The invention is a preparation method of acclimated into a suspension culture of adherent cells, which has a process of cultivating adherent cells in contact with a lipoprotein forming polymer forming body; a production method of nucleic acid or protein encoded by an alien gene is based on the following method, that is, it is cultivated by this method. An adhesion type cell domesticated into a suspension culture; a suspension culture acclimation promoter formed by a liporing structure polymer forming body; used to domesticate adherent cells into a suspension culture in liquid medium and use a liporing structure polymer forming body; at least the bottom surface is composed of a fat containing ring structure polymer. A container for the suspension culture and acclimatization of a type of adherent cells formed by a type of type; an induction method for epithelial leaf transformation; it has the process of cultivating adherent epithelial cells in contact with a lipoprotein forming polymer forming body; the production method of nucleic acids or proteins encoded by foreign genes is based on the following methods Then, through the induction method, the adhesive cells transformed by epithelial mesenchymal cells were cultured.
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】悬浮培养驯化粘附型细胞的制备方法、粘附型上皮细胞的上皮间叶转化诱导方法及其利用
本专利技术涉及驯化成悬浮培养的粘附型细胞的制备方法。此外,本专利技术涉及粘附型上皮细胞的上皮间叶转化的诱导方法。
技术介绍
近年来,代替由低分子化合物形成的医药品,副作用少的生物医药品的研究盛行。生物医药品为通过基因重组技术所制造的重组医药品。例如,作为重组医药品,已知将用于癌治疗、风湿治疗的抗体、作为用于增加红血球的激素的促红细胞生成素(EPO)等蛋白质作为成分的重组医药品。然而,重组医药品有时用于治疗的给药量多且用于生产的费用高,还没有充分普及。因此,提高生产率成为一个问题。重组医药品可通过例如下述方法生产:以在CHO(中国仓鼠的卵巢;ChineseHamsterOvary)细胞等粘附型细胞中导入目标蛋白质的基因、在悬浮状态下进行增殖的方式,制备重组CHO细胞,在该重组CHO细胞内使目标蛋白质生物合成。通常,细胞在悬浮培养系统中粘附型细胞的平均倍增时间变迟。因此,为了提高增殖能力需要驯化成适于悬浮培养环境的操作。作为使粘附型细胞驯化成悬浮培养的方法,例如专利文献1中记载了下述方法:通过将编码目标蛋白质的基因和具有二氢叶酸还原酶基因的质粒向CHO细胞中进行基因导入,将得到的重组CHO细胞在与通常相比细胞密度低的条件下反复进行培养,从而将重组CHO细胞在悬浮状态下进行培养。然而,由于该方法为反复进行培养直到使CHO细胞成为悬浮状态的方法,因此需要8周左右的长时间。此外,当传代培养时间变长时,会增加对基因的变异、细胞的变质等状态进行管理、确认的劳力和时间以及费用。此外,专利文献2 ...
【技术保护点】
1.一种驯化成悬浮培养的粘附型细胞的制备方法,具有将粘附型细胞在与含脂环结构聚合物成型体接触的状态下进行培养的工序。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2015.12.18 JP 2015-247270;2016.10.28 JP 2016-211701.一种驯化成悬浮培养的粘附型细胞的制备方法,具有将粘附型细胞在与含脂环结构聚合物成型体接触的状态下进行培养的工序。2.根据权利要求1所述的粘附型细胞的制备方法,其中,所述粘附型细胞为表达外来基因的经基因重组的粘附型细胞。3.根据权利要求2所述的粘附型细胞的制备方法,其中,所述外来基因为编码蛋白质的基因。4.根据权利要求1~3中任一项所述的粘附型细胞的制备方法,其中,所述粘附型细胞为来自动物的细胞。5.根据权利要求4所述的粘附型细胞的制备方法,其中,所述来自动物的细胞为CHO细胞。6.一种由外来基因编码的核酸或蛋白质的生产方法,基于以下方式进行:通过权利要求1~5中任一项所述的粘附型细胞的制备方法而培养所述驯化成悬浮培养的粘附型细胞。7.一种悬浮培养驯化促进剂,由含脂环结构聚合物成型体形成。8.一种含脂环结构聚合物成型体的使用,用于使粘附型细胞驯化成在液体培养基中悬浮培养。9.一种粘附型细胞的悬浮培养驯化用容器,至少底面由含脂环...
【专利技术属性】
技术研发人员:平野孝明,三村由美子,
申请(专利权)人:日本瑞翁株式会社,
类型:发明
国别省市:日本,JP
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