利用蛋白质聚集物的解离来诊断与异常蛋白质聚集或错误折叠相关之疾病的诊断试剂盒制造技术

本公开内容涉及利用蛋白质聚集物的解离来诊断与异常蛋白质聚集或错误折叠相关之疾病的诊断试剂盒，具体涉及一种诊断试剂盒，其能够基于对解离前后之聚集蛋白质的浓度分析，准确诊断与蛋白质的异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症，包括由β‑淀粉样蛋白聚集引起的病症或疾病(例如阿尔茨海默病)以及由其他蛋白质聚集引起的病症或疾病。

Diagnostic kits for diseases associated with abnormal protein aggregation or misfolding using dissociation of protein aggregates

The present disclosure relates to a diagnostic kit for diagnosing diseases associated with abnormal protein aggregation or misfolding by dissociation of protein aggregates, in particular to a diagnostic kit capable of accurately diagnosing abnormal protein aggregation or misfolding based on analysis of the concentration of aggregated proteins before and after dissociation. Related diseases or diseases, including those caused by aggregation of beta amyloids (e.g. Alzheimer's disease) and those caused by aggregation of other proteins.

【技术实现步骤摘要】
利用蛋白质聚集物的解离来诊断与异常蛋白质聚集或错误折叠相关之疾病的诊断试剂盒本申请是申请日为2014年4月25日、申请号为201480036335.7、专利技术名称为“利用蛋白质聚集物的解离来诊断与异常蛋白质聚集或错误折叠相关之疾病的诊断试剂盒”的中国专利申请的分案申请。
本公开内容涉及一种血液诊断试剂盒，其能够基于对解离前后之聚集蛋白质的浓度分析，准确诊断与蛋白质的异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症，包括由β-淀粉样蛋白聚集引起的病症或疾病(例如阿尔茨海默病)以及由其他蛋白质聚集引起的病症或疾病。
技术介绍
神经元功能障碍和损伤可能是由有毒且易于聚集的蛋白质诱导的，许多神经系统病症都可以由这些病征体现。所述病症包括如肌萎缩性侧索硬化、阿尔茨海默病、帕金森病、朊病毒病、多聚谷氨酰胺扩增疾病、脊髓小脑共济失调、脊髓和延髓肌肉萎缩、海绵状脑病、tau蛋白病变(tauopathy)、亨廷顿病或肌张力障碍。引起这些疾病的有毒且易于聚集的蛋白质以及编码这些蛋白质的基因已经被鉴定。正常的代谢酶循环利用蛋白质，这产生了不间断的合成和降解循环。这些基因中的突变导致了错误折叠之蛋白质的异常累积和降解。已知这些错误折叠的蛋白质会导致神经元包含体(neuronalinclusion)和斑块(plaque)，其可指示神经元损伤。因此，对细胞机理的理解以及对降低、抑制和改善这些错误折叠之蛋白质所需的分子工具的鉴定是很重要的。此外，理解蛋白质错误折叠和聚集对神经元存活的影响使得能够开发出对这些病症合理且有效的治疗。阿尔茨海默病，一种最常见的形式的痴呆(dementia)，是由神经元和突触的损伤引起的神经退行性病症，其归因于在脑中正常存在的β-淀粉样蛋白和tau蛋白的异常聚集导致分别形成淀粉样蛋白斑块(Aβplaque)和神经纤维缠结(neurofibrillarytangle)。阿尔茨海默病是增龄性死亡的第三大原因，排在其之前的是脑血管疾病和癌症。已知由于该疾病的平均持续时间超过10年，因此，阿尔茨海默病给看护者造成了很大的负担，包括心理方面、经济方面和社会方面的负担。β-淀粉样蛋白(特别是在阿尔茨海默患者的脑中发现的)是分泌酶(secretase)代谢产生的肽。取决于疾病的进展状况，β-淀粉样蛋白以单体(monomer)、寡聚物(oligomer)、前原纤维(proto-fibril)、原纤维(fbril)或斑块(plaque)形式存在。其中，已知呈现活跃的动态变化的寡聚物和前原纤维是损伤脑细胞的主要原因。