微RNA hsa-mir-127-3p及其类似物，以及表达该微RNA载体的应用制造技术

本发明专利技术涉及微RNA hsa‑mir‑127‑3p及其类似物，以及表达该微RNA载体的应用。本发明专利技术提供微RNA hsa‑mir‑127‑3p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用；hsa‑mir‑127‑3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。hsa‑mir‑127‑3p的表达有助于机体对于流感病毒的控制，通过靶向流感病毒的PB2、M和NS上的片段，从而降解其mRNA。

Micro RNA hsa-mir-127-3p and its analogues, and application of expressing the micro RNA carrier

The present invention relates to micro RNA HSA Mir Mir 127 3P and its analogues, as well as the application of the micro RNA carrier. The invention provides an application of the micro RNA HSA Mir Mir 3p in any of the following terms: (1) preparation of an application in the diagnosis of influenza products; (2) preparation of influenza prevention products; (3) applications in the preparation of influenza products; (4) preparation of influenza virus inhibitors; the nucleotide sequence of the HSA Mir 127 3P, such as SEQ ID NO .1 shows. The expression of hsa_mir_127_3pis helpful for the control of influenza viruses by targeting the fragments of PB2, M and NS of influenza viruses, thereby degrading their mRNA.

【技术实现步骤摘要】
微RNAhsa-mir-127-3p及其类似物，以及表达该微RNA载体的应用
本专利技术总地涉及生物
，具体涉及微RNAhsa-mir-127-3p及其类似物，以及表达该微RNA载体的应用。
技术介绍
流感病毒(Influenzavirus)对人类的健康造成极大危害，在已经过去的20世纪，人类发生过4次大规模的流感流行，包括1918年的“西班牙流感”大流行、1957年的“亚洲流感”大流行、1968年的“香港流感”大流行和1977年的“俄罗斯流感”大流行。这些流感的大流行使得人类生命财产及经济发展遭受了巨大的打击。流感病毒属于正粘病毒科，是一类分节段、有包膜的单链负链RNA病毒，传染性强且易发生变异，包括A、B、C三型，可感染不同宿主。其中A型流感病毒可以感染人类、禽类及哺乳动物，是引起季节性流行性感冒的主要病原体；B型、C型流感病毒则主要感染人类。近年来在猪和牛体内分离到新的流感病毒，由于此新病毒与A、B、C型流感病毒差异很大，被定义为新的D型流感病毒。A型流感病毒又被称作甲型流感病毒，可依据其表面抗原血凝素(Hemagglutinin，HA)、神经氨酸酶(Neuraminidase，NA)种类分为不同亚型，截止到目前为止已经发现了18种亚型的HA和11种亚型的NA。A型流感病毒近年来在我国呈现季节性流行趋势。目前人类对流感病毒感染尚没有有效疗法。尽管由死病毒、减毒毒株或者重组表面糖蛋白组成的抗流感病毒疫苗能够有效地保护70％-80％的成人免于患病，但是疫苗只能针对一小部分病毒，对于新的潜在爆发的毒株可能没有保护作用。用于治疗流感病感染的另一种手段是使用病毒抑制剂。这些抑制剂包括：Amamtadine,Rimatadine,Relenza和Tamiflu。临床结果表明，尽管使用这些抑制剂对部分患者有一定的疗效，但是其很容易诱导产生病毒抗性株和具有很强的副作用，特别对中枢神经系统的影响很大。鉴于近两年流感病毒频繁暴发，所以研发有效抑制流感病毒感染的方法就显得尤为重要。微RNA(microRNA，miRNA)是一种大小约21-23个碱基的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成。microRNA通过mRNA(messengerRNA)的3’非翻译区(3’untranslationalregion,3’UTR)相互作用，从而调控mRNA的翻译，进而广泛作用于肿瘤、炎症等各个生物学过程。目前研究证实microRNA在细胞对抗病毒过程中扮演重要的调控角色。研究者认为miRNA可以广泛的参与调控病毒感染哺乳动物细胞的过程，这种调控作用可以促进病毒复制也可以抑制病毒复制，任何miRNA都可能具有潜在的，独立于其细胞功能之外的抗病毒作用。hsa-mir-127-3p(miRBase编号：MIMAT0000446)，其序列如下所示：UCGGAUCCGUCUGAGCUUGGCU。目前研究发现，mir-127-3p主要在肿瘤的发生发展中发挥重要生物学功能。