双裂海木耳乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛药物中的用途制造技术

本发明专利技术公开了一种双裂海木耳的乙酸乙酯提取物的制备方法，并公开了所制备的双裂海木耳的乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛药物或抗炎镇痛食品中的用途。本发明专利技术制备的双裂海木耳的乙酸乙酯提取物具有很高的发展潜力，可用于制备抗炎镇痛的功能性食品，也可以用于制备抗炎止痛的药物。

【技术实现步骤摘要】
双裂海木耳乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛药物中的用途
本专利技术涉及医药
，具体是双裂海木耳乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛药物中的用途。
技术介绍
海洋天然产物的发展已经大幅增长，并已确认了多达4196个化合物的生物活性。藻类占25％的海洋天然化合物，其余来自腔肠动物、棘皮动物门等。25％海洋天然产物领域的是藻类产品，主要原因是藻类可再生、食用、环保。相对于绿藻和褐藻，红藻生物多样性较高，这使得有更高机会可开发更多种活性物质。例如，先前研究报告也发现，细毛石花菜的半乳糖、从隅江篱的硫酸多糖具有止痛作用。因此，现有技术中已指出红藻具有巨大潜力，可作为新药开发的来源。因为过度捕捞，近年来双裂海木耳的数量已经减少，并威胁到其生存。目前，对于养殖型双裂海木耳生物活性的相关研究极少。现有技术中，只有两个非SCI期刊论文已经报导关于海木耳的生物活性。先前大鼠的研究结果表明，双裂海木耳的水提取物可以消除自由基，具有抗糖尿病的特性，降低甘油三酸酯水平。双裂海木耳之磷酸盐缓冲液(phosphatebufferedsaline,PBS)的提取物，也被发现有抗菌活性。活体试验结果还表明，同属不同种的大型藻锡兰海木耳的水提取物有抗肿瘤活性，以及免疫调节作用。锡兰海木耳的水提取物，也被发现有抗氧化作用。现有技术中，相对于其它红藻，目前关于双裂海木耳之活性物质成份的已知资料非常少，尚未公开关于双裂海木耳的乙酸乙酯提取物(ethylacetateextract)在抗炎、镇痛方面的研究。
技术实现思路
本专利技术的目的在于探讨养殖型大型红藻双裂海木耳之乙酸乙酯提取物的抗炎作用，以解决上述背景技术中提出的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：双裂海木耳的乙酸乙酯提取物的制备方法，步骤如下：1)将双裂海木耳在50℃的条件下烘干24小时，获得干燥双裂海木耳；2)将干燥双裂海木耳研末，浸泡在乙醇水溶液中，在室温下进行提取，获得浸泡液；3)将浸泡液经过过滤、减压浓缩后，获得乙醇粗萃物；4)将乙醇粗萃物悬浮在水中，并使用乙酸乙酯进行分配分离，且分配分离操作重复进行三次，获得双裂海木耳的乙酸乙酯提取物。作为本专利技术进一步的方案：步骤1)中，双裂海木耳为养殖型双裂海木耳。作为本专利技术再进一步的方案：步骤2)中，所述乙醇水溶液的乙醇体积浓度为95％。作为本专利技术再进一步的方案：步骤4)中，乙酸乙酯的体积用量与水的体积用量相同。作为本专利技术再进一步的方案：步骤1)中，双裂海木耳双裂海木耳的用量为干重1kg。作为本专利技术再进一步的方案：步骤3)中，所获得的乙醇粗萃物为34.3g。作为本专利技术再进一步的方案：步骤4)中，水的加入量为1公升，乙酸乙酯的加入量为1公升。上述双裂海木耳的乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛药物中的用途。上述双裂海木耳的乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛功能性食品中的用途。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：本专利技术制备的双裂海木耳的乙酸乙酯提取物，能抑制脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)所诱导巨噬细胞所产生的炎性蛋白質诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)，口服双裂海木耳的乙酸乙酯提取物可以减少角叉菜胶(carrageenan)致脚掌肿胀和炎性疼痛，且双裂海木耳的乙酸乙酯提取物可显著抑制角叉菜胶所致的白细胞浸润(leukocyteinfiltration)，以及在发炎组织内炎症介质的蛋白质表达。本专利技术制备的双裂海木耳的乙酸乙酯提取物具有很高的发展潜力，可用于制备抗炎镇痛的功能性食品，也可以用于制备抗炎止痛的药物。