The invention relates to saRNA targeting C/EBP alpha transcripts and a therapeutic composition comprising the saRNA. A method of using a therapeutic composition is also provided.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】C/EBPαSARNA组合物和使用方法相关申请的交叉引用本申请要求2015年4月22日提交的美国临时申请号62/150,889、2015年10月1日提交的美国临时申请号62/235,778和2016年3月15日提交的美国临时申请号62/308,521的优先权，所述每篇文献的内容通过引用的方式完整并入本文。序列表的引用本申请随电子格式的序列表一起提交。电子格式的序列表中的信息通过引用的方式完整并入本文。
本专利技术涉及用于调节C/EBPα和C/EBPα途径的多核苷酸(尤其saRNA)、组合物，并且涉及在治疗性应用如治疗代谢疾病、过度增生性疾病和调节干细胞系中使用该组合物的方法。专利技术背景CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα、C/EBPα、C/EBPA或CEBPA)是一种在人类和大鼠之间保守的亮氨酸拉链蛋白。这种核转录因子富含于肝细胞、骨髓单核细胞、脂肪细胞以及其他类型的乳腺上皮细胞中[Lekstrom-Himes等人,J.Bio.Chem,vol.273,28545-28548(1998)]。它由N端部分中的两个反式激活结构域和介导与其他C/EBP家族成员二聚化的亮氨酸拉链区域和在C端部分的DNA结合结构域组成。C/EBP转录因子家族的结合位点存在于参与维持正常肝细胞功能和损伤反应的多种基因的启动子区中。C/EBPα对参与免疫反应和炎症反应、发育、细胞增殖、抗凋亡和几条代谢途径的几种肝特异性基因的转录具有多效性影响[Darlington等人,CurrentOpinionofGeneticDevelopment,vol.5(5),565-570(1...
【技术保护点】
1.上调C/EBPα基因表达的分离的合成性saRNA，其中saRNA至少80％互补于SEQ ID No.77上的区域，并且其中saRNA具有14‑30个核苷酸。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.04.22 US 62/150,889;2015.10.01 US 62/235,778;1.上调C/EBPα基因表达的分离的合成性saRNA，其中saRNA至少80％互补于SEQIDNo.77上的区域，并且其中saRNA具有14-30个核苷酸。2.根据权利要求1所述的saRNA，其中saRNA为单链。3.根据权利要求2所述的saRNA，其中saRNA包含3’突出端。4.根据权利要求2所述的saRNA，其中saRNA是经修饰的。5.根据权利要求4所述的saRNA，其中saRNA包含至少2个修饰。6.根据权利要求4所述的saRNA，其中所述修饰包括2’-F、2’-OMe、反转脱氧核糖或核苷酸间硫代磷酸酯键的任一种。7.根据权利要求2所述的saRNA，其中所述saRNA包含选自SEQIDNo.35、37、39、41、43、45、47、49、93(AW51)和109(CEBPA51)的序列。8.根据权利要求1所述的saRNA，其中所述saRNA为双链并且包含反义链和有义链。9.根据权利要求5所述的saRNA，其中所述反义链包含选自SEQIDNo.35、37、39、41、43、45、47、49、93(AW51)和109(CEBPA51)的序列。10.根据权利要求6所述的saRNA，其中所述有义链包含选自SEQIDNo.34、36、38、40、42、44、48、94和110的序列。11.根据权利要求8所述的saRNA，其中所述saRNA是经修饰的。12.根据权利要求11所述的saRNA，其中所述saRNA包含至少2个修饰。13.根据权利要求11所述的saRNA，其中所述修饰可以包括2’-F、2’-OMe、反转脱氧核糖或核苷酸间硫代磷酸酯键的任一种。14.根据权利要求11所述的saRNA，其中所述修饰在有义链上。15.根据权利要求11所述的saRNA，其中所述修饰在有义链和反义链两者上。16.根据权利要求1所述的saRNA，其中所述saRNA是缀合的。17.根据权利要求16所述的saRNA，其中所述saRNA与糖配体缀合。18.上调细胞中C/EBPα基因的方法，包括向所述细胞施用权利要求1-15中任一项所述的saRNA。