一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法及其癸二烯醇类化合物技术

本发明专利技术公开了一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法及其癸二烯醇类化合物，以人工养殖的皱瘤海鞘为原料进行分离，原料易得，能够对皱瘤海鞘进行充分回收利用，避免浪费；采用高速逆流色谱进行分离，具有样品无损失、无污染、高效、快速和分离量大的优点，且具体分离步骤简单易操作；所得的新化合物(E,E)癸‑3,7‑二烯‑1‑醇未见报道，在作为香料、驱除白蚁、驱虫等方面具有潜在活性和用途，对于海洋天然产物有效成分的研究具有十分重要的意义。

A method for separating decadienyl alcohols from the sea shell of wrinkled tumor and decadienyl alcohols

The invention discloses a method for separating the decadienol compounds from the rhytid sea sheath and a decadienol compound. The artificially cultured rhytid sea sheath is used as the raw material for separating the decadienol compounds. The raw material is easy to obtain, and can be fully recycled and utilized to avoid waste; the high-speed counter-current chromatography is used for separating the rhytid sea sheath with a sample. The new compound (E, E) decane 3,7-diene 1-diol has not been reported, and it has potential activity and use as perfume, termite repellent, insect repellent and so on. It is of great significance.

【技术实现步骤摘要】
一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法及其癸二烯醇类化合物
本专利技术属于生物来源的化合物提取分离工艺
，具体涉及一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法及其癸二烯醇类化合物。
技术介绍
海鞘是尾索动物亚门海鞘纲的尾索动物，在自然界中已知有1500余种，主要分布在热带及亚热带海域。我国海鞘资源丰富，已记录的中国沿海海鞘种类有100余种，且有很多为我国所特有。据报道，海鞘中含有多种具有抗肿瘤、抗病毒、抗菌、抗炎等活性的化合物，因此，近年来，海鞘的化学成分及其生物活性成为了海洋天然产物研究的热门领域。皱瘤海鞘(Styelaplicata)是海鞘中的一种，主要分布于我国中南沿海的福建、广东和海南等，部分地区也有人工养殖。皱瘤海鞘经常在一些海产养殖过程中一同生长起来，虽然皱瘤海鞘在部分地区有作为食物食用的习惯，但大部分的皱瘤海鞘仍然是作为养殖过程中的副产物被丢弃掉，造成了大量的浪费。因此，如果能将皱瘤海鞘进行有效的利用，不仅具有一定的经济价值，也可以解决浪费问题。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处，提供了一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法及其癸二烯醇类化合物，该分离方法简单易操作，所得到的癸二烯醇类化合物(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇还未见报道，对于海洋天然产物有效成分的研究具有十分重要的意义。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之一是：一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，包括：1)取皱瘤海鞘，用乙酸乙酯反复浸提若干次直至浸提液呈无色后，合并浸提液，浓缩得到粗提物；2)步骤1)得到的粗提物用甲醇溶解，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述用甲醇溶解的粗提物，用上相溶解为浓度480～520mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4mL/min，正接正转，转速800～900r/min；温度34～36℃；检测波长：205～215nm；收集68～125min出峰对应的组份；3)取步骤2)中68～125min出峰对应的组份，用反相液相色谱分离，固定相：YMC-TriartC18；流动相：甲醇-水混合液；梯度洗脱1.5～2.5h，流动相中甲醇浓度从4～6％均匀递增到100％；流速55～65mL/min；柱温24～26℃；检测波长195～205nm、250～260nm、305～315nm4)收集步骤3)中流动相中甲醇浓度为65％～100％时对应的组份，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝1.8～2.2:0.8～1.2:0.8～1.2:2.8～3.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述的步骤3)中甲醇浓度65％～100％时对应的组份，用上相溶解为浓度480～520mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4mL/min，正接正转，转速800～900r/min；温度34～36℃；收集40～50min出峰对应的组份；5)取步骤4)中收集的40～50min出峰对应的组份，用甲醇配制成95～105mg/mL，用高效液相色谱分离：固定相：YMC-TriartC18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55％的甲醇-水混合液，再加入0.08～0.12％的甲酸；流速：1.5～2.5mL/min；柱温24～26℃；检测波长：195～205nm和205～215nm；收集115～130min出峰对应的组份；6)取步骤5)中收集的115～130min出峰对应的组份，用45～55％甲醇配制成48～52mg/mL，用高效液相色谱纯化：固定相：YMC-TriartC18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55％的甲醇-水混合液，再加入0.08～0.12％的甲酸；流速：1.5～2.5mL/min；柱温24～26℃；检测波长：195～205nm和205～215nm；收集200～210min的出峰对应的组份，得到所述癸二烯醇类化合物，为(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇。