一种可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，包含有琼脂、D‑葡萄糖、麦芽浸膏及0.5至1％蛋白胨。藉此，将蛋白胨添加于牛樟芝培养基中，可有效提高牛樟芝的质量。

A medium for increasing the fruit body and enhancing the three terpenoids of bovine stem of C.

The invention discloses an ox foddish medium containing agar, D glucose, malt extract and 0.5 to 1% peptone which can increase the body of the cattle and raise the three terpenoids. Therefore, adding peptone into the medium of bovine stem can effectively improve the quality of C.

【技术实现步骤摘要】
一种可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基
本专利技术与药用真菌的培养有关；特别是指一种适用于可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基成分。
技术介绍
牛樟芝又名牛樟菇，是台湾特有的世界六大药用真菌，只生长在台湾特有百年以上的牛樟树树干腐朽的内壁，或枯死倒伏的牛樟树木材潮湿表面，因其采集不易，加上野生牛樟木近年已被台湾政府列为保育类生物之一，不允许出口。目前只有台湾有，因此异常珍贵，被称为“台湾至宝”，“森林中的红宝石”，“灵芝之王”等。牛樟芝的药用功效包含：一、解毒、排毒；二、抵抗病毒侵害、预防流行性感冒、提高免疫力，因牛樟芝成份中含有的多醣，可增进人体内的免疫调节。三、防癌、抑制癌细胞的生长；四、治疗肝炎、肝硬化、肝癌，因牛樟芝含有丰富的三萜类及多醣，具有保护肝脏、促进肝细胞再生、对抗肝癌的疗效。五、治疗各种心脑血管疾病，其中，牛樟芝除了能降低血液中的胆固醇和脂肪含量外，其腺苷能降低血小板的凝结功能，因此能治疗各种心脑血管疾病，如高血压、低血压、动脉硬化等等。随着人们对于牛樟芝及其药效认知度的提高，其保健需求日益增长，然而，目前存在的培养法：椴木栽培法、个体培养法及液体发酵法皆无法产出高质、量产且短周期的牛樟芝。亦即，目前仍缺乏能培养出高质量且短周期的牛樟芝培育方式。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术目的在于提供一种可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，建立牛樟芝最适培养基及各成分指标。为达成上述目的，本专利技术提供一种可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，包含有琼脂、D-葡萄糖、麦芽浸膏及0.5至1％蛋白胨。在本专利技术中，所述的牛樟芝培养基的PH值范围为5.6±0.2。在本专利技术中，该蛋白胨为植物性蛋白胨。在本专利技术中，该植物性蛋白胨优选为大豆蛋白胨。在本专利技术中，该培养基还包含五谷杂粮。在本专利技术中，该五谷杂粮包含10-15％的紫米。在本专利技术中，该琼脂、D-葡萄糖及麦芽浸膏的含量分别为1.5-2％、3-5％及2-3％。在本专利技术中，该琼脂、D-葡萄糖及麦芽浸膏的含量分别为2％、4％及2％。本专利技术的效果在于添加五谷杂粮及植物性蛋白胨等于牛樟芝培养基中，能有效提高牛樟芝的质量。附图说明下面结合附图和实施例对本专利技术作进一步说明。图1为培养基A0.5及培养基P0.5高效液相色谱法(HPLC)分析。图2为本专利技术所得牛樟芝对急性酒精肝损伤小鼠ALT和AST的影响。图3为本专利技术所得牛樟芝对急性酒精肝损伤小鼠MDA、GSH-Px和SOD水平的影响。具体实施方式实施例一牛樟芝最佳培养条件探索及其成分分析菌种来源台湾中华科技大学真菌与植物生技团队山上采集新鲜牛樟菇后分离而得。最佳培养条件探索MEA培养基主要是用来进行真菌(霉菌、酵母菌等)的分离、计数和培养，而本专利技术培养基包含基本成分：五谷杂粮(玉米、稻米或小麦等)，其中包含10-15％的紫米，故色泽偏红，另外更添加了0.1-1％的蛋白胨，其中，蛋白胨减缓成长速度，故能长出类似子实体结构。牛樟芝子实体的培养装置主要包含有：一袋体，由一环壁与一顶壁构成，使其顶侧形成一开口，内部形成一容置空间。上述培养基容置于该袋体的容置空间中，藉以培养牛樟芝。利用此种培养方式可大幅增加产量与降低成本。