which comprises ultrasonic Wave-Assisted supercritical CO2 extraction and high-pressure liquid chromatography separation to purify the alcohol extract of Tripterygium wilfordii with purity of about 95%, and then to purify the alcohol of Tripterygium wilfordii with purity of over 99%. The extract was prepared into a sustained-release microcapsule. The invention reduces the influence of impurities on the ethanol extract of triptolide in drug treatment, helps researchers to take effective measures to deal with the toxicity of the ethanol extract of triptolide, and carries out microencapsulation treatment on the purified ethanol extract of triptolide, which has high embedding property and slow release. It can release the active ingredients slowly, prolong the release, absorption and distribution of the drug in the body, thereby reducing the toxicity of triptolide.

【技术实现步骤摘要】
一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法
本专利技术属于药物制备
，具体涉及一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法。
技术介绍
雷公藤为卫茅科植物雷公藤的根、叶及花，又名黄藤、断肠草，其性味辛凉，有大毒，入肝经，兼入脾肾经。现代药理研究表明，雷公藤具有抗炎、镇痛、抗肿瘤及免疫调节等作用，常用于皮肤炎症、免疫调节、肾脏疾病及呼吸系统疾病的治疗，但由于其存在着较大的毒性反应而限制了其临床应用。雷公藤中的药效成分主要是雷公藤二萜内酯、雷公藤三萜类、雷公藤生物碱等，其中属于二萜内酯的雷公藤内酯醇(Triptolide)，又称雷公藤甲素，被认为是最主要的生理活性成分，因此从雷公藤中提纯雷公藤内酯醇具有重要的价值。目前现有的提取方法提取出的雷公藤内酯醇的纯度仅能达到95％左右，如授权公告号为CN101445545B的中国专利技术专利提供了一种从雷公藤叶片中分离雷公藤内酯醇的方法，其提取出的雷公藤内酯醇的纯度在94.3％-98.7％之间。由于雷公藤中药效成分基本是有毒的，因此，将雷公藤内酯醇入药时，需要采取多种手段降低雷公藤内酯醇的毒性，但是如果不将雷公藤内酯醇提纯到较高纯度，一方面会影响药效，另一方面杂质混合进配方组分后难以判断其和其他组分之间发生的相互作用，从而难以采取有针对性的措施降低雷公藤内酯醇的毒性。由于雷公藤内酯醇是有毒的，所以需要采取措施降低其在药品中的毒性。目前，关于雷公藤减毒方法的研究主要包括中药配伍、制剂减毒、寻找高效低毒的雷公藤活性单体或对已有活性单体进行结构修饰、利用针灸降低毒副作用等方式，但总体而言，效果均不理想。因此，要解决雷公藤的毒副作用问题，须要有创新的思路和方法。对此，我国的医药工作者做了广泛的研究，研究发现，将雷公藤提取物制备成缓释胶囊，通过控制有效成分在体内的释放速度来控制其释放量，让人体逐步吸收，从而能够减轻对人体的毒害。如朱惠等选择超声波法制备雷公藤内酯醇β-环糊精包合物，包合率为70％；王淑娟以雷公藤甲素脂质体的包封率为指标，考察薄膜超声分散法、机械匀浆法与乙醇注入法等脂质体制备方法。由此表明，通过制备雷公藤微胶囊的方法降低雷公藤的毒性具有一定的可行性。因此，只要寻找到合适的包覆微胶囊的材料，就能够为降低雷公藤的毒性的毒性提供有效途径。常用来包覆微胶囊的材料主要有天然高分子材料、半合成高分子材料、合成高分子材料三大类。天然高分子材料为可胶凝的胶体材料，如明胶、阿拉伯胶及淀粉等，这类材料无毒，成膜性好，但是机械强度差，原料质量不稳定。