一种黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒及制备方法技术

本发明专利技术公开了一种黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒及制备方法。通过乳化法制备含药物的纳米颗粒乳作为内核，再通过静电喷雾法将纳米颗粒乳制备成微球即得所述的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。本发明专利技术将黏膜粘附型药物与黏膜穿透型药物结合，制备有效粘附于黏膜表面的微球，同时在微球降解过程中缓慢释放黏膜穿透型纳米颗粒，解决黏膜粘附型药物给药效率低下，黏膜穿透型纳米颗粒难以从食糜中脱出的问题，提高给药效率。

【技术实现步骤摘要】
一种黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒及制备方法
本专利技术属于药物制剂领域，涉及一种黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒及制备方法。
技术介绍
肠道给药一直是人们关注的热点话题。在肠道药物的分类中，肠道药物可以分为黏膜黏附类药物和黏膜穿透型药物，两类药物各有优缺点。黏膜黏附类药物，如海藻酸钠，羧甲基纤维素等，能够从食糜中脱出，有效的结合于肠黏膜，在局部进行药物释放(1)。药物被释放后，通过扩散效应，被肠上皮细胞吸收，但是肠黏膜表面的粘液一直处于自更新状态，使得黏膜给药的方式效率较为低下(2)。随着纳米技术的逐渐成熟，纳米颗粒由于其表面效应、小尺寸效应及宏观量子隧道效应，在药物转运方面受到广泛研究。纳米颗粒可以通过发挥自身小尺寸效应及宏观量子隧道效应的优势，通过1.肠上皮细胞摄取2.细胞旁路途径进入基底部，提高药物转运效率(3)。但是纳米药物在口服给药中一直存在着如何从食糜中脱出的问题(2,4,5)，纳米药物由于其粒径较小，粘附力相对较弱，难以有效粘附于肠黏膜表面，因此纳米颗粒的药物转运系统难以提高药物转运效率(6)。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。本专利技术的另一目的是提供该黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒的制备方法。本专利技术的目的可通过以下技术方案实现：一种黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒的制备方法，通过乳化法制备含药物的纳米颗粒乳作为内核，再通过静电喷雾法将纳米颗粒乳制备成微球即得所述的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。其特征在于所述的制备方法优选包括：将药物溶于PEG2000水溶液中作为内水相；取PEG-PLGA超声溶解于体积比1∶5至2：1的二氯甲烷/丙酮混合溶剂中，作为油相，其中PEG-PLGA的浓度为20-50mg/mL；在8000-12000r/min搅拌下，将内水相滴加到油相中混合形成初乳，然后将初乳滴加到质量分数0.5-3％的PVA水溶液形成复乳，再加入质量分数0.1-2％的PVA水溶液作为分散相，置入截留分子量为8000-14000的透析袋中透析后，取出冷冻干燥得含有药物的PEG-PLGA纳米颗粒；将含有药物的PEG-PLGA纳米颗粒置入2％海藻酸钠水溶液中，静电喷雾法制备微球即得所述的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。所述的PEG2000水溶液的质量分数为20-50mg/mL；内水相：二氯甲烷/丙酮混合溶剂：质量分数0.5-3％的PVA水溶液：质量分数0.1-2％的PVA水溶液的体积比优选1:8-12:90-110：290-310。所述的PEG-PLGA优选：PLGA15000-PEG5000-MAL,PLGA:75/25；PLGA10000-PEG2000-NHS,PLGA:50/50；PLGA5000-PEG2000-COOH,PLGA:50/50；PLGA20000-PEG3400-Folate,PLGA:75/25。5、根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的透析时间为7-9h。所述的含有药物的PEG-PLGA纳米颗粒与2％海藻酸钠水溶液的质量体积比优选1-5：2-4。所述的静电喷雾法制备微球的具体方法优选：将含有药物的PEG-PLGA纳米颗粒置入2％海藻酸钠水溶液中，使用30G针头，在15KV电压下，以50ul/min速度缓慢电喷，收集液为0.5uM氯化钙和0.5％(w/v)的聚赖氨酸混合溶液；收集完微球后，用超纯水洗脱，后加入0.1％海藻酸钠，形成多层微球纳米颗粒复合物即为所述的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。所述的药物选自：氨基水杨酸、益生菌、胞壁酰二肽等不易穿透肠屏障的药物。按照本专利技术所述的制备方法制备得到的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。本专利技术所述的制备方法在制备肠道用药的药物制剂中的应用。有益效果：本专利技术采用乳化法制备纳米颗粒，静电喷雾法制备微球。使用乳化法制备载药纳米颗粒，包封率高，药物转运效率高，能够实现快速响应，缓慢调控维持药物水平的目标，同时对纳米颗粒进行PEG修饰，提高细胞摄入能力和黏膜穿透能力，提高药物转运效率，治疗效果显著。静电喷雾法自1960年提出以来，收到广泛的关注和研究，因其能够通过控制实验环境和反应条件，迅速有效的调节制备颗粒的大小和形态受到广泛的应用，其中静电喷雾微球和是目前国际领域上研究的热点。本专利技术通过静电喷雾法制备可调节尺径的膳食纤维多壳微球，将其与黏膜穿透型纳米颗粒结合，能够保证内容生物活性，实现多壳结构，诱导靶向给药，调节缓释特性。本专利技术创新性的将黏膜粘附型的多壳微球与黏膜穿透型的纳米颗粒结合到一起，从而提高肠屏障黏膜给药的效率。通过使用多壳微球搭载纳米颗粒，提高药物在肠道中的粘附性，提高药物从食糜中脱出，粘附于肠黏膜的能力，减少药物浪费，提高药物转运效率；在多壳微球到达靶向部位时，可通过缓释作用，在黏膜表面逐渐释放黏膜穿透型纳米颗粒，纳米颗粒穿透黏膜屏障，达到基底膜，有效释放搭载药物，可有效提高药物释放转运效率，提高治疗效果，减少给药频次，预防副作用，规避药物浪费，降低成本。微球的从内到外分别为海藻酸钠，聚赖氨酸，海藻酸钠。海藻酸钠能够保护微球免于胃酸侵蚀，能够保护内容物在酸性环境下的生物活性，保护药物安全通过胃十二指肠；聚赖氨酸为pH敏感型材料，在通过酸性环境后，海藻酸钠在肠道微环境中降解，聚赖氨酸能够保护微球内容物直至靶向部位，实现靶向药物传递。达到靶向部位后，纳米颗粒缓慢释放，穿透肠黏膜，再释放纳米颗粒内搭载药物，提高转运效率。附图说明图1多壳微球纳米复合物及药物转运释放过程图2小鼠给药过程中体重变化图3肠道组织氧化应激水平图4ZO-1与Occludin3WB蛋白定量结果图5ZO-1和Occludin-3荧光定量结果图6ZO-1与Occludin-3荧光染色结果；图A为正常对照组，图B为DSS对照组，图C为传统药物治疗组，图D为微球纳米颗粒给药组。绿色荧光部分凋亡细胞染色，蓝色为细胞核。具体实施方式实施例1称取12.5mg5-氨基水杨酸溶于0.2mL50mg/ml的PEG2000水溶液中，作为内水相；称取40mgPEG-PLGA超声溶解于2mL体积比1∶1的二氯甲烷/丙酮混合溶剂中，作为油相；在10000r/min搅拌下，将内水相滴加到油相中混合形成初乳，再将初乳滴加到20mL质量分数0.5％的PVA水溶液(外水相)形成复乳。再加入60mL质量分数0.1％的PVA水溶液(分散相)，置入透析袋(截留分子量14000)中透析8h后，取出冷冻干燥得PEG-PLGA纳米颗粒。将纳米颗粒置入2％海藻酸钠水溶液中，两者的体积比为1～5，使用30G针头，在15KV电压下，以50ul/min速度缓慢电喷，收集液为0.5uM氯化钙和0.5％(w/v)的聚赖氨酸混合溶液。收集完微球后，用超纯水洗脱3遍，后加入0.1％海藻酸钠溶液进行包壳，形成多层微球纳米颗粒复合物(如图1)。实施例2本专利技术在DSS诱导的肠炎模型中进行实验验证，设立正常对照组，DSS(3,3'-二甲氧基联苯胺盐酸盐)对照组，5-氨基水杨酸传统药物治疗组，5-氨基水杨酸微球纳米粒(实施例1制备)给药组，按照50mg/Kg有效药物剂量给药，进行对比药效实验本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种黏膜粘附型外壳搭载的黏膜穿透型核心药物的制备方法，其特征在于通过乳化法制备含药物的纳米颗粒乳作为内核，再通过静电喷雾法将纳米颗粒乳制备成微球即得所述的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。

