The present invention discloses a CYP82E10 gene missense mutant M594 of nicotine conversion rate and its application. The missense mutant M594 of the CYP82E10 gene, which reduces nicotine conversion, has a point mutation at 342 of the CYP82E10 gene sequence contained in the missense mutant M594 of the CYP82E10 gene, which reduces nicotine conversion, relative to the CYP82E10 gene shown in the nucleotide sequence SEQ ID NO.1, and has a point mutation at T substitution of the CYP82E10 gene sequence contained in the said CYP82E10 gene mutant M594, The nucleotide sequence of the CYP82E10 gene missense mutant M594, Ding transformation rate, is shown by SEQ ID NO.2. The application of the missense mutant M594 of the CYP82E10 gene, which reduces the nicotine transformation rate, in obtaining tobacco plants with low nicotine transformation rate. In the Yunyan 87 material obtained by the missense mutant M594 of CYP82E10 gene, the nicotine conversion rate of the leaf is reduced by about 55% compared with the control, and the nicotine conversion rate is significantly reduced.
【技术实现步骤摘要】
一种降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594及其应用
本专利技术属于遗传工程
,具体涉及一种降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594及其应用。
技术介绍
尼古丁(nicotine)、去甲基尼古丁(nornicotine)、假木贼碱(anabasine)、和新烟碱(anatabine)是烟草(Nicotianatobacum)中主要的生物碱,其中尼古丁是首要的生物碱,占生物碱总含量的90-95%,去甲基尼古丁含量通常低于总生物碱的3.5%,是尼古丁通过去甲基化反应转化生成。去甲基尼古丁能够对人体健康产生危害,主要表现在它是卷烟烟气中潜在致癌物质亚硝基去甲基尼古丁(nitrosonornicotine,NNN)的合成前体,可能导致食管癌、口腔癌的发生。去甲基尼古丁也能直接诱导吸烟者血浆中蛋白的异常糖基化,也有研究表明它能与常用类固醇类药物发生共价反应,影响药效和毒性。因此,减少尼古丁转化生成去甲基尼古丁,即降低尼古丁转化率是烟草减害的重要目标。国际上有两种类型的烟草在生产中广泛应用,白肋烟和烤烟,其中白肋烟生产主要在西方发达国家及南美洲,我国主要种植烤烟。白肋烟CYP82E2亚家族的CYP82E4、CYP82E5、CYP82E10基因能够编码具有活性的尼古丁去甲基酶,是尼古丁转化的关键酶。Gavilano等通过RNAi技术抑制白肋烟强“转化株”CYP82E4及其同源基因的表达,去甲基尼古丁合成受到显著抑制,转基因植株的尼古丁转化率最低只有0.8%,甚至低于白肋烟“非转化株”普遍大约3-5%的转化率。Julio等人在1132 ...
【技术保护点】
1.一种降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594,其特征在于所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594相对于核苷酸序列为SEQ ID NO.1所示的CYP82E10基因,所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594含有的CYP82E10基因序列中342位的C被T取代发生了点突变,所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。
【技术特征摘要】
1.一种降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594,其特征在于所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594相对于核苷酸序列为SEQIDNO.1所示的CYP82E10基因,所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594含有的CYP82E10基因序列中342位的C被T取代发生了点突变,所述的降低尼古丁转化率的CYP82E10基因错义突变体M594的核苷酸序列如SEQI...
【专利技术属性】
技术研发人员:李文正,宋中邦,李梅云,王丙武,高玉龙,吴兴富,隋学艺,赵璐,李永平,
申请(专利权)人:云南省烟草农业科学研究院,
类型:发明
国别省市:云南,53
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