含有TRAF诱导结构域的嵌合受体及相关组合物和方法技术

提供用于过继治疗的工程改造细胞的嵌合受体，包括T细胞和基因工程细胞。在一些方面，提供了用于工程改造和产生所述细胞的方法和组合物、含有所述细胞的组合物、以及其给予对象的方法。在一些实施方案中，细胞例如T细胞含有特异性结合抗原并且含有能够诱导TRAF6介导的信号传导的细胞内信号传导结构域的基因工程改造的抗原受体，例如嵌合抗原受体(CAR)。在一些实施方式中，方法和细胞的特征提供了增强的或改善的活性、功效和/或持久性。

Chimeric receptors containing TRAF induced domains and related compositions and methods

To provide chimeric receptors for engineered cells for adoptive therapy, including T cells and genetically engineered cells. In some aspects, methods and compositions for engineering the transformation and production of the cells, compositions containing the cells, and methods for giving the objects thereof are provided. In some implementations, cells such as T cells contain specific binding antigens and antigen receptors, such as chimeric antigen receptors (CARs), that can induce genetic modifications of intracellular signal transduction domains mediated by TRAF6. In some embodiments, methods and cell characteristics provide enhanced or improved activity, efficacy, and/or persistence.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】含有TRAF诱导结构域的嵌合受体及相关组合物和方法相关申请的交叉引用本申请要求2015年11月5日提交的标题为“含有Traf诱导结构域的嵌合受体及相关组合物和方法”的美国临时申请号62/251,590的优先权，其内容通过引用整体纳入。通过引用纳入序列表本申请与电子格式的序列表一同提交。所提供的序列表名称为735042002940SeqList.txt，创建于2016年11月3日，其文件大小为37,708字节。该序列表的电子格式的信息通过引用其全文纳入本文。
本公开在一些方面涉及用于过继治疗的工程改造的细胞的嵌合受体，包括T细胞和基因工程改造的细胞。在一些方面中，本专利技术还涉及用于工程改造和产生所述细胞的方法和组合物、含有该细胞的组合物、和用于向对象给予它们的方法。在一些实施方式中，细胞例如T细胞含有特异性结合抗原并且含有诱导TRAF6介导的信号传导的细胞内信号传导结构域的基因工程改造的抗原受体，例如嵌合抗原受体(CAR)。在一些实施方式中，方法和细胞的特征提供了增强的或改善的活性、功效和/或持久性。
技术介绍
有多种策略可用于产生并给予用于过继治疗的工程改造的细胞。例如，策略可用于对表达基因工程改造的抗原受体(如CAR)的免疫细胞进行工程改造，并将含有这些细胞的组合物给予对象。需要改进的策略来改善细胞的功效，例如，在给予对象时改善细胞的持久性和/或存活。提供了满足此类需求的方法、细胞、组合物、试剂盒和系统。
技术实现思路
