一种测定材料中戊二醛含量的方法技术

本发明专利技术涉及制药工业以及生物医学材料中戊二醛的检测方法技术领域，具体涉及一种测定材料中戊二醛含量的方法。该方法包括：步骤一、往样品材料中加入乙醇，配制样品溶液；步骤二、对样品溶液预处理，然后加入2,4‑二硝基苯肼使其中的戊二醛与2,4‑二硝基苯肼进行化学反应生成2,4‑二硝基苯肼的衍生物后，加入乙腈溶解成澄清溶液；步骤三、澄清溶液注入高效液相色谱柱中，测定材料中戊二醛含量。该测定材料中戊二醛含量的方法直接通过乙醇萃取材料中的戊二醛，与传统的直接使用水萃取戊二醛相比，更加方便，不需要进行过滤，离心等操作，就可以直接萃取含有戊二醛的乙醇溶液进行检测，具有操作方便、快捷的优点。

【技术实现步骤摘要】
一种测定材料中戊二醛含量的方法
本专利技术涉及制药工业以及生物医学材料中戊二醛的检测方法
，具体涉及一种测定材料中戊二醛含量的方法。
技术介绍
交联反应是可使两个或者更多的分子(一般为线性分子)相互键合交联成网络结构的较稳定分子(体型分子)反应。这种反应使线型或轻度支链型的大分子转变成三维网状结构，以此提高强度、耐热性、耐磨性、耐溶剂性等性能。制药工业以及生物医学领域，如硬、软胶囊，微球，人造血管密封胶，创伤敷料以及外科手术吸附垫等材料一般机械性能，韧性能和稳定性能较差，为了使材料具有长期生物医学性能，需要对其进行交联。戊二醛价廉易得，能改变脆性材料的机械性能，其分子式两端各有一个醛基，是一种优良的双官能团交联剂。尽管已经有报道碳化二亚胺、环氧化合物和京尼平等与胶原基材料进行交联。它们在降低细胞毒性上看似较好，但稳定胶原的作用不如戊二醛。戊二醛，可以加强大分子之间的作用,提高材料的强度，其水溶液可以在较短时间内有效地与蛋白进行交联，交联性能好，结合量多，结合牢固性较大，且能够保持蛋白质的原有构型。戊二醛作为生物组织工程材料中的交联剂，在保存生物组织工程材料的活性基础上，可以提高材料的机械性和热稳定性。生物组织工程材料大多数是高分子化合物，有些是天然高分子化合物，如胶原蛋白，明胶，聚谷氨酸、壳聚糖等在含有水溶液中，容易膨胀，甚至溶解，材料干燥后一般热稳定性能较差，机械性能差，加入少量的戊二醛进行交联，可以高效地提高其稳定性，材料在水中能减少其膨胀度，增加材料的断裂应力，拉伸强度，以及刚性等，使其更加适应组织工程上的应用。尽管有许多关于戊二醛毒性的报道，但戊二醛的交联在临床上的应用具有许多优点且已经被接受。虽然戊二醛在制药工业以及生物医学领域被广泛使用，但是它的毒性、刺激性和对环境的污染是不容忽视的。据报道戊二醛具有明显的黏膜毒性和皮肤刺激性，接触戊二醛的人员可出现不同程度的喷嚏、头痛、流泪、皮疹和慢性咳嗽。它对小动物有突变异种现象，因此被视为致癌物。1978年9月美国癌症协会(NCI)对戊二醛的致癌性进行了生物检查。目前戊二醛是英国危险物质安全管理处控管的化学物质之一，英国健康安全行政部对于必须暴露于戊二醛工作环境中的职业，制定了0.2×106的安全接触标准。在欧盟日用消费品中无有害物质的生态标签中，戊二醛被列为禁止使用的有毒或有害物质。在制药工业以及生物医学领域中，含有戊二醛的材料，尤其是直接接触人体的药物，支架材料等，其中戊二醛的含量需要明确，使用过程中，患者才能更加放心。现有技术测定戊二醛含量的方法，是直接使用纯水萃取戊二醛，需要进行过滤，离心等操作，存在操作不方便，不够快捷的缺陷。
技术实现思路
本专利技术的目的在于针对现有技术的不足，提供一种测定的方法，该测定材料中戊二醛含量的方法不需要进行过滤，离心等操作，具有操作方便、快捷的优点。为了实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：提供一种测定材料中戊二醛含量的方法，它包括以下步骤：步骤一、往样品材料中加入乙醇，配制样品溶液；步骤二、对步骤一得到的样品溶液进行预处理，得到处理液，然后往处理液中加入2,4‐二硝基苯肼，室温避光反应一段时间，处理液中的戊二醛与2,4‐二硝基苯肼进行化学反应生成2,4‐二硝基苯肼的衍生物后，加入乙腈溶解成澄清溶液；步骤三、步骤二得到的澄清溶液注入高效液相色谱柱中，采用流动相A和流动相B作为流动相梯度洗脱，并记录色谱图，进而测定材料中戊二醛含量。上述技术方案中，所述步骤一中，所述样品材料为水溶性的壳聚糖、胶原蛋白、丝素蛋白或明胶中一种或任意两种以上的组合物。上述技术方案中，所述步骤一中，所述样品材料的重量与所述乙醇的体积比为0.0001～10:1(g/ml)。上述技术方案中，所述步骤一中，所述样品材料中所需含有戊二醛的重量与样品材料的重量比范围为＞0.1:10000000。上述技术方案中，所述步骤二中，所述预处理为超声仪超声1min～72h。上述技术方案中，所述步骤二中，所述预处理为在36℃～38℃下静置1min～72h。上述技术方案中，所述步骤二中，所述预处理为连续振荡、涡旋或摇动1min～72h。上述技术方案中，所述步骤二中，所述室温避光反应的时间为3h～6h；所述处理液与所述2,4‐二硝基苯肼的体积比为1～900:1～50。上述技术方案中，所述步骤三中，所述高效液相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。上述技术方案中，所述步骤三中，所述流动相A是水，所述流动相B是乙腈，所述流动相A与所述流动相B的质量比为60～80:20～40。本专利技术与现有技术相比较，有益效果在于：(1)本专利技术提供的一种测定材料中戊二醛含量的方法，由于使用乙醇作为萃取剂萃取样品材料中的戊二醛时，戊二醛能溶解到乙醇中，而水溶性的生物材料不溶解于乙醇中，该过程能有效避免材料的溶胀作用，又能高效提取出戊二醛进行检测，该方法可以有效减少检测时大量的杂峰的出现。本申请就是提供了一种含有戊二醛的水溶性材料测定其戊二醛含量的快捷方法，直接通过乙醇萃取材料中的戊二醛，与传统的直接使用水萃取戊二醛相比，更加方便，不需要进行过滤，离心等操作，就可以直接萃取含有戊二醛的乙醇溶液进行检测，具有操作方便、快捷的优点。(2)本专利技术提供的一种测定材料中戊二醛含量的方法，具有方法简单、检测成本低的特点。附图说明图1是冷冻干燥后的胶原蛋白海绵图，其中，A和B是没有加入戊二醛交联的胶原蛋白海绵；C和D是加入戊二醛交联的胶原蛋白海绵。图2是乙腈定容2,4‐二硝基苯肼衍生物后，抽取一部分去按色谱条件检测戊二醛含量剩下来的澄清溶液。图3是戊二醛的标准曲线。图4是2,4‐二硝基苯肼，按色谱条件进样色谱图。图5是2,4‐二硝基苯肼与标准戊二醛溶液反应后，按色谱条件进样色谱图。图6是加入戊二醛的胶原蛋白进行交联所制备的胶原海绵在乙醇溶液中，戊二醛被萃取到溶液中，取1ml的溶液加入2,4‐二硝基苯肼溶液反应后，按色谱条件进样色谱图。具体实施方式为了使本专利技术所解决的技术问题、技术方案及有益效果更加清楚明白，以下结合实施例，对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例1。一种测定材料中戊二醛含量的方法，它包括以下步骤：步骤一、往样品材料中加入乙醇，配制样品溶液；本实施例中，样品材料为水溶性的壳聚糖；本实施例中，样品材料的重量与乙醇的体积比为1:1(g/ml)；其中，样品材料中所需含有戊二醛的重量与样品材料的重量比范围为＞0.1:10000000，才能测量出戊二醛的含量；步骤二、对步骤一得到的样品溶液进行超声仪超声1min～72h，得到处理液，然后往处理液中加入2,4‐二硝基苯肼，室温避光反应4h，处理液中的戊二醛与2,4‐二硝基苯肼进行化学反应生成2,4‐二硝基苯肼的衍生物后，加入乙腈溶解成澄清溶液；本实施例中，处理液与2,4‐二硝基苯肼的体积比为400:25；步骤三、步骤二得到的澄清溶液注入高效液相色谱柱中，采用流动相A和流动相B作为流动相梯度洗脱，并记录色谱图，进而测定材料中戊二醛含量。其中，高效液相色谱柱为十八烷基硅烷键合硅胶色谱柱。本实施例中，流动相A是水，流动相B是乙腈，流动相A与流动相B的质量比为70:30。实施例2。一种测定本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种测定材料中戊二醛含量的方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一、往样品材料中加入乙醇，配制样品溶液；步骤二、对步骤一得到的样品溶液进行预处理，得到处理液，然后往处理液中加入2,4‑二硝基苯肼，室温避光反应一段时间，处理液中的戊二醛与2,4‑二硝基苯肼进行化学反应生成2,4‑二硝基苯肼的衍生物后，加入乙腈溶解成澄清溶液；步骤三、步骤二得到的澄清溶液注入高效液相色谱柱中，采用流动相A和流动相B作为流动相梯度洗脱，并记录色谱图，进而测定材料中戊二醛含量。

