改善嵌合抗原受体表达细胞的功效和扩增的方法技术

技术编号:18822579 阅读:35 留言:0更新日期:2018-09-01 12:40
本发明专利技术提供了能够被工程化以表达嵌合抗原受体(CAR)的免疫效应细胞(例如,T细胞、NK细胞)的制备方法,包含其的组合物和反应混合物,以及使用其进行治疗的方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】改善嵌合抗原受体表达细胞的功效和扩增的方法本申请要求2015年4月17日提交的美国序列号62/149,249的优先权,其全部内容通过引用并入本文。序列表本申请包含已经以ASCII格式电子提交的序列表,并通过引用整体并入本文。所述ASCII拷贝创建于2016年4月14日,名称为N2067-7094WO_SL.txt,大小为720,042字节。专利
本专利技术总体上涉及被工程化以表达嵌合抗原受体(CAR)的免疫效应细胞(例如,T细胞、NK细胞),包含它的组合物以及制备并使用它的方法。专利技术背景采用自体T细胞,特别是采用嵌合抗原受体(CAR)转导的T细胞的继承性细胞转移(ACT)疗法已经在一些血液学癌症试验中显示出希望。尽管有这些有希望的结果,许多正在进行入组评估的患者(至少部分)由于临床上可行的制成品的产量不足而最终无法进行。临床上可行的制品的这种限制可能由于几个因素的结果而出现的,这些因素包括不能从患者收获充足和足够的淋巴细胞、收获的细胞的限制和有限的体外细胞扩增。因此,需要提高T细胞收获的效率和生长更大量的免疫效应细胞以产生临床级制品的能力。专利技术概述本公开至少部分地涉及改善用于细胞治疗的免疫效应细胞(例如,T细胞、NK细胞)的功效和/或扩增(例如,离体扩增)的方法。在一些实施方案中,申请人已经发现了在诊断之后(例如,在治疗之前或在治疗过程的早期时间点之前)尽早从受试者(例如癌症患者)获取(例如收获)免疫细胞的显著益处。本文描述的一些实施方案提供了评估和/或优化用于细胞治疗(例如嵌合抗原受体(CAR)治疗)的免疫细胞适合性的标准。不希望被理论束缚,认为在诊断之后或在用所选化疗治疗之后尽早收获的免疫细胞包括较少分化的免疫效应细胞群体(例如幼稚T细胞和早期记忆性T细胞)。认为较少分化的免疫效应细胞群体具有较高的增殖、自我更新和/或存活能力,并因此具有较高的扩增能力和/或更高的抗肿瘤功效。因此,在实施方案中,本文公开的方法通过在诊断癌症之后早期(例如在化疗之前或在某些/多种化疗周期之前)从受试者获取细胞,有利地提高T细胞合适度(例如,用于细胞治疗的适合性)和功效。在实施方案中,本文公开的方法利用在含有T细胞消耗性药物的化疗周期之前从患者获取的(例如,在2、3、4或5个化疗周期之前获取的),或在延迟加剧或在巩固周期之前获取的细胞。在其他实施方案中,该方法通过包括例如基于恶性肿瘤的类型(例如,白血病与淋巴瘤)或疾病的严重性(例如,标准、高、或非常高风险)的患者选择,优化免疫细胞的扩增张力和/或抗肿瘤功效。在又其他实施方案中,该方法通过包括细胞选择,例如选择具有较高绝对T细胞计数的细胞群体或更高百分比的较低分化T细胞,优化免疫细胞的扩增能力和/或抗肿瘤功效。因此,本文公开的方法可以用于优化细胞治疗用组合物和方法中的一种或多种,和/或制备免疫效应细胞群体(例如CAR表达细胞)的方法。因此,在一个方面,本专利技术的特征在于一种评估用于细胞治疗(例如CAR治疗(例如,癌症治疗))的免疫细胞(例如,免疫效应细胞或其群体)的适合性的方法。该方法包括获取以下一个、两个、三个、四个或更多(全部)的值:(i)来自受试者(例如癌症患者)的免疫细胞获取(例如,收获)的时机;(ii)治疗的时机,例如化疗,例如与免疫细胞获取(例如收获)相关;(iii)治疗类型,例如化疗;(iv)潜在的恶性肿瘤;(v)免疫细胞(例如,T细胞)参数,例如T细胞数目、T细胞表型或T细胞功能中的一种或多种,或(i)-(v)的组合,其中(i)-(v)中任一个的值指示免疫细胞用于细胞治疗(例如CAR治疗)的适合性。在一个实施方案中,(i)-(v)中任一个的值指示以下中的一种或多种:免疫细胞的扩增能力(例如,离体扩增)、免疫细胞用于治疗的功效、或免疫细胞的产量。