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述细胞是正在增殖的细胞。20.根据权利要求19所述的方法，其中所述细胞是癌细胞。21.根据权利要求20所述的方法，其中所述细胞是肝细胞癌(HCC)细胞。22.根据权利要求18所述的方法，其中C/EBPαmRNA上调的EC50高于1.0。23.根据权利要求18所述的方法，其中C/EBPα基因上调至少20％。24.根据权利要求22所述的方法，其中C/EBPα基因上调至少2倍。25.上调细胞中的基因表达的方法，所述基因选自丙氨酸-乙醛酸氨基转移酶(AGXT)、细胞色素P4503A4(CYP3A4)、鸟氨酸氨甲酰基转移酶(OTC)或肝细胞核因子4-α(HNF4a)，所述方法包括施用上调C/EBPα基因表达的分离的合成性saRNA或其药物组合物，其中所述saRNA至少80％互补于SEQIDNo.77上的区域，并且其中所述saRNA具有14-30个核苷酸。26.根据权利要求25所述的方法，其中所述细胞是正在过度增殖的细胞。27.根据权利要求26所述的方法，其中所述细胞是癌细胞。28.根据权利要求27所述的方法，其中所述细胞是肝细胞癌(HCC)细胞。29.根据权利要求25所述的方法，其中所述细胞不是正在过度增殖的细胞。30.根据权利要求29所述的方法，其中所述细胞是人原代肝细胞。31.根据权利要求25所述的方法，其中从C/EBPα基因的编码链转录的反义RNA转录物未被切割。32.根据权利要求25所述的方法，其中所述saRNA与Ago2蛋白结合。33.根据权利要求25所述的方法，其中所述基因表达上调至少20％。34.根据权利要求26所述的方法，其中所述基因表达上调至少2倍。35.治疗有需求的受试者的肝纤维化、肝衰竭或非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的方法，包括施用上调C/EBPα基因表达的分离的合成性saRNA或其药物组合物，其中所述saRNA至少80％互补于SEQIDNo.77上的区域，并且其中所述saRNA具有14-30个核苷酸。36.根据权利要求35所述的方法，其中所述肝衰竭是急性肝衰竭。37.根据权利要求35所述的方法，其中所述受试者的总胆红素(TBIL)水平、循环丙氨酸氨基转移酶(ALT)水平、天冬氨酸氨基转移酶(AST)水平，碱性磷酸酶(ALP)水平、γ-谷氨酰基-转肽酶(GGT)水平、肝羟脯氨酸水平、凝血酶原时间、氨或肝甘油三酯(肝TG)的水平降低。38.根据权利要求35所述的方法，其中所述受试者的血清白蛋白水平、总蛋白水平增加。39.根据权利要求35所述的方法，其中所述受试者的纤维组织或假小叶形成减少。40.治疗有需求的受试者的II型糖尿病或胰岛素抵抗的方法，包括施用上调C/EBPα基因表达的分离的合成性saRNA或其药物组合物，其中所述saRNA至少80％互补于SEQIDNo.77上的区域，并且其中所述saRNA具有14-30个核苷酸。41.根据权利要求40所述的方法，其中所述受试者的肝脏胆固醇水平、血清AST水平、空腹葡萄糖水平、甘油三酯与HDL-C的比率或肝与身体的比率降低。42.根据权利要求40所述的方法，其中所述受试者的胰岛素水平升高。43.根据权利要求25、35或40所述的方法，其中所述saRNA为双链并且包含反义链和有义链。44.根据权利要求43所述的方法，其中所述saRNA的反义链和/或有义链包含3’突出端。45.根据权利要求43所述的saRNA，其中所述saRNA是经修饰的。46.根据权利要求45所述的saRNA，其中所述saRNA包含至少2个修饰。47.根据权利要求45所述的saRNA，其中所述修饰可以包括2’-F、2’-OMe、反转脱氧核糖或核苷酸间硫代磷酸酯键的任一种。48.根据权利要求45所述的saRNA，其中所述修饰在有义链上。49.根据权利要求45所述的saRNA，其中所述修饰在有义链和反义链两者上。50.根据权利要求43所述的方法，其中所述反义链包含选自SEQIDNo.2、4、6、8、10、12、14、16、18、20、22、24、26、28、35、37、39、41、43、45、47、49、93(AW51)和109(CEBPA51)的序列。51.根据权利要求50所述的方法，其中所述有义链包含选自SEQIDNo.1、3、5、7、9、11、13、15、17、19、21、23、25、2...
【专利技术属性】
技术研发人员：A·瓦格纳，R·哈比卜，H·E·胡贝尔，P·萨特罗姆，E·B·斯图夫纳，M·霍斯巴赫，M·卡兰波特，HP·沃尔洛赫尔，
申请(专利权)人：米纳治疗有限公司，
类型：发明
国别省市：英国,GB
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