一实施例中：所述步骤2)中，以上相为流动相，以下相为流动相，用35～45mL/min的流速将固定相泵满，调节转速为800～900r/min，温度34～36℃，以2～4mL/min的流速向柱中泵入流动相，当流动相从主机出口稳定流出时，证明体系已经达到流体动力学平衡；随后再用于粗提物的高速逆流液相色谱分离。一实施例中：所述步骤2)中，高速逆流液相色谱采用TBE-300B。一实施例中：所述步骤3)中，反相液相色谱采用4250，带有DAC-50动态轴向压缩柱系统；所述固定相YMC-TriartC18的规格为50×250mm，粒径10μm。一实施例中：所述步骤4)中，以上相为流动相，以下相为流动相，用40mL/min的流速将固定相泵满，调节转速为800～900r/min，温度34～36℃，以2～4mL/min的流速向柱中泵入流动相，当流动相从主机出口稳定流出时，证明体系已经达到流体动力学平衡；随后再用于粗提物的高速逆流液相色谱分离。一实施例中：所述步骤4)中，高速逆流液相色谱采用TBE-300B。一实施例中：所述步骤5)中，所述高效液相色谱采用岛津高效液相色谱仪制备系统LC-6AD；所述固定相YMC-TriartC18半制备柱的规格为10×250mm，粒径5μm。一实施例中：所述步骤6)中，所述高效液相色谱采用岛津高效液相色谱仪制备系统LC-6AD；所述固定相YMC-TriartC18半制备柱的规格为10×250mm，粒径5μm。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案之二是：一种癸二烯醇类化合物，为(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇，其结构式如下式所示：本技术方案与
技术介绍
相比，它具有如下优点：本专利技术以人工养殖的皱瘤海鞘为原料进行分离，原料易得，能够对皱瘤海鞘进行充分回收利用，避免浪费；采用高速逆流色谱(HSCCC)进行分离，具有样品无损失、无污染、高效、快速和分离量大的优点，且具体分离步骤简单易操作；所得的新化合物(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇未见报道，在作为香料、驱除白蚁、驱虫等方面具有潜在活性和用途，对于海洋天然产物有效成分的研究具有十分重要的意义。附图说明下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步说明。图1为本专利技术分离得到的(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇在15％乙腈洗脱时的UPLC分析图谱。图2为本专利技术分离得到的(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇的MS图谱。图3为本专利技术分离得到的(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇的1H图谱。图4为本专利技术分离得到的(E,E)癸-3,7-二烯-1-醇的13C图谱。具体实施方式下面通过实施例具体说明本专利技术的内容：1)将湿重10kg的皱瘤海鞘冻干后，切成碎片，以粉碎机打碎置于5000mL烧杯中，用乙酸乙酯超声加速浸提若干次直至浸提液呈无色后，合并浸提液，旋转蒸发仪抽干溶剂，浓缩得到粗提物(qe)；2)步骤1)得到的粗提物(qe)27.1g，用甲醇溶解，用高速逆流液相色谱分离：高速逆流液相色谱系统TBE-300B；溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝1:1:1:1(V/V)，按比例将四种溶剂混合配制好，摇匀，超声30min使其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，其特征在于：包括：1)取皱瘤海鞘，用乙酸乙酯反复浸提若干次直至浸提液呈无色后，合并浸提液，浓缩得到粗提物；2)步骤1)得到的粗提物用甲醇溶解，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述用甲醇溶解的粗提物，用上相溶解为浓度480～520mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4mL/min，正接正转，转速800～900r/min；温度34～36℃；检测波长：205～215nm；收集68～125min出峰对应的组份；3)取步骤2)中68～125min出峰对应的组份，用反相液相色谱分离，固定相：YMC‑Triart C18；流动相：甲醇‑水混合液；梯度洗脱1.5～2.5h，流动相中甲醇浓度从4～6％均匀递增到100％；流速55～65mL/min；柱温24～26℃；检测波长195～205nm、250～260nm、305～315nm；4)收集步骤3)中流动相中甲醇浓度为65％～100％时对应的组份，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝1.8～2.2:0.8～1.2:0.8～1.2:2.8～3.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述的步骤3)中甲醇浓度65％～100％时对应的组份，用上相溶解为浓度480～520mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4mL/min，正接正转，转速800～900r/min；温度34～36℃；收集40～50min出峰对应的组份；5)取步骤4)中收集的40～50min出峰对应的组份，用甲醇配制成95～105mg/mL，用高效液相色谱分离：固定相：YMC‑Triart C18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55％的甲醇‑水混合液，再加入0.08～0.12％的甲酸；流速：1.5～2.5mL/min；柱温24～26℃；检测波长：195～205nm和205～215nm；收集115～130min出峰对应的组份；6)取步骤5)中收集的115～130min出峰对应的组份，用45～55％甲醇配制成48～52mg/mL，用高效液相色谱纯化：固定相：YMC‑Triart C18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55％的甲醇‑水混合液，再加入0.08～0.12％的甲酸；流速：1.5～2.5mL/min；柱温24～26℃；检测波长：195～205nm和205～215nm；收集200～210min的出峰对应的组份，得到所述癸二烯醇类化合物，为(E,E)癸‑3,7‑二烯‑1‑醇。...