半合成高分子材料以纤维素衍生物为主，如羧甲基纤维素钠、邻苯二甲酸醋酸纤维素、羧甲基纤维素钠，纤维素衍生物具有毒性小、粘度大、成盐后溶解度增加等优点，但同时又存在易水解，不耐高温，耐酸性差等缺点。合成高分子材料聚乙烯醇缩醛、聚乙二醇、聚丙烯酰胺、聚氨酯、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇、柠檬酸三乙酯、假性多聚氨基酸合成橡胶等的特点是成膜性好，可生物降解，化学性能好，稳定性好，但是存在成本高的问题。因此，很有必要寻找出一种新的包覆微胶囊的材料或包覆方法，以控制雷公藤的释放速度及浓度，使其浓度在有效剂量以上，同时处于中毒剂量以下，以期能通过改变雷公藤的剂型及给药方式，进一步降低毒性，为其在临床上的应用提供一定的数据支持。
技术实现思路
本专利技术提供了一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法，解决了现有技术中雷公藤因存在较大的毒性反应而限制了其临床应用的问题。本专利技术提供了一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法，包括以下步骤：步骤1，雷公藤内酯醇提取物的纯化步骤1.1，原料预处理：取雷公藤内酯醇提取物，往其中加入相当于雷公藤内酯醇提取物重量5-10倍的乙醇，搅拌使雷公藤内酯醇完全溶解，然后往其中加入浓度为0.05mol/L的甘氨酸-盐酸缓冲液，调节体系pH值为4-5，得到预处理雷公藤内酯醇提取物；步骤1.2，超声波协同超临界CO2萃取：在采用超声波对预处理雷公藤内酯醇提取物进行处理的同时，以二氯甲烷作为携带剂对预处理雷公藤内酯醇提取物进行超临界CO2萃取，萃取完毕得到萃取液，将萃取液浓缩干燥后得到雷公藤内酯醇初步纯化产物；其中，预处理雷公藤内酯醇提取物与二氯甲烷的体积比为1：0.1-0.5；超临界CO2萃取条件为：CO2流量为35-60L/h，萃取压力为15-40MPa，萃取温度为40-60℃，萃取时间为3-5h；步骤1.3，高压液相色谱分离：将雷公藤内酯醇初步纯化产物与乙醇按照1g：5-8mL的比例混合溶解，得到雷公藤内酯醇初步纯化产物的乙醇溶液；将雷公藤内酯醇初步纯化产物的乙醇溶液进行高压液相色谱分离纯化，紫外检测器检测波长为280nm，收集12.3min的馏分，收集完毕后将馏分浓缩、干燥，即得到纯度大于99％的雷公藤内酯醇纯化提取物；步骤2，雷公藤缓释微胶囊的制备步骤2.1，制备有机相：将羧甲基纤维素钠、改性壳聚糖、聚乙二醇按照5：1：0.05的质量比混合，然后加入到相当于羧甲基纤维素钠、改性壳聚糖以及聚乙二醇总质量10倍的二氯甲烷中，搅拌溶解至溶液澄清透明，得到混合有机相；步骤2.2，制备水相：将聚乙烯醇、透明质酸、聚甘油脂肪酸酯按照1：4：0.05的质量比混合，然后加入到相当于聚乙烯醇、透明质酸以及聚甘油脂肪酸酯总质量20倍的蒸馏水中，于80-90℃下搅拌，待溶液变澄清透明后停止加热，冷却至室温，得到混合水相；步骤2.3，制备初乳相：将步骤1中得到的雷公藤内酯醇纯化提取物加入到步骤2.1的混合有机相中，然后在1000-1500rmp的搅拌速度下搅拌15-30min，搅拌完毕制得分散有药物的初乳相；步骤2.4，制备雷公藤缓释微胶囊：在转速为1000-1500rpm的条件下，将步骤2.3的初乳相滴加到步骤2.2的混合水相中，持续搅拌1-2h，待胶囊表面固化后，升温至60℃，同时将搅拌速度降低为500rpm，搅拌3-4h，搅拌完毕后洗涤、过滤、干燥，即得到所述雷公藤缓释微胶囊。优选的，所述步骤1.1中所用雷公藤内酯醇提取物的纯度为95.2％。优选的，所述步骤1.2中超声波功率为900-1200W，且超声波工作模式为12s，即超声8s，间歇4s。优选的，所述步骤1.3中高压液相色谱分离条件为：21.2mm×250mm，5μm的C18色谱柱，流速为20mL/min，流动相为甲醇，每次进样500μL。优选的，所述改性壳聚糖的制备方法如下：将壳聚糖溶解到醋酸溶液中，配制成质量浓度为2％的壳聚糖溶液；将壳聚糖溶液转移到质量浓度为1％的吐温-80的蓖麻油溶液中，搅拌均匀，然后往其中逐滴加入戊二醛交联剂，滴加完毕后搅拌反应3h，得到反应液，将反应液过滤除去溶剂后用无水乙醇洗涤、干燥，即得到所述改性壳聚糖；其中，壳聚糖溶液、吐温-80的蓖麻油溶液及戊二醛的体积比为25：5：1。本专利技术首先采用甘氨酸-盐酸缓冲液对雷公藤内酯醇提取物进行处理，增加了其在萃取溶剂中的溶解度，超声波协同超临界CO2萃取能够高效、快速的对雷公藤内酯醇进行提取；萃取液浓缩后采用高压液相色谱分离，高压液相色谱分离可以加快层析速度，缩短洗脱时间，同时在完成一个溶剂梯度展开，抽干后还可用另一梯度溶液再次对其展开，有效的防止了各馏分之间的相互交叉和影响，极大的提高了分离效率。