The invention relates to a method for the determination of astragaloside A by high performance liquid chromatography. The method comprises the following pretreatment of the sample containing astragaloside A: taking the sample containing astragaloside A, grinding it after drying, adding methanol, 65-75% ethanol and ammonia in a volume ratio of 8-10:0.1-0.5:0.5-1. .5 extraction solvent, fully extracted, filtered, filtrated, evaporated and dissolved. By optimizing the extraction solvent, the method can separate astragaloside A from impurities of its analogues to the maximum extent without wasting the extraction solvent and simplifying the purification steps, so as to ensure that astragaloside A is fully extracted and lay a foundation for accurate determination. The invention further optimizes the detection conditions of the liquid chromatography, selects the specific mobile phase and the detection device, and can effectively improve the detection accuracy. The method has the advantages of good specificity and high sensitivity when the content of astragaloside A is determined by the high performance liquid chromatography of the invention.
【技术实现步骤摘要】
一种采用高效液相色谱法测定黄芪甲苷含量的方法
本专利技术涉及中药中有效成分的分析
,具体涉及一种通过高效液相色谱法测定黄芪甲苷含量的方法。
技术介绍
黄芪多糖中的主要有效成份是多糖和黄芪苷。黄芪苷分为黄芪苷Ⅰ、黄芪苷Ⅱ、黄芪苷Ⅳ。其中生物活性最好的是黄芪苷IV即黄芪甲苷。黄芪甲苷不仅具有黄芪多糖的作用,还有些是黄芪多糖无法比拟的作用,其药效强度是常规黄芪多糖的2倍多,抗病毒作用更是黄芪多糖的30倍。由于含量少,效果好,更是有“超级黄芪多糖”之称。目前,本领域从黄芪中提取黄芪甲苷的常规方法为:取本品中粉约4g,精密称定,置索氏提取器中,加甲醇40ml,冷浸过夜,再加甲醇适量,加热回流4小时,提取液回收溶剂并浓缩至干,残渣加水10ml,微热使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取4次,每次40ml,合并正丁醇液,用氨试液充分洗涤2次,每次40ml,弃去氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水5ml使溶解,放冷,通过D101型大孔吸附树脂柱(内径为37.5px,柱高为300px),以水50ml洗脱,弃去水液,再用40%乙醇30ml洗脱,弃去洗脱液,继用70%乙醇80ml洗脱,收集洗脱液,蒸干,残渣加甲醇溶解,转移至5ml量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得。然而,该方法需要经过大孔树脂纯化步骤繁琐,且可能会对目标化合物造成一定的损失。
技术实现思路
本专利技术的目的是克服现有技术中黄芪甲苷在提取时受相似结构杂质干扰导致分离困难、需要进一步纯化的缺陷,提供一种通过高效液相色谱测定黄芪甲苷的含量的方法。本专利技术针对的含有黄芪甲苷的待测样品可以是黄芪药材、黄芪提取物或含有黄芪的中成药。所 ...
【技术保护点】
1.一种采用高效液相色谱法测定黄芪甲苷含量的方法,其特征在于,包括对含有黄芪甲苷的待测样品进行如下预处理:取含有黄芪甲苷的待测样品,干燥后粉碎,加入由甲醇、65~75%乙醇和氨水以体积比8~10:0.1~0.5:0.5~1.5组成的提取溶剂,充分提取后过滤,取滤液,蒸干后溶解。
【技术特征摘要】
1.一种采用高效液相色谱法测定黄芪甲苷含量的方法,其特征在于,包括对含有黄芪甲苷的待测样品进行如下预处理:取含有黄芪甲苷的待测样品,干燥后粉碎,加入由甲醇、65~75%乙醇和氨水以体积比8~10:0.1~0.5:0.5~1.5组成的提取溶剂,充分提取后过滤,取滤液,蒸干后溶解。2.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述提取溶剂由甲醇、70%乙醇和氨水以体积比9:0.1:1.2组成。3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述过滤后,用甲醇和65~75%乙醇以体积比8~10:0.1~0.5组成的混合溶剂洗涤滤渣,将所得洗涤液与所述滤液混合,蒸干。4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述过滤后,用甲醇和70%乙醇以体积比9:0.1组成的混合溶剂洗涤滤渣,将所得洗涤液与所述滤液混合,蒸干。5.根据权利要求1~4任意一项所述的方法,其特征在于,所述待测样品为黄芪药材、黄芪提取物或含有黄芪的中成药。6.根据权利要求1~5任意一项所述的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)取黄芪甲苷标准品,以甲醇为溶剂,按照浓度梯度配制多份标准品溶液;(2)将所述多份标准品溶液分别上样于高效液相色谱,采用C18色谱柱、含有38~42%乙腈且余量为...
【专利技术属性】
技术研发人员:李爱民,李永强,黄瑛,陈超,温霖,李颖,
申请(专利权)人:国珍健康科技北京有限公司,
类型:发明
国别省市:北京,11
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