【技术特征摘要】
1.一种黏膜粘附型外壳搭载的黏膜穿透型核心药物的制备方法，其特征在于通过乳化法制备含药物的纳米颗粒乳作为内核，再通过静电喷雾法将纳米颗粒乳制备成微球即得所述的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的制备方法包括将药物溶于PEG2000水溶液中作为内水相；取PEG-PLGA超声溶解于体积比1∶5至2：1的二氯甲烷/丙酮混合溶剂中，作为油相，其中PEG-PLGA的浓度为20-50mg/mL；在8000-12000r/min搅拌下，将内水相滴加到油相中混合形成初乳，然后将初乳滴加到质量分数0.5-3％的PVA水溶液形成复乳，再加入质量分数0.1-2％的PVA水溶液作为分散相，置入截留分子量为8000-14000的透析袋中透析后，取出冷冻干燥得含有药物的PEG-PLGA纳米颗粒；将含有药物的PEG-PLGA纳米颗粒置入2％海藻酸钠水溶液中，静电喷雾法制备微球即得所述的黏膜粘附型微球搭载的黏膜穿透型纳米颗粒。3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的PEG2000水溶液的质量分数为20-50mg/mL；内水相：二氯甲烷/丙酮混合溶剂：质量分数0.5-3％的PVA水溶液：质量分数0.1-2％的PVA水溶液的体积比为1:8-12:90-110：290-310。4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于所述的PEG-PLGA...

【专利技术属性】
技术研发人员：任建安，赵成，吴秀文，陈国璞，黄金健，王革非，
申请(专利权)人：中国人民解放军南京军区南京总医院，
类型：发明
国别省市：江苏,32