另在一个方面,本专利技术的特征在于具有癌症的受试者的治疗或提供抗肿瘤免疫的方法。该方法包括与一种治疗(例如化疗)联合治疗向受试者施用有效量的能够表达CAR分子(“CAR表达细胞”或“CAR治疗”)的免疫细胞(例如免疫效应细胞或其群体)。在某些实施方案中,通过优化以下的一个、两个、三个、四个或更多个(全部)来获取(例如,取得或收获)免疫细胞(例如,免疫效应细胞或其群体):(i)从受试者(例如癌症患者)的免疫细胞获取(例如,收获)的时机;(ii)治疗的时机,例如化疗,例如与免疫细胞获取(例如收获)相关;(iii)治疗类型,例如化疗;(iv)潜在的恶性肿瘤;(v)免疫细胞(例如,T细胞)参数,例如T细胞数目、T细胞表型或T细胞功能中的一种或多种,或(i)-(v)的组合。在一个实施方案中,在引入CAR分子之前获取免疫细胞。在一个实施方案中,获取的免疫细胞在引入CAR分子之前被扩增。在其它实施方案中,在引入CAR分子后获取免疫细胞。在一个实施方案中,获取的免疫细胞在引入CAR分子后扩增。免疫细胞可以根据本文所述的任何方法进行扩增和/或活化。在实施方案中,当(i)-(v)中的任一个被优化时,免疫细胞显示下述一个或多个的增加:免疫细胞群体的扩增(例如,离体扩增)、免疫细胞群体用于治疗的功效或免疫细胞群体的产量。在一些实施方案中,该方法包括向获取的免疫细胞(例如,细胞群体)中引入编码CAR(例如本文所述的CAR分子,例如本文所述的CD19CAR(例如CTL019))的核酸。在又另在一个方面,本专利技术的特征在于一种富集或制备适用于CAR治疗(例如表达CAR分子的细胞)的免疫细胞群体(例如,免疫效应细胞群体)的方法。该方法包括根据以下一个、两个、三个、四个或更多(全部),获取(例如,收获)免疫细胞群体:(i)来自受试者(例如癌症患者)的免疫细胞获取(例如,收获)的时机;(ii)治疗的时机,例如化疗,例如与免疫细胞获取(例如收获)相关;(iii)治疗类型,例如化疗;(iv)潜在的恶性肿瘤;(v)免疫细胞(例如,T细胞)参数,例如T细胞数目、T细胞表型或T细胞功能中的一种或多种,或(i)-(v)的组合。在一个实施方案中,在引入CAR分子之前获取免疫细胞群体。在一个实施方案中,获取的免疫细胞在引入CAR分子之前被扩增。在其它实施方案中,在引入CAR分子后获取免疫细胞。在一个实施方案中,获取的免疫细胞在引入CAR分子后扩增。免疫细胞可以根据本文所述的任何方法进行扩增和/或活化。在实施方案中,当(i)-(v)中的任一个被优化时,免疫细胞显示下述一个或多个的增加:免疫细胞群体的扩增(例如,离体扩增)、免疫细胞群体用于治疗的功效或免疫细胞群体的产量.在一些实施方案中,该方法还包括向获取的免疫细胞(例如,细胞群体)中引入编码CAR(例如本文所述的CAR分子,例如本文所述的CD19CAR(例如CTL019))的核酸。另在一个方面,本专利技术的特征在于根据本文所述方法制备的免疫细胞制备物或反应混合物,例如包含免疫效应细胞群体(例如包含CAR分子或编码CAR分子的核酸)。任何上述方法、制备物和反应混合物的其它特征或实施方案包括以下一种或多种:受试者在一个实施方案中,受试者,例如获取免疫细胞的受试者和/或待治疗的受试者是人,例如癌症患者。在某些实施方案中,受试者是年龄为18岁的年轻人,例如,18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种富集或制备适用于CAR治疗的免疫效应细胞(例如细胞群体)的方法,包括根据以下一个、两个、三个、四个、五个或更多(全部)获取(例如,获得或收获)免疫效应细胞:(i)从受试者(例如血液学癌症患者)获取免疫效应细胞的时机;(ii)与免疫效应细胞获取相关的化疗的时机;(iii)化疗的类型;(iv)潜在的恶性肿瘤;(v)免疫效应细胞(例如T细胞)参数,例如T细胞数、T细胞表型或T细胞功能中的一个或多个,或者(i)‑(v)中的两个、三个、四个或五个的组合,从而富集或制备适用于CAR治疗的免疫效应细胞。