临床试验显示，在阿尔茨海默病症状发生之前的10至15年，脑中已出现β-淀粉样蛋白的异常聚集(PerrinRJ，FaganAM，HoltzmanDM，“MultimodaltechniquesfordiagnosisandprognosisofAlzheimer’sdisease”，Nature.2009；461：916-22)。由于β-淀粉样蛋白能够以小的单体、二聚体或三聚体形式通过血脑屏障(blood-brainbarrier，BBB)中存在的RAGE和LRP而被运输通过血脑屏障，因此，血液中β-淀粉样蛋白的浓度变化可直接与阿尔茨海默病的进展相关。对基于血液中的β-淀粉样蛋白浓度诊断阿尔茨海默病存在反对意见。有报道称，β-淀粉样蛋白随着阿尔茨海默病的进展而增加(vanOijenM，HofmanA，SoaresHD，KoudstaalPJ，BretelerMM.“PlasmaAbeta(1-40)andAbeta(1-42)andtheriskofdementia：aprospectivecase-cohortstudy.”LancetNeurol.2006；8：655-660，MayeuxR，HonigLS，TangMX，ManlyJ，SternY，SchupfN，MehtaPD.“PlasmaA[beta]40andA[beta]42andAlzheimer’sdisease：relationtoage，mortality，andrisk.”Neurology.2003；8：1185-1190)，但是也有相反的报道称，血液中的β-淀粉样蛋白随着阿尔茨海默病的进展而减少(SundstromJ，IngelssonE，RonnemaaE，ArnlovJ，GunnarssonMD，HymanBT，BasunH.etal.“PlasmabetaamyloidandtheriskofAlzheimerdiseaseanddementiainelderlymen：aprospective，population-basedcohortstudy.”ArchNeurol.2008；8：256-263)。此外，还有报道指出，血液中β-淀粉样蛋白的变化与阿尔茨海默病导致的认知能力降低无关(HanssonO，ZetterbergH，VanmechelenE，VandersticheleH，AndreassonU，LondosE，WallinA，MinthonL，BlennowK.“EvaluationofplasmaAbeta(40)andAbeta(42)aspredictorsofconversiontoAlzheimer’sdiseaseinpatientswithmildcognitiveimpairment.”NeurobiolAging.2010；8：357-367，LopezOL，KullerLH，MehtaPD，BeckerJT，GachHM，SweetRA，ChangYF，TracyR，DeKoskyST.“Plasmaamyloidlevelsandtherisk0fADinnormalsubjectsinthecardiovascularhealthstudy.”Neurology.2008；8：1664-1671)。这些研究结果的差异看起来是由于难以准确测定血液中β-淀粉样蛋白的水平造成的。目前，阿尔茨海默病的确定性诊断仅能通过死亡后的尸体解剖来进行。虽然可以通过基于身体检查、神经学检查或生理学检查间接检查症状、对脑脊液中β-淀粉样蛋白进行测量、最准确地通过脑成像监测脑的结构和功能变化以及鉴定β-淀粉样蛋白的斑块来诊断阿尔茨海默病的进展，但是这些方法都是非常侵入性的并且花费高昂。由于这些不利因素，使得难以准确诊断阿尔茨海默病。
技术实现思路
技术问题本公开内容涉及提供血液诊断试剂盒，其能够基于对解离前后之聚集蛋白质的浓度分析准确诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症，包括由β-淀粉样蛋白聚集引起的病症或疾病(例如阿尔茨海默病)以及由其他蛋白质聚集引起的病症或疾病。技术方案一方面，本公开内容提供了用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的血液诊断试剂盒，其测量施用蛋白质单体化组合物前后血浆中的蛋白质浓度。特别地，根据本公开内容的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒可包括：(a)检测单元1，其测量施用用于在体内使异常聚集或错误折叠之蛋白质单体化的组合物之前血浆中的蛋白质浓度；(b)检测单元2，其测量施用所述蛋白质单体化组合物之后血浆中的蛋白质浓度；(c)计算单元，其使用[等式本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.通过测量施用蛋白质单体化组合物前后血浆中的蛋白质浓度来诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒。