此外，相比于常规的常压柱色谱和快速柱色谱分离而言，高压液相色谱设备本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，雷公藤内酯醇提取物的纯化步骤1.1，原料预处理：取雷公藤内酯醇提取物，往其中加入相当于雷公藤内酯醇提取物重量5‑10倍的乙醇，搅拌使雷公藤内酯醇完全溶解，然后往其中加入浓度为0.05mol/L的甘氨酸‑盐酸缓冲液，调节体系pH值为4‑5，得到预处理雷公藤内酯醇提取物；步骤1.2，超声波协同超临界CO2萃取：在采用超声波对预处理雷公藤内酯醇提取物进行处理的同时，以二氯甲烷作为携带剂对预处理雷公藤内酯醇提取物进行超临界CO2萃取，萃取完毕得到萃取液，将萃取液浓缩干燥后得到雷公藤内酯醇初步纯化产物；其中，预处理雷公藤内酯醇提取物与二氯甲烷的体积比为1：0.1‑0.5；超临界CO2萃取条件为：CO2流量为35‑60L/h，萃取压力为15‑40MPa，萃取温度为40‑60℃，萃取时间为3‑5h；步骤1.3，高压液相色谱分离：将雷公藤内酯醇初步纯化产物与乙醇按照1g：5‑8mL的比例混合溶解，得到雷公藤内酯醇初步纯化产物的乙醇溶液；将雷公藤内酯醇初步纯化产物的乙醇溶液进行高压液相色谱分离纯化，紫外检测器检测波长为280nm，收集12.3min的馏分，收集完毕后将馏分浓缩、干燥，即得到纯度大于99％的雷公藤内酯醇纯化提取物；步骤2，雷公藤缓释微胶囊的制备步骤2.1，制备有机相：将羧甲基纤维素钠、改性壳聚糖、聚乙二醇按照5：1：0.05的质量比混合，然后加入到相当于羧甲基纤维素钠、改性壳聚糖以及聚乙二醇总质量10倍的二氯甲烷中，搅拌溶解至溶液澄清透明，得到混合有机相；步骤2.2，制备水相：将聚乙烯醇、透明质酸、聚甘油脂肪酸酯按照1：4：0.05的质量比混合，然后加入到相当于聚乙烯醇、透明质酸以及聚甘油脂肪酸酯总质量20倍的蒸馏水中，于80‑90℃下搅拌，待溶液变澄清透明后停止加热，冷却至室温，得到混合水相；步骤2.3，制备初乳相：将步骤1中得到的雷公藤内酯醇纯化提取物加入到步骤2.1的混合有机相中，然后在1000‑1500rmp的搅拌速度下搅拌15‑30min，搅拌完毕制得分散有药物的初乳相；步骤2.4，制备雷公藤缓释微胶囊：在转速为1000‑1500rpm的条件下，将步骤2.3的初乳相滴加到步骤2.2的混合水相中，持续搅拌1‑2h，待胶囊表面固化后，升温至60℃，同时将搅拌速度降低为500rpm，搅拌3‑4h，搅拌完毕后洗涤、过滤、干燥，即得到所述雷公藤缓释微胶囊。...

【技术特征摘要】
1.一种雷公藤缓释微胶囊的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1，雷公藤内酯醇提取物的纯化步骤1.1，原料预处理：取雷公藤内酯醇提取物，往其中加入相当于雷公藤内酯醇提取物重量5-10倍的乙醇，搅拌使雷公藤内酯醇完全溶解，然后往其中加入浓度为0.05mol/L的甘氨酸-盐酸缓冲液，调节体系pH值为4-5，得到预处理雷公藤内酯醇提取物；步骤1.2，超声波协同超临界CO2萃取：在采用超声波对预处理雷公藤内酯醇提取物进行处理的同时，以二氯甲烷作为携带剂对预处理雷公藤内酯醇提取物进行超临界CO2萃取，萃取完毕得到萃取液，将萃取液浓缩干燥后得到雷公藤内酯醇初步纯化产物；其中，预处理雷公藤内酯醇提取物与二氯甲烷的体积比为1：0.1-0.5；超临界CO2萃取条件为：CO2流量为35-60L/h，萃取压力为15-40MPa，萃取温度为40-60℃，萃取时间为3-5h；步骤1.3，高压液相色谱分离：将雷公藤内酯醇初步纯化产物与乙醇按照1g：5-8mL的比例混合溶解，得到雷公藤内酯醇初步纯化产物的乙醇溶液；将雷公藤内酯醇初步纯化产物的乙醇溶液进行高压液相色谱分离纯化，紫外检测器检测波长为280nm，收集12.3min的馏分，收集完毕后将馏分浓缩、干燥，即得到纯度大于99％的雷公藤内酯醇纯化提取物；步骤2，雷公藤缓释微胶囊的制备步骤2.1，制备有机相：将羧甲基纤维素钠、改性壳聚糖、聚乙二醇按照5：1：0.05的质量比混合，然后加入到相当于羧甲基纤维素钠、改性壳聚糖以及聚乙二醇总质量10倍的二氯甲烷中，搅拌溶解至溶液澄清透明，得到混合有机相；步骤2.2，制备水相：将聚乙烯醇、透明质酸、聚甘油脂肪酸酯按照1：4：0.05的质量比混合，然后加入到相当于聚乙烯醇、透明质酸以及聚甘油脂肪酸酯总...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁芳芳，景涛，
申请(专利权)人：陕西国际商贸学院，
类型：发明
国别省市：陕西,61