【技术特征摘要】
1.一种测定材料中戊二醛含量的方法，其特征在于：它包括以下步骤：步骤一、往样品材料中加入乙醇，配制样品溶液；步骤二、对步骤一得到的样品溶液进行预处理，得到处理液，然后往处理液中加入2,4-二硝基苯肼，室温避光反应一段时间，处理液中的戊二醛与2,4-二硝基苯肼进行化学反应生成2,4-二硝基苯肼的衍生物后，加入乙腈溶解成澄清溶液；步骤三、步骤二得到的澄清溶液注入高效液相色谱柱中，采用流动相A和流动相B作为流动相梯度洗脱，并记录色谱图，进而测定材料中戊二醛含量。2.根据权利要求1所述的一种测定材料中戊二醛含量的方法，其特征在于：所述步骤一中，所述样品材料为水溶性的壳聚糖、胶原蛋白、丝素蛋白或明胶中一种或任意两种以上的组合物。3.根据权利要求1所述的一种测定材料中戊二醛含量的方法，其特征在于：所述步骤一中，所述样品材料的重量与所述乙醇的体积比为0.0001～10:1(g/ml)。4.根据权利要求1所述的一种测定材料中戊二醛含量的方法，其特征在于：所述步骤一中，所述样品材料中所需含有戊二醛的重量与样品材料的重量比...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭新生，周艳芳，刘雯恩，崔碧玲，范志强，钟燕南，杨洋，王勤，
申请(专利权)人：广东医科大学，
类型：发明
国别省市：广东,44