附图说明图1为不同浓度的双裂海木耳之乙酸乙酯提取物(PD1)对RAW264.7巨噬细胞存活率影响结果图。图2为PD1对脂多糖所诱导RAW264.7之发炎性蛋白质诱导型一氧化氮合酶的影响结果图。图3为PD1对脂多糖所诱导RAW264.7之发炎性蛋白质诱导型环氧化酶-2的影响结果图。图4为PD1对角叉菜胶所致大鼠脚掌肿胀的影响结果图。图5为随着角叉菜胶注射后的时间点，合并给予PD1大鼠之脚掌体积增加的百分比变化结果图。图6为将合并给予不同剂量PD1所造成大鼠脚掌肿胀程度对时间点的变化转换为曲线下面积值的示意图。图7为合并口服PD1或吲哚美辛对角叉菜胶所诱发大鼠热痛敏的止痛效果结果图。图8为合并口服PD1或吲哚美辛对角叉菜胶所诱发大鼠机械痛敏的止痛效果结果图。图9为合并注射PD1对角叉菜胶所致大鼠脚掌组织内白细胞浸润的影响结果图。图10为合并注射PD1对角叉菜胶所致大鼠脚掌组织内白细胞浸润的影响结定量分析图。图11为PD1对角叉菜胶所诱发大鼠脚掌组织内髓过氧物酶(绿色)、白细胞介素-1β(红色)、诱导型一氧化氮合酶(红色)之免疫活性增加的影响结果图。图12为PD1对角叉菜胶所诱发大鼠脚掌组织内髓过氧物酶(绿色)免疫活性的定量结果图。图13为PD1对角叉菜胶所诱发大鼠脚掌组织内白细胞介素-1β(红色)免疫活性的定量结果图。图14为PD1对角叉菜胶所诱发大鼠脚掌组织内诱导型一氧化氮合酶(红色)免疫活性的定量结果图。图15为PD1对角叉菜胶所诱导大鼠脚掌组织中白细胞介素-1β(红色)和诱导型一氧化氮合酶(红色)在髓过氧物酶(绿色)上表达的影响结果图。具体实施方式下面结合具体实施方式对本专利技术的技术方案作进一步详细地说明。实施例1双裂海木耳的乙酸乙酯提取物的制备方法，步骤如下：1)将双裂海木耳在50℃的条件下烘干24小时，获得干燥双裂海木耳，其中，双裂海木耳双裂海木耳的用量为干重1kg，双裂海木耳为养殖型双裂海木耳，来自台湾地区水产试验所；2)将干燥双裂海木耳研末，浸泡在乙醇水溶液中，在室温下进行提取，获得浸泡液，其中，所述乙醇水溶液的乙醇体积浓度为95％；3)将浸泡液经过过滤、减压浓缩后，获得乙醇粗萃物，所获得的乙醇粗萃物为34.3g；4)将乙醇粗萃物悬浮在水中，并使用乙酸乙酯进行分配分离，且分配分离操作重复进行三次，获得双裂海木耳的乙酸乙酯提取物，其中，水的加入量为1公升，乙酸乙酯的加入量为1公升，获得的乙酸乙酯提取物为7.7g。采用苯酚-硫酸法测定双裂海木耳的乙酸乙酯提取物(PD1)的多糖含量。测量表明，双裂海木耳的乙酸乙酯提取物(PD1)不含有多糖。参与炎症反应的细胞，会释放各种促炎介质，包括诱导型一氧化氮合酶和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)等。白细胞介素-1β激活疼痛感觉神经并传输到大脑，从而在病理条件下造成生物的疼痛反应。诱导型一氧化氮合酶主要被表达在巨噬细胞。在发炎反应中，当免疫系统的巨噬细胞被激活时，诱导型一氧化氮合酶的表现量会增加，从而加速一氧化氮的合成，而可能最终导致细胞毒性、感染性休克、癌症和其他严重的疾病。白细胞介素-1β是白细胞介素家族最强的促炎介质。先前的研究表明，注射白细胞介素-1β抑制剂或诱导型一氧化氮合酶抑制剂可以减轻神经病变性大鼠的疼痛。现有技术中指出，诱导型一氧化氮合酶和白细胞介素-1β在炎症反应中具有重要角色，相关抑制物很有潜力可发展为新的抗炎药物。当细胞处于氧化压力高于抗氧化压力的状态时，将进一步促进发炎因子的合成与释放。髓过氧物酶(myeloperoxidase,MPO)常作为氧化压力的标志物，可用于评估物质对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.双裂海木耳乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛药物中的用途。

【技术特征摘要】
1.双裂海木耳乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛药物中的用途。2.双裂海木耳乙酸乙酯提取物在制备抗炎镇痛食品中的用途。3.根据权利要求1或2所述的用途，其特征在于，所述双裂海木耳的乙酸乙酯提取物的制备方法，步骤如下：1)将双裂海木耳在50℃的条件下烘干24小时，获得干燥双裂海木耳；2)将干燥双裂海木耳研末，浸泡在乙醇水溶液中，在室温下进行提取，获得浸泡液；3)将浸泡液经过过滤、减压浓缩后，获得乙醇粗萃物；4)将乙醇粗萃物悬浮在水中，并使用乙酸乙酯进行分配分离，且分配分离操作重复进行三次，获得双裂海木耳的乙酸乙酯提取物。4.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：黄世英，温志宏，石界智，陈佩津，冯健玮，郑姝玉，洪翰君，李佩娟，
申请(专利权)人：泉州师范学院，
类型：发明
国别省市：福建,35