本申请在一些方面提供了嵌合受体，其包含配体结合结构域和包含TNF受体相关因子6(TRAF-6)诱导结构域和活化性胞质信号传导结构域的细胞内信号传导结构域。本文还提供了嵌合受体，其含有配体结合结构域，跨膜结构域和包含源自人CD40的信号传导结构域的细胞内信号传导结构域。还提供了含有配体结合结构域，源自人CD28的跨膜结构域和包含源自CD40的信号传导结构域的胞内信号传导结构域的嵌合受体。在一些情况下，CD40是人CD40。在任何此类实施方式中的一些中，所述源自CD40的信号传导传导结构域包含SEQIDNO:12所示的氨基酸序列，或其功能变体，所述功能变体包含与SEQIDNO:12显示至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高序列相同性的氨基酸序列。还提供了含有配体结合结构域、跨膜结构域和细胞内信号传导结构域的嵌合受体，所述细胞内信号传导结构域包含源自SEQIDNO：12所示的CD40的信号传导结构域。在一些示例中，跨膜结构域源自CD40。在任何此类实施方式中的一些中，跨膜结构域是或含有源自CD4，CD28或CD8的跨膜结构域。在一些示例中，跨膜结构域是或含有源自CD28的跨膜结构域。在一些情况下，跨膜结构域是或源自人蛋白质。在任何此类实施方式中的一些中，源自CD28的跨膜结构域含有SEQIDNO：6的氨基酸序列或与SEQIDNO：6的氨基酸序列具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更高的序列相同性的氨基酸序列。在任何此类实施方式中的一些中，所述嵌合受体还包含活化性胞质信号传导结构域。在一些情况下，活化性胞质信号传导结构域能够在T细胞中诱导初级活化信号，是T细胞受体(TCR)组分和/或包含基于免疫受体酪氨酸的活化基序(ITAM)。在一些实施方式中，活化性胞质信号传导传导结构域是或包含CD3-ζ(CD3ζ)链的ζ链信号传导的胞质信号传导传导结构域或其功能变体或信号传导部分。在任何此类实施方式中的一些中，细胞内信号传导结构域从N到C末端依次包含源自CD2的信号传导结构域和活化性胞质信号传导结构域。在任何此类实施方式中的一些中，细胞内信号传导结构域不包含CD3-zeta(CD3ζ)链的ζ链的细胞内信号传导结构域。在一些实施方式中，细胞内信号传导结构域还包含额外的共刺激信号传导结构域。在任何此类实施方式中的一些中，额外的共刺激信号传导结构域包含T细胞共刺激分子的细胞内信号传导结构域或其除了源自CD40的之外的信号传导部分。在一些方面，额外的共刺激信号传导结构域含有源自CD28、4-1BB或ICOS的信号传导结构域或其信号传导部分。在一些实施方式中，配体结合结构域是抗原结合结构域。在一些实例中，抗原结合结构域是抗体或抗原结合抗体片段。在一些情况下，抗原结合结构域是单链片段的抗原结合抗体片段。在一些情况下，抗原结合抗体片段含有通过柔性免疫球蛋白接头连接的抗体可变区。在一些情况下，抗原结合结构域是单链可变片段(scFv)。另一方面，提供了包含第一和第二嵌合受体的多聚体嵌合受体复合物。在其他方面，提供了编码嵌合受体或多聚体嵌合受体复合物的核酸或载体，表达嵌合受体或多聚体嵌合受体复合体的细胞，包含嵌合受体表达细胞或多聚体嵌合受体复合体表达细胞的组合物，以及包括给予这些细胞的治疗方法。在一些实施方式中，提供了嵌合受体，其包含(a)配体结合结构域；和(b)细胞内信号传导结构域，其包含(i)TNF-受体相关因子6(TRAF-6)-诱导结构域，其能够诱导TRAF-6活化或细胞定位和/或能够诱导TRAF-6介导的信号传导；和(ii)活化性胞质信号传导结构域。在一些实施方式中，TRAF-6诱导结构域包含TRAF-6结合结构域或能够与包含TRAF-6结合结构域的分子结合的结构域或招募包含TRAF-6结合结构域的分子的结构域。在一些实施方式中，TRAF-6-结合结构域包含具有Pro-Xxa-Glu-Xaa-Xaa-Xaa(SEQIDNO：26)的氨基酸序列；和/或TRAF-6结合结构域不与TRAF-6以外的TRAF分子特异性结合；和/或嵌合受体不包含能够特异性结合和/或招募特异性结合任何其他TRAF分子(TRAF-1，TRAF-2，TRAF-3和/或TRAF-5)的结合结构域。在一些实施方式中，TRAF-6诱导结构域是或包含选自TNF-R家族成员、细胞因子受体和Toll样受体(TLR)的分子的TRAF-6诱导结构域，或者是选自TNF-R家族成员、细胞因子受体和Toll样受体(TLR)的分子的TRAF-6诱导结构域的功能性片段或变体。在一些实施方式中，根据上述任何嵌合受体，所述分子不包含衍生自该分子的任何其他TRAF诱导结构域；该分子不包含衍生自该分子的TRAF-1诱导结构域；该分子不包含衍生自该分子的任何其他TRAF-2诱导结构域；该分子不包含衍生自该分子的任何其他TRAF-3诱导结构域；该分子不包含衍生自该分子的任何其他TRAF-4诱导结构域；该分子不包含衍生自该分子的任何其他TRAF-5诱导结构域；该分子不包含能够诱导另一TRAF或TRAF-1、TRAF-2、TRAF-3或TRAF-5的活化或细胞定位的分子的结构域，和/或该分子不包含能够通过另一TRAF和/或TRAF-1、TRAF-2、TRAF-3或TRAF-5诱导信号传导的分子的结构域。