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.17 US 62/149,2491.一种富集或制备适用于CAR治疗的免疫效应细胞(例如细胞群体)的方法,包括根据以下一个、两个、三个、四个、五个或更多(全部)获取(例如,获得或收获)免疫效应细胞:(i)从受试者(例如血液学癌症患者)获取免疫效应细胞的时机;(ii)与免疫效应细胞获取相关的化疗的时机;(iii)化疗的类型;(iv)潜在的恶性肿瘤;(v)免疫效应细胞(例如T细胞)参数,例如T细胞数、T细胞表型或T细胞功能中的一个或多个,或者(i)-(v)中的两个、三个、四个或五个的组合,从而富集或制备适用于CAR治疗的免疫效应细胞。2.包含表达CAR分子的免疫效应细胞(“CAR表达细胞”)(例如细胞群体)的组合物,用于与化疗联合来治疗患有血液学癌症的受试者或向其提供抗肿瘤免疫,其中通过优化以下一个、两个、三个、四个或更多(全部),从受试者获取(例如获得或收获)免疫效应细胞:(i)从受试者(例如血液学癌症患者)获取免疫效应细胞的时机;(ii)与免疫效应细胞获取相关的化疗的时机;(iii)化疗的类型;(iv)潜在的恶性肿瘤;(v)免疫效应细胞(例如T细胞)参数,例如T细胞数、T细胞表型或T细胞功能中的一个或多个,或者(i)-(v)中的两个、三个、四个或五个的组合,(任选地),其中在引入CAR分子之前从受试者获取免疫效应细胞。3.一种治疗患有血液学癌症的受试者或向其提供抗肿瘤免疫的方法,所述方法包括联合化疗向所述受试者施用有效量的表达CAR分子的免疫效应细胞(“CAR表达细胞”或“CAR治疗”)(例如细胞群体),其中通过优化以下一个、两个、三个、四个或更多(全部),从受试者获取(例如获得或收获)免疫效应细胞:(i)从受试者(例如血液学癌症患者)获取免疫效应细胞的时机;(ii)与免疫效应细胞获取相关的化疗的时机;(iii)化疗的类型;(iv)潜在的恶性肿瘤;(v)免疫效应细胞(例如T细胞)参数,例如T细胞数、T细胞表型或T细胞功能中的一个或多个,或者(i)-(v)中的两个、三个、四个或五个的组合,(任选地),其中在引入CAR分子之前从受试者获取免疫效应细胞,从而治疗血液学癌症或向血液学癌症提供抗肿瘤免疫。4.如权利要求1-3中任一项所述的方法,其中当(i)-(v)中的任一个被优化时,免疫效应细胞群体显示以下一种或多种的增加:免疫细胞群体的离体扩增,免疫细胞群体对治疗的功效或免疫细胞群体的产率。5.如权利要求2-4中任一项所述的方法,其中CAR表达细胞包含编码CAR的核酸,例如本文所述的CAR分子,例如本文所述的CD19CAR(例如CTL019)。6.如权利要求2-5中任一项所述的方法,还包括向免疫效应细胞群体中引入编码CAR的核酸,例如本文所述的CAR分子,例如本文所述的CD19CAR(例如CTL019)。7.如权利要求5或6所述的方法,其中CAR分子包含根据表1或表4的序列。8.如权利要求1-7中任一项所述的方法,其中从其获得免疫细胞的受试者和/或待治疗的受试者是人癌症患者。9.如权利要求8所述的方法,其中受试者是年龄18岁的年轻人(例如18、17、16、15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、1岁或更小)。10.如权利要求8所述的方法,其中受试者年龄大于18岁。11.如权利要求1-10中任一项所述的方法,其中受试者患有与肿瘤或癌症相关抗原表达相关的疾病。12.如权利要求1-11中任一项所述的方法,其中血液学癌症选自以下一种或多种:B细胞急性淋巴细胞性白血病(B-ALL)、T细胞急性淋巴细胞性白血病(T-ALL)、急性淋巴细胞性白血病(ALL)、慢性粒细胞白血病(CML)、慢性淋巴细胞性白血病(CLL)、B细胞早幼粒细胞白血病、母细胞性浆细胞样树突状细胞肿瘤、伯基特淋巴瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、毛细胞白血病、小细胞或大细胞滤泡性淋巴瘤、恶性淋巴细胞增生性疾病、MALT淋巴瘤、套细胞淋巴瘤(MCL)、边缘区淋巴瘤、多发性骨髓瘤、脊髓发育不良和骨髓增生异常综合征、非霍奇金淋巴瘤(NHL)、霍奇金淋巴瘤(HL)、浆细胞淋巴瘤、浆细胞样树突状细胞肿瘤和瓦尔登氏巨球蛋白血症。