本专利技术的实验以固态培养基为主，并以五种培养基条件进行培养，该五种培养基分别以MEA、P0.1、P0.5、A0.1、A0.5表示，其中对照组为MEA培养基，实验组为加入0.1％及0.5％动、植物性蛋白胨，如表一所示。表一、各组培养基成份表中培养基的配置方法为：将琼脂、D-葡萄糖、麦芽浸膏及蛋白胨加入蒸馏水配制成1升溶液后，于121℃高温下灭菌15分钟，再将PH值调至5.6±0.2。其中，琼脂、D-葡萄糖及麦芽浸膏较佳含量分别为2％、4％及2％。直径生长与干重比较牛樟菌接种时以钻孔器进行打洞，以控制每次接种的菌种直径都相同，再以挑菌棒取一块放入培养基中央，之后放入26℃培养箱进行培养1-2个月，测量并纪录菌丝生长直径，之后在烘箱中烘干46小时，烘干后用剪刀剪去不含樟芝菌丝的培养基部分，并秤重记录，结果如下表二。表二、牛樟菌于五种培养基下直径增加与干重比较将直径与干重增加最显著的组别P0.5及A0.5(培养2个月后)进行高效液相色谱法(HPLC)分析，结果如图1显示，图中所标记的A、B峰于P0.5中单独存在，且C峰较高。故确定牛樟芝最适固体培养条件为P0.5组所含成份。指标成分分析本专利技术培养基(P0.5)的特征在于添加0.5-1％植物性蛋白胨，其指标成分含量如下表三。表三、本专利技术培养基所得牛樟芝指标成分含量实施例二牛樟芝对于肝脏损伤的修护乙醇诱导的急性酒精肝损伤小鼠模型C57BL/6小鼠经过一周的适应以后，随机分为三组，每组六只。分组方式如下表四：表四、牛樟芝对于肝脏损伤的修护实验动物分组分组样品处理方式(灌胃)空白对照组生理食盐水急性酒精肝损模型组60％酒精(12mL/kg)牛樟芝菌粉组牛樟芝菌粉(1.5g/kg)生理盐水和牛樟芝菌粉每天上午9点给予，连续灌胃30天之后，小鼠禁食6小时，然后灌胃酒精(12mL/kg，60％)。16小时后处死小鼠并取血，其血清用来测定各项生化参数；另取部分小鼠肝脏，加入定量生理盐水制备成肝组织匀浆液，并评估其肝损伤程度。牛樟芝对肝损伤标志性酶活性的影响谷丙转氨酶(ALT)和谷草转氨酶(AST)是肝脏内的标志性酶类，当肝脏损伤后，二者会产生异常升高。该实验考察牛樟芝菌粉对急性酒精肝损伤小鼠ALT和AST含量的影响，结果如图2所示。与对照组相比，模型组小鼠ALT和AST活性明显升高。牛樟芝菌粉能显著抑制急性酒精肝损伤小鼠ALT和AST活性的升高，其中，与空白组比较，***p<0.001；与模型组比较，###p<0.001，##p<0.01。牛樟芝对氧化性损伤相关指标的影响MDA为脂质过氧化所产生的二级产物，SOD和GSH-Px是肝脏清除过氧化物，防止氧化性损伤的关键酶，肝脏MDA含量以及SOD和GSH-Px酶活性可反映肝脏内脂质过氧化及氧化性损伤的程度。该实验考察牛樟芝菌粉对急性酒精肝损伤小鼠MDA含量以及SOD和GSH-Px酶活性的影响，结果如图3所示。与对照组相比，模型组小鼠的MDA含量明显升高，而SOD和GSH-Px活性显著降低。牛樟芝菌粉能显著的抑制急性酒精肝损伤小鼠MDA含量的升高,以及SOD和GSH-Px活性的降低，其中，与空白组比较，***p<0.001；与模型组比较，##p<0.01。以上实验显示，牛樟芝菌粉对小鼠急性酒精肝损伤具有一定的保护作用。综上所述，利用本专利技术牛樟芝培养基确实能够产出高质量且短周期的牛樟芝。以上所述，仅为本专利技术较佳实施例而已，故不能依此限定本专利技术实施的范围，即依本专利技术专利范围及说明书内容所作的等效变化与修饰，皆应仍属本专利技术涵盖的范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，包含琼脂、D‑葡萄糖、麦芽浸膏及0.5至1％之蛋白胨。

【技术特征摘要】
1.一种可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，包含琼脂、D-葡萄糖、麦芽浸膏及0.5至1％之蛋白胨。2.如权利要求1所述的可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，其特征在于，其PH值范围为5.6±0.2。3.如权利要求1所述的可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，其特征在于，该蛋白胨为植物性蛋白胨。4.如权利要求3所述的可增加牛樟芝子实体及提升三萜类的牛樟芝培养基，其特征在于，该植物性蛋白胨为大豆蛋白胨。5.如权利要求1所述的可增加牛樟芝子...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴黉坦，王贵弘，陈煜沛，郭钟达，李定宇，张育奇，孙鹏飞，
申请(专利权)人：厦门医学院，中华学校财团法人中华科技大学，
类型：发明
国别省市：福建,35