在一些实施方式中，根据上述任何嵌合受体，TRAF-6诱导结构域是或包含肿瘤坏死因子(TNF)-受体超家族分子的胞质信号传导结构域，或者是其功能变体或片段；或TRAF-6诱导结构域是或包含Toll/IL-1家族分子的胞质信号传导结构域或者是其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种嵌合受体，包含：(a)配体结合结构域；(b)跨膜结构域；和(c)细胞内信号传导结构域，其包含衍生自人CD40的信号传导结构域。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.11.05 US 62/251,5901.一种嵌合受体，包含：(a)配体结合结构域；(b)跨膜结构域；和(c)细胞内信号传导结构域，其包含衍生自人CD40的信号传导结构域。2.一种嵌合受体，包含：(a)配体结合结构域；(b)衍生自人CD28的跨膜结构域；和(c)细胞内信号传导结构域，其包含衍生自CD40的信号传导结构域。3.如权利要求2所述的嵌合受体，其中所述CD40是人CD40。4.如权利要求1-3中任一项所述的嵌合受体，其中所述衍生自CD40的信号传导结构域包含SEQIDNO:12所示的氨基酸序列，或其功能变体，所述功能变体包含与SEQIDNO:12显示至少85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或更高序列相同性的氨基酸序列。5.一种嵌合受体，包含：(a)配体结合结构域；(b)跨膜结构域；和(c)细胞内信号传导结构域，其包含SEQIDNO：12所示氨基酸序列。6.如权利要求1或5所述的嵌合受体，其中所述跨膜结构域包含衍生自分子的跨膜结构域，所述分子包含TRAF-6诱导型结构域，或其功能片段或变体。7.如权利要求1、5或6所述的嵌合受体，其中所述跨膜结构域衍生自CD40。8.如权利要求1和5中任一项所述的嵌合受体，其中所述跨膜结构域是或包含衍生自CD4、CD28或CD8的跨膜结构域。9.如权利要求8所述的嵌合受体，其中所述跨膜结构域是或包含衍生自CD28的跨膜结构域。10.如权利要求1和5-9中任一项所述的嵌合受体，其中所述跨膜结构域是人的或衍生自人蛋白质。11.如权利要求2-4、9和10中任一项所述的嵌合受体，其中所述跨膜结构域包含：a)SEQIDNO：6的氨基酸序列；或b)与SEQIDNO：6的氨基酸序列具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更多序列相同性的氨基酸序列。12.如权利要求1-11中任一项所述的嵌合受体，其中所述细胞内信号传导结构域还包含活化性胞质信号传导结构域。13.如权利要求12所述的嵌合受体，其中活化性胞质信号传导结构域能够在T细胞中诱导初级活化信号，是T细胞受体(TCR)组分和/或包含基于免疫受体酪氨酸的活化基序(ITAM)。14.如权利要求12或13所述的嵌合受体，其中所述活化性胞质信号传导结构域是或包含CD3-ζ(CD3ζ)链的ζ链的胞质信号传导结构域或其功能变体或信号传导部分。15.如权利要求12-14中任一项所述的嵌合受体，其中所述细胞内信号传导结构域从其N到C末端依次包含：衍生自CD40的信号传导结构域和所述活化性胞质信号传导结构域。16.如权利要求1-11中任一项所述的嵌合受体，其中所述细胞内信号传导结构域不包含CD3-ζ(CD3ζ)链的细胞内信号传导结构域。17.如权利要求1-16中任一项所述的嵌合受体，其中所述细胞内信号传导结构域还包含不同于衍生自CD40的信号传导结构域的共刺激信号传导结构域。18.如权利要求17所述的嵌合受体，其中所述共刺激信号传导结构域包含T细胞共刺激分子的细胞内信号传导结构域或其非衍生自CD40的信号传导部分。19.如权利要求17或18所述的嵌合受体，其中所述共刺激信号传导结构域包含衍生自CD28、4-4BB或ICOS的信号传导结构域或其信号传导部分。20.如权利要求1-19中任一项所述的嵌合受体，其中所述配体结合结构域是或包含抗原结合结构域。21.如权利要求20所述的嵌合受体，其中所述抗原结合结构域是抗体或抗原结合抗体片段。22.