13.如权利要求1-11中任一项所述的方法,其中血液学癌症是白血病,例如CLL、ALL或淋巴瘤,例如MCL、NHL或HL。14.如权利要求1-9或11-13中任一项所述的方法,其中受试者患有白血病,并且是儿科患者如年龄为18岁的年轻人。15.如权利要求1-14中任一项所述的方法,其中受试者被分类为具有标准风险、高风险或非常高风险的ALL。16.如权利要求1-14中任一项所述的方法,其中受试者不患有淋巴瘤,例如受试者不患有非霍奇金淋巴瘤(NHL)。17.如权利要求1-16中任一项所述的方法,其中受试者不患有复发的癌症。18.如权利要求1-17中任一项所述的方法,其中免疫效应细胞群体获取发生在向受试者施用化疗之前。19.如权利要求1-17中任一项所述的方法,其中免疫效应细胞群体获取发生在受试者已经经历了2、3、4或5个化疗周期之前。20.如权利要求1-17中任一项所述的方法,其中免疫效应细胞群体获取发生在受试者已经经历1个化疗周期之后,但是在受试者已经经历多于1个化疗周期之前(例如,多于1、2、3、4或5个周期)。21.如权利要求1-20中任一项所述的方法,其中化疗或化疗周期包括诱导、巩固、临时维持、延迟增强或维持治疗周期中的一个或多个。22.如权利要求21所述的方法,其中在受试者经历化疗的巩固周期或化疗的诱导周期之前,从受试者获取免疫效应细胞群体。23.如权利要求21所述的方法,其中在受试者经历化疗的巩固周期之前从受试者获取免疫效应细胞群体。24.如权利要求21所述的方法,其中受试者被分类为具有高风险或非常高风险的癌症(例如,ALL),并且在受试者经历巩固周期之前收获所述细胞。25.如权利要求21所述的方法,其中在受试者经历延迟增强周期之前从受试者获取免疫效应细胞群体。26.如权利要求21所述的方法,其中受试者被分类为具有高风险或非常高风险的癌症(例如,ALL),并且在受试者经历延迟增强周期之前收获所述细胞。27.如权利要求1-26中任一项所述的方法,其中从表8选择一种或多种化疗周期或药物。28.如权利要求1-27中任一项所述的方法,其中化疗包括表8中所述的药物和给药方案。29.如权利要求1-27中任一项所述的方法,其中化疗包括长春新碱、地塞米松、PEG-L-天冬酰胺酶、柔红霉素、6-巯嘌呤、环磷酰胺、阿糖胞苷、甲氨蝶呤、多柔比星、6-硫鸟嘌呤和/或泼尼松。30.如权利要求1-27中任一项所述的方法,其中免疫效应细胞群体是在受试者已经施用环磷酰胺和/或阿糖胞苷之前从受试者获取的。31.如权利要求1-30中任一项所述的方法,所获取的免疫效应细胞群体包含较高数量的较低分化的T细胞,例如较高数量的一种或多种的:幼稚T细胞、干中央记忆T细胞和/或中央记忆T细胞,例如与参考值(例如,在稍后时间点或在暴露于另外轮次化疗之后来自受试者的样品)相比较。32.如权利要求231所述的方法,其中所获取的免疫效应细胞群体包括至少20%幼稚T细胞、至少2%干中央记忆T细胞和/或至少4%中央记忆T细胞。33.如权利要求31或32所述的方法,其中所获取的免疫效应细胞群体包括至少50%的中央记忆T细胞。34.如权利要求31或32所述的方法,其中所获取的免疫效应细胞群体包括小于55%的效应记忆和末端效应T细胞的组合。35.如权利要求31所述的方法,其中所获取的免疫效应细胞群体与参考值(例如,在稍后的时间点或在暴露于另外轮次化疗之后来自所述受试者的样品)显示增加的绝对T细胞计数(ATC)。36.如权利要求31所述的方法,其中所获取的免疫效应细胞群体包含至少400个细胞/微升的绝对T细胞计数,至少200个细胞/微升的绝对幼稚T细胞计数,至少20个细胞/微升的...

【专利技术属性】
技术研发人员:D·M·巴莱特F·贝多亚S·卡西米C·H·琼B·L·莱维内J·J·梅勒霍斯特M·C·米伦D·J·小鲍威尔N·A·辛格Z·郑
申请(专利权)人:诺华股份有限公司宾夕法尼亚大学托管会
类型:发明
国别省市:瑞士,CH

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