【技术特征摘要】
1.一种从皱瘤海鞘中分离癸二烯醇类化合物的方法，其特征在于：包括：1)取皱瘤海鞘，用乙酸乙酯反复浸提若干次直至浸提液呈无色后，合并浸提液，浓缩得到粗提物；2)步骤1)得到的粗提物用甲醇溶解，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2:0.8～1.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述用甲醇溶解的粗提物，用上相溶解为浓度480～520mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4mL/min，正接正转，转速800～900r/min；温度34～36℃；检测波长：205～215nm；收集68～125min出峰对应的组份；3)取步骤2)中68～125min出峰对应的组份，用反相液相色谱分离，固定相：YMC-TriartC18；流动相：甲醇-水混合液；梯度洗脱1.5～2.5h，流动相中甲醇浓度从4～6％均匀递增到100％；流速55～65mL/min；柱温24～26℃；检测波长195～205nm、250～260nm、305～315nm；4)收集步骤3)中流动相中甲醇浓度为65％～100％时对应的组份，用高速逆流液相色谱分离：溶剂体系为正己烷：乙酸乙酯：甲醇：水＝1.8～2.2:0.8～1.2:0.8～1.2:2.8～3.2，充分混合后静置分层，然后分离上相与下相；取上述的步骤3)中甲醇浓度65％～100％时对应的组份，用上相溶解为浓度480～520mg/mL；以上相为固定相，以下相为流动相，流速2～4mL/min，正接正转，转速800～900r/min；温度34～36℃；收集40～50min出峰对应的组份；5)取步骤4)中收集的40～50min出峰对应的组份，用甲醇配制成95～105mg/mL，用高效液相色谱分离：固定相：YMC-TriartC18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55％的甲醇-水混合液，再加入0.08～0.12％的甲酸；流速：1.5～2.5mL/min；柱温24～26℃；检测波长：195～205nm和205～215nm；收集115～130min出峰对应的组份；6)取步骤5)中收集的115～130min出峰对应的组份，用45～55％甲醇配制成48～52mg/mL，用高效液相色谱纯化：固定相：YMC-TriartC18半制备柱；流动相：甲醇浓度为45～55％的甲醇-水混合液，再加入0...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈永轩，吴秀娜，罗联忠，张岗，许莉，秦飞，陈丹，
申请(专利权)人：厦门医学院，
类型：发明
国别省市：福建,35