【技术特征摘要】
2014.04.02 KR 10-2014-0038989;2014.04.02 KR 10-2011.通过测量施用蛋白质单体化组合物前后血浆中的蛋白质浓度来诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒。2.用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其包括：(a)检测单元1，其测量施用蛋白质单体化组合物之前血浆中的蛋白质浓度；(b)检测单元2，其测量施用所述蛋白质单体化组合物之后血浆中的蛋白质浓度；(c)计算单元，其使用[等式1]计算所述检测单元1所测量的浓度和所述检测单元2所测量的浓度的差值，[等式1]施用蛋白质单体化组合物之后血浆中的蛋白质浓度-施用蛋白质单体化组合物之前血浆中的蛋白质浓度。3.根据权利要求1所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中施用所述蛋白质单体化组合物之后血浆中的所述蛋白质是已经由脑中的β-淀粉样蛋白寡聚物、前原纤维、原纤维和斑块的解离和单体化形成的。4.根据权利要求1所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中所述蛋白质是β-淀粉样蛋白。5.根据权利要求1所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中所述蛋白质单体化组合物包含如[化学式1]所示的EPPS作为活性成分：[化学式1]6.根据权利要求1所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中所述与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症选自帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化、多聚谷氨酰胺扩增疾病、脊髓小脑共济失调、脊髓和延髓肌肉萎缩、tau蛋白病变、肌张力障碍、丝氨酸蛋白酶抑制剂不足、肝硬化、II型糖尿病、原发性系统性淀粉样变、继发性系统性淀粉样变、额颞痴呆、老年系统性淀粉样变、家族性淀粉样多神经病、遗传性脑淀粉样血管病、血液透析相关淀粉样变、年龄相关性黄斑变性、阿尔茨海默病、放射治疗诱发性痴呆、轴突损伤、急性皮层扩散性抑郁、α-触核蛋白病、脑缺血、持续性局灶性脑缺血、周围神经再生、后癫痫持续状态模型、脊髓损伤、散发性肌萎缩性侧索硬化和朊病毒病，例如克罗伊茨费尔特-雅各布氏病、海绵状脑病和传染性海绵状脑病。7.根据权利要求2所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中所述检测单元2在施用所述蛋白质单体化组合物之后20至450小时测量血浆中的蛋白质浓度。8.根据权利要求2所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，如果所述计算单元计算出的值是正(+)值，则诊断为与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症。9.根据权利要求2所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中施用所述蛋白质单体化组合物之后血浆中的所述蛋白质是已经由脑中的β-淀粉样蛋白寡聚物、前原纤维、原纤维和斑块的解离和单体化形成的。10.根据权利要求2所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中所述蛋白质是β-淀粉样蛋白。11.根据权利要求2所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中所述蛋白质单体化组合物包含如[化学式1]所示的EPPS作为活性成分：[化学式1]12.根据权利要求2所述的用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其中与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症选自帕金森病、亨廷顿病、肌萎缩性侧索硬化、多聚谷氨酰胺扩增疾病、脊髓小脑共济失调、脊髓和延髓肌肉萎缩、tau蛋白病变、肌张力障碍、丝氨酸蛋白酶抑制剂不足、肝硬化、II型糖尿病、原发性系统性淀粉样变、继发性系统性淀粉样变、额颞痴呆、老年系统性淀粉样变、家族性淀粉样多神经病、遗传性脑淀粉样血管病、血液透析相关淀粉样变、年龄相关性黄斑变性、阿尔茨海默病、放射治疗诱发性痴呆、轴突损伤、急性皮层扩散性抑郁、α-触核蛋白病、脑缺血、持续性局灶性脑缺血、周围神经再生、后癫痫持续状态模型、脊髓损伤、散发性肌萎缩性侧索硬化和朊病毒病，例如克罗伊茨费尔特-雅各布氏病、海绵状脑病和传染性海绵状脑病。13.基于全血中蛋白质单体浓度的降低诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，所述试剂盒测量未用蛋白质单体化组合物处理的血浆中的蛋白质单体浓度、用所述蛋白质单体化组合物处理之后血浆中的蛋白质单体浓度以及用所述蛋白质单体化组合物处理之后全血中的蛋白质单体浓度。14.用于诊断与蛋白质异常聚集或错误折叠相关之疾病或病症的诊断试剂盒，其包括：(A)检测单元1’，其测量未用蛋白质单体化组合物处理的血浆中的蛋白质单体浓度；(B)检测单元2’，其测量用所述蛋白质单体化组合物处理的血浆中的蛋白质单体浓度；...

【专利技术属性】
技术研发人员：金泳秀，金东辰，金惠渊，曹秀民，金泰松，金贤真，李世真，黄教善，卢志薰，高在英，
申请(专利权)人：韩国科学技术研究院，
类型：发明
国别省市：韩国,KR