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供微RNAhsa-mir-127-3p及其类似物，以及表达该微RNA载体的一种应用。本专利技术提供了微RNAhsa-mir-127-3p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用。所述hsa-mir-127-3p的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。其中，hsa-mir-127-3p能够结合流感病毒中PB2、M和NS上的片段，其结合位点可为如序列表的SEQIDNO.2-SEQIDNO.7所示的DNA片段。其中，所述流感病毒抑制剂为抑制流感病毒复制的抑制剂。其中，所述微RNAhsa-mir-127-3p可通过化学合成获得，也可通过构建表达载体进行表达获得。优选地，根据前述的应用，所述流感为甲型流感；所述流感病毒为A型流感病毒，优选自亚型H1N1、H3N2和H9N2中的一种或多种。所述流感病毒具体可选自InfluenzavirusA/PR8/34(H1N1,PR8)、A/WSN/33(H1N1,WSN),A/Jiangxi/262/2005(H3N2)、A/Swine/Fujian/0325/2008(H1N1),A/Chicken/Liaoning/1/100(H9N2)中的一种或多种。或优选地，根据前述的应用，所述产品为药物或保健品。本专利技术还提供了上述hsa-mir-127-3p的类似物在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用。优选地，根据前述的应用，所述流感为甲型流感；所述流感病毒为A型流感病毒，优选自亚型H1N1、H3N2和H9N2中的一种或多种。所述流感病毒具体可选自InfluenzavirusA/PR8/34(H1N1,PR8)、A/WSN/33(H1N1,WSN),A/Jiangxi/262/2005(H3N2)、A/Swine/Fujian/0325/2008(H1N1),A/Chicken/Liaoning/1/100(H9N2)中的一种或多种。优选地，根据前述的应用，所述产品为药物或保健品。或优选地，所述类似物为模拟物(hsa-mir-127-3pmimic)或激动剂(hsa-mir-127-3pagomir)。其中，所述模拟物为一种RNA分子，可以通过载体导入细胞内或者直接运用化学合成的方法合成，上调相应miRNA在细胞内或者活体内miRNA浓度，从而调控基因表达。所述激动剂为经过特殊标记和化学修饰的双链小RNA，通过模拟相应miRNA进入miRNA效应器复合物(miRISC，miRNA-inducedsilencingcomplex)来调节靶mRNA的表达而发挥作用。本专利技术还提供了表达前述hsa-mir-127-3p的载体在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用。优选地，根据前述的应用，所述流感为甲型流感；所述流感病毒为A型流感病毒，优选自亚型H1N1、H3N2和H9N2中的一种或多种。所述流感病毒具体可选自InfluenzavirusA/PR8/34(H1N1,PR8)、A/WSN/33(H1N1,WSN),A/Jiangxi/262/2005(H3N2)、A/Swine/Fujian/0325/2008(H1N1),A/Chicken/Liaoning/1/100(H9N2)中的一种或多种。或优选地，根据前述的应用，所述产品为药物或保健品。本专利技术发现hsa-mir-127-3p的表达有助于机体对于流感病毒的控制，通过靶向流感病毒的PB2、M和NS上的片段，从而降解其mRNA。细胞水平实验结果表明，该microRNA可以有效地抑制PR8以及H3N2的复制，为其用于流感病毒的治疗与预防提供了实验依据。本专利技术提供的microRNA有望作为新型的流感药物，具有重大的价值。附图说明图1为本专利技术实施例2Hsa-mir-127-3p在PR8本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.微RNA hsa‑mir‑127‑3p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用；所述hsa‑mir‑127‑3p的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.微RNAhsa-mir-127-3p在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的应用；所述hsa-mir-127-3p的核苷酸序列如SEQIDNO.1所示。2.根据权利要求1所述的应用，所述流感为甲型流感；所述流感病毒为A型流感病毒，优选自亚型H1N1、H3N2和H9N2中的一种或多种。3.根据权利要求1所述的应用，所述产品为药物或保健品。4.权利要求1所述hsa-mir-127-3p的类似物在如下任一项中的应用：(1)制备诊断流感产品中的应用；(2)制备预防流感产品中的应用；(3)制备治疗流感产品中的应用；(4)制备流感病毒抑制剂中的...

【专利技术属性】
技术研发人员：方敏，孟颂东，王静，彭善鑫，魏松涛，
申请(专利权)人：中国科学院微生物研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11