如权利要求21所述的嵌合受体，其中抗原结合结构域是抗原结合抗体片段，其为单链片段。23.如权利要求21或22所述的嵌合受体，其中所述抗原结合抗体片段包含由柔性免疫球蛋白接头连接的多个抗体可变区。24.如权利要求21-23中任一项所述的嵌合受体，其中所述抗原结合结构域是或包含单链可变片段(scFv)。25.如权利要求1-24中任一项所述的嵌合受体，其中所述配体结合结构域特异性结合与疾病或病症相关的抗原和/或由所述疾病或病症的细胞或组织表达的抗原。26.如权利要求25所述的嵌合受体，其中所述疾病或病症是感染性疾病或病症，自身免疫性疾病或病症，炎性疾病或病症或肿瘤或癌症。27.如权利要求16所述的嵌合受体，其中所述癌症是实体瘤。28.如权利要求1-27中任一项所述的嵌合受体，其中所述配体结合结构域特异性结合至肿瘤抗原。29.如权利要求1-16中任一项所述的嵌合受体，其中所述配体结合结构域特异性结合至选自下组的抗原：ROR1，B细胞成熟抗原(BCMA)，tEGFR，Her2，L1-CAM，CD19，CD20，CD22，间皮素，CEA，乙型肝炎表面抗原，抗叶酸受体，CD23，CD24，CD30，CD33，CD38，CD44，EGFR，EGP-2，EGP-4，EPHa2，ErbB2、3或4，erbB二聚体，EGFRvIII，FBP，FCRL5，FCRH5，胎儿乙酰胆碱e受体，GD2，GD3，HMW-MAA，IL-22R-α，IL-13R-α2，kdr，κ轻链，LewisY，L1-细胞粘附分子(L1-CAM)，黑素瘤相关抗原(MAGE)-A1，MAGE-A3，MAGE-A6，黑素瘤优先表达抗原(PRAME)，存活素，EGP2，EGP40，TAG72，B7-H6，IL-13受体a2(IL-13Ra2)，CA9，GD3，HMW-MAA，CD171，G250/CAIX，HLA-AIMAGEA1，HLA-A2NY-ESO-1，PSCA，叶酸受体-α，CD44v6，CD44v7/8，avb6整联蛋白，8H9，NCAM，VEGF受体，5T4，胎儿AchR，NKG2D配体，CD44v6，双重抗原，和与通用标签关联的抗原，癌症-睾丸抗原，间皮素，MUC1，MUC16，PSCA，NKG2D配体，NY-ESO-1，MART-1，gp100，癌胚抗原，ROR1，TAG72，VEGF-R2，癌胚抗原(CEA)，前列腺特异性抗原，PSMA，Her2/neu，雌激素受体，孕酮受体，肝配蛋白B2，CD123，CS-1，c-Met，GD-2，O-乙酰化GD2(OGD2)，CE7，Wilms肿瘤1(WT-1)和细胞周期蛋白，细胞周期蛋白A2，CCL-1，CD138和病原体特异性抗原。30.如权利要求1-17中任一项所述的嵌合受体，其中所述配体结合结构域特异性结合至CD19。31.如权利要求1-30中任一项所述的嵌合受体，其中所述嵌合受体还包含连接所述配体结合结构域和所述跨膜结构域的间隔子。32.如权利要求31所述的嵌合受体，其中所述间隔子衍生自人IgG。33.如权利要求31或32所述的嵌合受体，其中所述间隔子包含氨基酸序列ESKYGPPCPPCP(SEQIDNO：1)。34.如权利要求31所述的嵌合受体，其中所述间隔子包含衍生自CD28的细胞外部分，所述CD28任选地是人CD28。35.如权利要求34所述的嵌合受体，其中衍生自CD28的胞外部分包含1至50个氨基酸长度，1至40个氨基酸长度，1至30个氨基酸长度，1至20个氨基酸长度或1至10个氨基酸长度。36.如权利要求34或35所述的嵌合受体，其中所述间隔子和跨膜结构域一起包含：a)SEQIDNO：7的氨基酸序列；或b)与SEQIDNO：7的氨基酸序列具有至少90％，91％，92％，93％，94％，95％，96％，97％，98％，99％或更多序列相同性的氨基酸序列。37.一种核酸分子，其包含编码权利要求1-36中任一项所述的嵌合受体的多核苷酸。38.如权利要求37所述的核酸分子，还包含信号序列。39.如权利要求37或38所述的核酸分子，其中所述多核苷酸是第一多核苷酸，并且所述核酸分子包含编码不同于所述第一嵌合受体的多肽的第二多核苷酸，其任选地是第二嵌合受体。40.如权利要求35所述的核酸分子，其中第一和第二多核苷酸通过内部核糖体进入位点(IRES)或编码自切割肽或引起或促进核糖体跳跃的肽的核苷酸序列分离，所述肽任选为T2...

【专利技术属性】
技术研发人员：L·J·汤普森，V·厄德高，B·萨瑟，A·布拉曼戴姆，
申请(专利权)人：朱诺治疗学股份有限公司，
类型：发明
国别省市：美国,US